遗传学实验目录实验一、果蝇的饲养管理、性状观察和性别鉴定实验二、果蝇杂交实验实验三、果蝇睡腺染色体的制备与观察实验四、果蝇酯酶同工的遗传学分析实验五、小鼠骨髓细胞染色体的制备与观祭实验六、一个拟南芥InDel分子标记遗传多态性检测和群体遗传学分析实验一、果蝇的饲养管理、性状观察和性别鉴定在遗传学实验中，有许多遗传规律的验证需用果蝇作为实验材料。如分离规律、自由组合规律、伴性遗传规律及连锁呼唤规律的验证。一般进行一个杂交组合，只能验证一个规律。我们这次采用一次杂交设计来完成验证多个遗传规律。一、实验目的1、了解果蝇的生命周期，生活习性及饲养管理方法。2、掌握果蝇一些突变型的性状观察及雌雄性别鉴定的方法
遗传学实验目录 实验一、果蝇的饲养管理、性状观察和性别鉴定 实验二、果蝇杂交实验 实验三、果蝇唾腺染色体的制备与观察 实验四、果蝇酯酶同工的遗传学分析 实验五、小鼠骨髓细胞染色体的制备与观察 实验六、一个拟南芥 InDel 分子标记遗传多态性检测和群体遗 传学分析 实验一、果蝇的饲养管理、性状观察和性别鉴定 在遗传学实验中，有许多遗传规律的验证需用果蝇作为实验材料。如分离规律、自由组合规 律、伴性遗传规律及连锁呼唤规律的验证。一般进行一个杂交组合，只能验证一个规律。我们这次 采用一次杂交设计来完成验证多个遗传规律。 一、实验目的 1、了解果蝇的生命周期，生活习性及饲养管理方法。 2、掌握果蝇一些突变型的性状观察及雌雄性别鉴定的方法
二、实验原理黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）是被人类研究得最彻底的模式生物之一，果蝇属于昆虫纲、双翅目。作为遗传实验材料有许多优点：（1）饲养容易。虫体小，以酵母为食，在饲养瓶中以玉米粉为饲料就可以正常生长繁殖。生活史短。果蝇的生活周期包括：卵-幼虫-蛹-成虫。可在10-14天完成一个世代。（2）繁殖率高。雌蝇可以一次产下400个0.5毫米大小的卵。（3）染色体数目少。只有4对染色体，约180M。（4）唾腺染色体是巨大染色体，是研究染色体畸变和各种基因突变的好材料。（5）突变性状多。而且许多性状是容易观察的形态发育上的异常。例如眼色（白眼、红眼、棒眼、黑眼）；翅型（长翅、残翅、小翅、缺刻）；体色（灰体、黑檀体、黄体）；刚毛（直刚毛、焦刚毛）。因此，果蝇在遗传学研究中得到广泛应用。（一）生活史：果蝇是完全变态昆虫，它的生活史包括卵、幼虫、蛹及成虫四个发育时期。果蝇生活周期以及各发育阶段的时间长短与温度关系十分密切。超过30℃，能使果蝇不育和死亡。温度降低，会使果蝇生活周期延长，生活力降低。一般在20-25℃下培养最为合适。在适宜的温度下，大约经过1015天即可繁殖一代。（二）果蝇雌雄辩别对于同一品系的果蝇，雌果蝇体型较大、腹部未端稍尖、腹背面外观有5条黑色条纹无性梳，外生殖器外观简单，呈现圆锥状凸起，颜色较浅。而雄果蝇则体型较小、腹部未端顿圆有性梳、外生殖器外观较复杂，尾部顿而圆，且颜色较深。交尾票雌果蝇雄果蝇
二、实验原理 黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）是被人类研究得最彻底的模式生物之一，果蝇属于昆虫 纲、双翅目。作为遗传实验材料有许多优点： （1） 饲养容易。虫体小，以酵母为食，在饲养瓶中以玉米粉为饲料就可以正常生长繁 殖。生活史短。果蝇的生活周期包括：卵-幼虫-蛹-成虫。可在10-14天完成一个世代。 （2） 繁殖率高。雌蝇可以一次产下400个0.5毫米大小的卵。 （3） 染色体数目少。只有4对染色体，约180M。 （4） 唾腺染色体是巨大染色体，是研究染色体畸变和各种基因突变的好材料。 （5） 突变性状多。而且许多性状是容易观察的形态发育上的异常。例如眼色（白眼、 红眼、棒眼、黑眼）；翅型（长翅、残翅、小翅、缺刻）；体色（灰体、黑檀体、黄体）；刚毛 （直刚毛、焦刚毛）。 因此，果蝇在遗传学研究中得到广泛应用。 （一） 生活史： 果蝇是完全变态昆虫，它的生活史包括卵、幼虫、蛹及成虫四个发育时期。果蝇生活周期以及 各发育阶段的时间长短与温度关系十分密切。超过 30℃，能使果蝇不育和死亡。温度降低，会使果 蝇生活周期延长，生活力降低。一般在 20-25℃下培养最为合适。在适宜的温度下，大约经过 10- 15 天即可繁殖一代。 （二） 果蝇雌雄辨别 对于同一品系的果蝇，雌果蝇体型较大、腹部末端稍尖、腹背面外观有 5 条黑色条纹， 无性梳，外生殖器外观简单，呈现圆锥状凸起，颜色较浅。而雄果蝇则体型较小、腹部末端顿圆、 有性梳、外生殖器外观较复杂，尾部顿而圆，且颜色较深。 雌果蝇 雄果蝇
（三）常见突变类型果蝇拥有很多突变类型，且大多肉眼可观，本实验需要观察的果蝇性状如下表所示。表2-1需要观察的果蝇性状及具体表型。器官表型 (野生性状/突变性状）眼色红眼/白眼体色灰体/黑檀体刚毛直刚毛/焦刚毛翅型长翅/短翅三、实验材料、仪器和试剂6号：X染色体的隐性突变体：灰体、白眼、短翅、焦刚毛26号：IⅢ号染色体隐性突变体：黑檀体、红眼、长翅、直刚毛（说明：阴影部分为突变性状）培养箱、麻醉瓶、解剖镜、解部针、镊子、培养瓶、毛笔、滤纸、白瓷板。乙醚、玉米粉、琼脂、红糖、酵母粉、丙酸等。五、实验步骤让学生用体视显微镜分别观察已经麻醉致死的不同果蝇品系对应的性状。特别要注意能准确鉴定果蝇的雌雄。通过性梳、尾部黑点和腹部体节（环纹数目）。性梳：雄性第一对足的节基部外侧有黑色鬃毛状性梳，雌性无黑点：果蝇尾部有无黑点（雌性腹部尖颜色较浅，雄性腹部尖颜色较深）腹部环纹的数目：雌性果蝇腹部分6节，有7条黑色环纹，雄性只有5节，6条环纹。六、注意事项1.麻醉过度2.放到培养瓶中时，要先把瓶子倾斜，待果蝇苏醒后再把瓶子竖起来，防止果蝇粘在培养基中而不能苏醒
（三） 常见突变类型 果蝇拥有很多突变类型，且大多肉眼可观，本实验需要观察的果蝇性状如下表所示。 表2-1 需要观察的果蝇性状及具体表型。 器官 表型（野生性状/突变性状） 眼色 红眼/白眼 体色 灰体/黑檀体 刚毛 直刚毛/焦刚毛 翅型 长翅/短翅 三、实验材料、仪器和试剂 6 号： X 染色体的隐性突变体：灰体、白眼、短翅、焦刚毛 26 号：Ⅲ号染色体隐性突变体：黑檀体、红眼、长翅、直刚毛 （说明：阴影部分为突变性状） 培养箱、麻醉瓶、解剖镜、解剖针、镊子、培养瓶、毛笔、滤纸、白瓷板。 乙醚、玉米粉、琼脂、红糖、酵母粉、丙酸等。 五、 实验步骤 让学生用体视显微镜分别观察已经麻醉致死的不同果蝇品系对应的性状。特别要注意能准确鉴 定果蝇的雌雄。通过性梳、尾部黑点和腹部体节（环纹数目）。 性梳：雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳，雌性无； 黑点：果蝇尾部有无黑点（雌性腹部尖颜色较浅，雄性腹部尖颜色较深）腹部环纹的数目：雌 性果蝇腹部分6节，有7条黑色环纹，雄性只有5节，6条环纹。 六、 注意事项 1.麻醉过度 2.放到培养瓶中时，要先把瓶子倾斜，待果蝇苏醒后再把瓶子竖起来，防止果蝇粘在培养基 中而不能苏醒
3.挑果蝇用毛笔，忌用镊子和其他工具，以免影响果蝇生长繁育。七、思考题1.如何区分雌雄果蝇？2.果蝇生活经历几个阶段？附：培养基配制将2.5g琼脂放在200mL蒸馏水中，煮沸，直到琼脂完全溶解，再加入22g红糖或白糖，调匀，继续加热。另把28g玉米粉加入50mL蒸留水混合后，倒入正在加热的琼脂糖溶液中，并加入溶解在少量体积分数为95%的酒精溶液中的0.2g苯甲酸，均匀搅拌，煮沸2~3min成糊状，并热注入到洁净、干燥、消毒过的培养瓶中，分装5个培养基瓶内，使培养基在瓶底的厚度约3cm（注意瓶口和瓶壁上不要被培养基沾污）。80ml水8.25g玉米粉6.2g糖0.6g琼脂0.5ml苯甲酸少许酵母实验二、果蝇杂交实验一、实验目的1、学习果蝇杂交方法
3.挑果蝇用毛笔，忌用镊子和其他工具，以免影响果蝇生长繁育。 七、 思考题 1.如何区分雌雄果蝇？ 2.果蝇生活经历几个阶段？ 附：培养基配制 将 2.5 g 琼脂放在 200 mL 蒸馏水中，煮沸，直到琼脂完全溶解，再加入 22 g 红糖或白糖，调 匀，继续加热。另把 28g 玉米粉加入 50 mL 蒸馏水混合后，倒入正在加热的琼脂糖溶液中，并加入 溶解在少量体积分数为 95%的酒精溶液中的 0.2 g 苯甲酸，均匀搅拌，煮沸 2～3 min 成糊状，并趁 热注入到洁净、干燥、消毒过的培养瓶中，分装 5 个培养基瓶内，使培养基在瓶底的厚度约 3 cm （注意瓶口和瓶壁上不要被培养基沾污）。 水 80ml 玉米粉 8.25g 糖 6.2g 琼脂 0.6g 苯甲酸 0.5ml 酵母 少许 实验二、果蝇杂交实验 一、实验目的 1、学习果蝇杂交方法
2、掌握对杂交结果的统计与分析，研究与验证三大遗传规律，并用x-检验数据。二、实验原理通过果蝇杂交实验可以验证经典遗传学的分离规律、自由组合规律、伴性遗传规律及连锁互换规律。分离规律：一对等位基因在杂合子中，各自保持其独立性，在配子形成时，彼此分开，随机地进入不同的配子。自由组合规律：支配两对不同性状的等位基因，在杂合状态保持其独立性。在配子形成时，各等位基因彼此独立分离，不同对的基因自由组合。伴性遗传：性染色体所携带的基因在遗传时与性别相联系的遗传方式称为性连锁遗传或伴性遗传。连锁交换规律：位于同一对染色体上的基因联合在一起共同遗传的频率大于重新组合的频率，重组体的产生是由于在配子形成过程中同源染色体的非姐妹染色单体间发生了局部交换。将两个纯系果蝇亲本进行正反交，获得F1，根据正反交F1表型判断哪些性状属于伴性遗传。然后F1自交，统计F2数据，分别选取一个单位性状、两个单位性状、三个单位性状进行分离规律、自由组合规律或连锁遗传规律的验证。三、实验材料、仪器和试剂果蝇材料：白眼、短翅、焦刚毛6号：X染色体的隐性突变体：灰体、26号：IⅢ号染色体隐性突变体：吴黑檀体、红眼、长翅、直刚毛说明：阴影部分为突变性状培养箱、麻醉瓶、解剖镜、解剖针、镊子、培养瓶、毛笔、滤纸、白瓷板、乙醚、玉米粉、琼脂、红糖、酵母粉、丙酸等。四、实验步骤正交：6早X268反交：262X63选处女果蝇一杂交一去亲本一观察后代一后代自交一移去亲本一观察统计后代数据处理1.挑选处女蝇（由老师提前准备）：雌蝇羽化出来10h内一般不会交配，选择在这个时间段内收集雌蝇，均属处女蝇。分雌雄分开挑选，具体操作为：用滴有数滴乙醚的棉塞塞住瓶口，平放在桌面上约半分钟，果蝇即被麻醉，分性别装瓶。本实验将26号和6号果蝇分别培
2、掌握对杂交结果的统计与分析，研究与验证三大遗传规律，并用 X 检验数据。 二、实验原理 通过果蝇杂交实验可以验证经典遗传学的分离规律、自由组合规律、伴性遗传规律及连锁互换 规律。 分离规律：一对等位基因在杂合子中，各自保持其独立性，在配子形成时，彼此分开，随机地 进入不同的配子。自由组合规律：支配两对不同性状的等位基因，在杂合状态保持其独立性。在配 子形成时，各等位基因彼此独立分离，不同对的基因自由组合。伴性遗传：性染色体所携带的基因 在遗传时与性别相联系的遗传方式称为性连锁遗传或伴性遗传。连锁交换规律：位于同一对染色体 上的基因联合在一起共同遗传的频率大于重新组合的频率，重组体的产生是由于在配子形成过程中 同源染色体的非姐妹染色单体间发生了局部交换。 将两个纯系果蝇亲本进行正反交，获得 F1，根据正反交 F1表型判断哪些性状属于伴性遗传。然 后 F1自交，统计 F2数据，分别选取一个单位性状、两个单位性状、三个单位性状进行分离规律、自 由组合规律或连锁遗传规律的验证。 三、实验材料、仪器和试剂 果蝇材料： 6 号： X 染色体的隐性突变体：灰体、白眼、短翅、焦刚毛 26 号：Ⅲ号染色体隐性突变体：黑檀体、红眼、长翅、直刚毛说明：阴影部分为突变性状 培养箱、麻醉瓶、解剖镜、解剖针、镊子、培养瓶、毛笔、滤纸、白瓷板、乙醚、玉 米粉、琼脂、红糖、酵母粉、丙酸等。 四、实验步骤 正交：6 ♀ X 26 ♂ 反交：26 ♀ X 6 ♂ 选处女果蝇—杂交—去亲本—观察后代—后代自交—移去亲本—观察统计后代—数据处理 1. 挑选处女蝇（由老师提前准备）：雌蝇羽化出来 10h 内一般不会交配，选择在这个时间段 内收集雌蝇，均属处女蝇。分雌雄分开挑选，具体操作为：用滴有数滴乙醚的棉塞塞住瓶 口，平放在桌面上约半分钟，果蝇即被麻醉，分性别装瓶。本实验将 26 号和 6 号果蝇分别培 2