相连、记录血管张力变化。血管环置于盛有5mLK-H液的器官浴槽中，并持续充以95%02和5%CO2的混合气体，调节气流速度为1-2个泡/秒，调节基础张力至5mN，37℃恒温，每隔15min更换浴槽中的K-H液一次，共平衡60-120min。用0.2%的triton-100灌注血管10s去除血管内皮，用Ach检验内皮细胞功能，血管舒张率小于10%则为内皮完全去除，大于75%则为内皮完整。2.对PE收缩血管量效曲线的影响去内皮动脉环，用60mMKCI收缩后，选取两次血管收缩最大幅度在10%范围内的血管环，冲洗并平衡1.0h，向浴槽中递增加入PE溶液，观察并记录血管环收缩情况。3.对AD收缩血管量效曲线的影响去内皮动脉环，用60mMKCI收缩两次并平衡1.0h，向浴槽中加入或不加入10μMβ2受体拮抗剂ICI118551后，递增加入AD溶液，观察并记录血管环收缩情况。4.对SAL舒张血管量效曲线的影响去内皮动脉环，用10-6MPE收缩血管，待达到平台后，向浴槽中加入或不加入10μMβ2受体拮抗剂ICI118551后，递增加入SAL溶液，观察并记录血管环舒张情况。5.对Ach和SNP舒张血管量效曲线的影响内皮完整的动脉环，用60mMKCI或10-6MPE收缩血管，选取两次血管收缩最大幅度在10%范围内的血管环，向浴槽中递增加入Ach或SNP溶液，记录血管环的舒张情况。五、注意事项1.制备主动脉环时，放入冷冻的饱和以95%O2和5%CO2的混合气体饱和的K-H液中，请勿过度牵拉主动脉。2.平衡主动脉环60-120min时，通入的气体不得扰动连接张力换能器的线。3.平衡主动脉环时，观察并随时保持稳定的前负荷。4.加药时不要触及连接张力换能器的线。5.注意给药的浓度：加入的母液浓度，要与终浓度区别。实验四药物半数致死量LD50和半数有效量ED50的测定一、实验目的学习LD50和ED50的测定方法，掌握LD50、ED50的计算方法，理解其6
6 相连、记录血管张力变化。血管环置于盛有 5 mL K-H 液的器官浴槽中，并持续 充以 95% O2 和 5% CO2 的混合气体，调节气流速度为 1-2 个泡/秒，调节基础张 力至 5 mN，37℃恒温，每隔 15 min 更换浴槽中的 K-H 液一次，共平衡 60-120 min。 用0.2%的triton-100灌注血管10s去除血管内皮，用Ach检验内皮细胞功能， 血管舒张率小于 10%则为内皮完全去除，大于 75%则为内皮完整。 2. 对 PE 收缩血管量效曲线的影响 去内皮动脉环，用 60 mM KCl收缩后， 选取两次血管收缩最大幅度在 10%范围内的血管环，冲洗并平衡 l.0 h，向浴槽 中递增加入 PE 溶液，观察并记录血管环收缩情况。 3. 对 AD 收缩血管量效曲线的影响 去内皮动脉环，用 60 mM KCl 收缩两 次并平衡 l.0 h，向浴槽中加入或不加入 10 M β2 受体拮抗剂 ICI 118551 后，递 增加入 AD 溶液，观察并记录血管环收缩情况。 4. 对 SAL 舒张血管量效曲线的影响 去内皮动脉环，用 10-6 M PE 收缩血 管，待达到平台后，向浴槽中加入或不加入 10 M β2 受体拮抗剂 ICI 118551 后， 递增加入 SAL 溶液，观察并记录血管环舒张情况。 5. 对 Ach 和 SNP 舒张血管量效曲线的影响 内皮完整的动脉环，用 60 mM KCl 或 10-6 M PE 收缩血管，选取两次血管收缩最大幅度在 10%范围内的血管环， 向浴槽中递增加入 Ach 或 SNP 溶液，记录血管环的舒张情况。 五 、注意事项 1. 制备主动脉环时，放入冷冻的饱和以 95% O2 和 5% CO2 的混合气体饱和 的 K-H 液中，请勿过度牵拉主动脉。 2. 平衡主动脉环60-120 min时，通入的气体不得扰动连接张力换能器的线。 3. 平衡主动脉环时，观察并随时保持稳定的前负荷。 4. 加药时不要触及连接张力换能器的线。 5. 注意给药的浓度：加入的母液浓度，要与终浓度区别。 实验四 药物半数致死量 LD50和半数有效量 ED50的测定 一 、实验目的 学习 LD50 和 ED50 的测定方法，掌握 LD50、ED50 的计算方法，理解其
药理学意义。二、实验原理ED50是标志药物效价的一个参数，它是指在一定的实验条件下，一群动物用药后，约半数动物出现疗效的剂量，而LD50则是半数动物出现死亡的剂量，为了对药物的毒性和疗效有一个较全面的考虑，可计算药物的治疗指数。治疗指数=LD50/ED50，此比值越大，就越安全。三、实验材料、仪器和试剂1ml注射器，小鼠笼，电子秤，戊巴比妥钠溶液，小鼠。四、实验方法及步骤（一）ED50的测定1.取小鼠40只，雌雄各半，随机分成4组，每组10只。2.各组戊巴比妥钠剂量分别为21mg/kg、26mg/kg、32mg/kg、40mg/kg，每鼠腹腔注射药物容量0.1ml/10g。3.给药后立即记下时间，以小鼠15分钟内翻正反射消失，作为阳性反应指标。（二）LD50的测定方法同EDso的测定，戊巴比妥钠剂量分别为77mg/kg，96mg/kg，120mg/kg和150mg/kg。以24小时内死亡（呼吸停止）作为指标，记下死亡数，整个实验过程中，小白鼠按正常生活条件养一天。结果记录及计算：表1戊巴比妥钠EDs0测定结果组别动物数剂量翻正反射消失有效率(只)(mg/kg)动物数（只）102112102631032440107
7 药理学意义。 二 、实验原理 ED50 是标志药物效价的一个参数，它是指在一定的实验条件下，一群动物 用药后，约半数动物出现疗效的剂量，而 LD50 则是半数动物出现死亡的剂量。 为了对药物的毒性和疗效有一个较全面的考虑，可计算药物的治疗指数。治疗指 数= LD50/ ED50，此比值越大，就越安全。 三、实验材料、仪器和试剂 1ml 注射器，小鼠笼，电子秤，戊巴比妥钠溶液，小鼠。 四、实验方法及步骤 （一）ED50 的测定 1.取小鼠 40 只，雌雄各半，随机分成 4 组，每组 10 只。 2.各组戊巴比妥钠剂量分别为 21mg/kg、26mg/kg、32mg/kg、40mg/kg，每 鼠腹腔注射药物容量 0.1ml/10g。 3. 给药后立即记下时间，以小鼠 15 分钟内翻正反射消失，作为阳性反应指 标。 （二）LD50 的测定 方法同 ED50 的测定，戊巴比妥钠剂量分别为 77mg/kg,，96mg/kg，120mg/kg 和 150mg/kg。以 24 小时内死亡（呼吸停止）作为指标，记下死亡数，整个实验 过程中，小白鼠按正常生活条件养一天。结果记录及计算： 表 1 戊巴比妥钠 ED50 测定结果 组别 动物数 （只） 剂量 （mg/kg） 翻正反射消失 动物数（只） 有效率 1 10 21 2 10 26 3 10 32 4 10 40