(四)实验方法: 简单染色: (1)涂片:取干净载玻片一块,在载玻片中 央加一滴蒸馏水,按无菌操作法取大肠杆菌 涂片,做成浓菌液,注意取菌不要太多 (2)晾干:让涂片自然晾干或者在酒精灯火 焰上方文火烘千。 3)固定:手执瓌片一端,让菌膜朝上,通 过火焰23次固定(以不烫手为宜)
◼ 1、简单染色： ◼ （1）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片中 央加一滴蒸馏水，按无菌操作法取大肠杆菌 涂片，做成浓菌液，注意取菌不要太多。 ◼ （2）晾干：让涂片自然晾干或者在酒精灯火 焰上方文火烘干。 ◼ （3）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通 过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。 (四）实验方法：
(4)染色:将固定过的涂片放在废液缸上 的搁架上,加复红染色1-2min。 (5)水洗:用水洗去涂片上的染色液。 (6)千燥:将洗过的涂片放在空气中晾干 或用吸水纸吸千。 (7)镜检:先低倍观察,再高倍观察,并 找出适当的视野后,将高倍镜转出,在涂 片上加香柏油一滴,将油镜头浸入油滴中 仔细调焦观察细菌的形态
◼ （4）染色：将固定过的涂片放在废液缸上 的搁架上，加复红染色1-2min。 ◼ （5）水洗：用水洗去涂片上的染色液。 ◼ （6）干燥：将洗过的涂片放在空气中晾干 或用吸水纸吸干。 ◼ （7）镜检：先低倍观察，再高倍观察，并 找出适当的视野后，将高倍镜转出，在涂 片上加香柏油一滴，将油镜头浸入油滴中 仔细调焦观察细菌的形态
革兰氏染色: (1)涂片(2)晾干(3)固定,与简单染 色法相同 (4)结晶紫染色:将玻片置于J废液缸玻片 搁架上,加适量(以盖满细菌涂面)的结 晶紫染色液染色1分钟;水洗:倾去染色 液,用水小v心地冲洗。 (5)媒染:碘液,媒染1min;水洗:用 水洗去碘液
◼ 2、革兰氏染色： ◼ （1）涂片（2）晾干（3）固定，与简单染 色法相同 ◼ （4）结晶紫染色：将玻片置于废液缸玻片 搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结 晶紫染色液染色1分钟；水洗：倾去染色 液，用水小心地冲洗。 ◼ （5）媒染：碘液，媒染1min；水洗：用 水洗去碘液
(6)脱色:将玻片倾斜,连续滴加95‰乙 醇脱色20-255至流出液无色,立即水洗。 (7)复染:滴加复红复染3-5min;水洗: 用水洗去涂片上的复红染色液 ■(8)晾干:将染好的涂片用吸水纸吸干。 ■(9)镜检:镜检时先用低倍,再用高倍 最后用油镜观察,并判断菌体的革兰氏染色 反应性
◼ （6）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙 醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗。 ◼ （7）复染：滴加复红复染3-5min；水洗： 用水洗去涂片上的复红染色液。 ◼ （8）晾干：将染好的涂片用吸水纸吸干。 ◼ （9）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍， 最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色 反应性
(10)实验完毕后的处理 ■①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净, ■a先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。 ■b用擦镜纸沾少许乙醚-乙醇混合液将镜头擦 2-3次。 ■c再用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次。注意擦 镜头时向一个方向擦拭。将显微镜小心轻拿, 按号放入显微镜柜中。 ②观察后的染色瓌片用废纸将香柏油擦干净, 放入回收容器内
◼ ①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净， ◼ a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。 ◼ b.用擦镜纸沾少许乙醚-乙醇混合液将镜头擦 2-3次。 ◼ c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次。注意擦 镜头时向一个方向擦拭。将显微镜小心轻拿， 按号放入显微镜柜中。 ◼ ②观察后的染色玻片用废纸将香柏油擦干净， 放入回收容器内。 （10)实验完毕后的处理：