2024/11/1 11 1.2 旋转平板法： 用一种特制的散布器从平板中心移至外 围，将样品涂布在阿基米德旋转平板上，所 附备的特殊注射器不断增加散布样品的体积 数量，使得在一个平板上的浓度范围达到 10000:1。在适当温度下培养，平板中心的菌 落浓度较高，边缘的浓度较低。 通过一种特 殊的格状计数器对旋转平板的菌落计数
2024/11/1 11 1.2 旋转平板法： 用一种特制的散布器从平板中心移至外 围，将样品涂布在阿基米德旋转平板上，所 附备的特殊注射器不断增加散布样品的体积 数量，使得在一个平板上的浓度范围达到 10000:1。在适当温度下培养，平板中心的菌 落浓度较高，边缘的浓度较低。 通过一种特 殊的格状计数器对旋转平板的菌落计数
2024/11/1 12 优点在于：所用的琼脂少，所需的培养皿、 稀释液空白、吸管要少，每小时可检测的样品为 标准培养法的3-4倍，每小时可涂布50-60个平板， 且操作中不需调试。 其缺点是，食品样品中的 颗粒可能会使注射器的针头堵塞。此法更适合牛 乳等液体食品。在此法中也可应用激光计数器。 由于设备较贵，使用机会少。可详见《细菌学分 析手册》
2024/11/1 12 优点在于：所用的琼脂少，所需的培养皿、 稀释液空白、吸管要少，每小时可检测的样品为 标准培养法的3-4倍，每小时可涂布50-60个平板， 且操作中不需调试。 其缺点是，食品样品中的 颗粒可能会使注射器的针头堵塞。此法更适合牛 乳等液体食品。在此法中也可应用激光计数器。 由于设备较贵，使用机会少。可详见《细菌学分 析手册》
2024/11/1 13 过滤膜的孔径通常为0.45 µm ，故水和 溶质能通过而细菌不能通过膜。将一定体 积的样品经膜过滤后收集菌体，再将膜放 在琼脂平板或充满选择性培养基的吸收垫 上进行培养。对长出的菌落进行计数，或 进行DMC计数。在计数时，膜经过适当染 色、冲洗和处理，能用显微镜观察计数。 但一张膜只能过滤少量的样品匀液。 1.3 膜过滤法
2024/11/1 13 过滤膜的孔径通常为0.45 µm ，故水和 溶质能通过而细菌不能通过膜。将一定体 积的样品经膜过滤后收集菌体，再将膜放 在琼脂平板或充满选择性培养基的吸收垫 上进行培养。对长出的菌落进行计数，或 进行DMC计数。在计数时，膜经过适当染 色、冲洗和处理，能用显微镜观察计数。 但一张膜只能过滤少量的样品匀液。 1.3 膜过滤法
2024/11/1 14 1.3.1 直接荧光膜技术（DEFT）： 是荧光染色与荧光显微技术的结合，是一种快速的食 品微生物检测技术。如用 5µm尼龙膜过滤食品样液，滤出液 用2ml氚X—100和 0.5ml 胰岛素（用于溶解畜肉体的细胞、防 膜被堵塞）处理，经一段时间培养后，处理的滤出液用0.6µm 孔的核聚碳酸酯膜过滤，然后滤膜用吖啶橙染色，对染色后 的菌体进行荧光显微技术计数，将显微计数器每一区域的平 均数量相加得到每克细胞数，25～30min 内可得到结果。 可用于肉类和乳制品的计数:用于乳制品计数时，其结果与 SPC法和培养直接计数法的结果相似，此法在10min中内可检测 出乳制品中的活性G－和全部G十菌，2min 可计算经热处理的乳 制品中的微生物（数量少至5700cfu/ml）
2024/11/1 14 1.3.1 直接荧光膜技术（DEFT）： 是荧光染色与荧光显微技术的结合，是一种快速的食 品微生物检测技术。如用 5µm尼龙膜过滤食品样液，滤出液 用2ml氚X—100和 0.5ml 胰岛素（用于溶解畜肉体的细胞、防 膜被堵塞）处理，经一段时间培养后，处理的滤出液用0.6µm 孔的核聚碳酸酯膜过滤，然后滤膜用吖啶橙染色，对染色后 的菌体进行荧光显微技术计数，将显微计数器每一区域的平 均数量相加得到每克细胞数，25～30min 内可得到结果。 可用于肉类和乳制品的计数:用于乳制品计数时，其结果与 SPC法和培养直接计数法的结果相似，此法在10min中内可检测 出乳制品中的活性G－和全部G十菌，2min 可计算经热处理的乳 制品中的微生物（数量少至5700cfu/ml）
2024/11/1 15 1.3.2 DEFT—微菌落计数： 可用于细胞的直接显微检测，且用于活性 细胞的检测。食品匀液经DEFT膜过滤，将膜放 在培养基表面恒温培养至微菌落长出。G -培养 3h，G十培养6h，在8h内可检测到大肠杆菌、假 单胞菌和葡萄球菌，且其数量少至103cfu/g， 长出的微菌落必须用显微镜观察
2024/11/1 15 1.3.2 DEFT—微菌落计数： 可用于细胞的直接显微检测，且用于活性 细胞的检测。食品匀液经DEFT膜过滤，将膜放 在培养基表面恒温培养至微菌落长出。G -培养 3h，G十培养6h，在8h内可检测到大肠杆菌、假 单胞菌和葡萄球菌，且其数量少至103cfu/g， 长出的微菌落必须用显微镜观察