联系上表， 水相pH6.9时， (碱性) 溶菌酶带正电荷 (酸性) 卵蛋白带负电荷 50 100 NaCl浓度/(mo/kg) ·溶菌酶 。卵蛋白 Tip: 图7-7加人NaCl对卵蛋白和溶菌酶分配的影响3] 菌体细胞一般带负电荷，指的是：中 相系统：8%Dex500:8%PEG4000, 性水。但在pH<4.0以下，则带正 0.5 mmol/L磷酸钠；pH6.9 电荷。 关键是要了解它的pl。 26
水相pH6.9时, 溶菌酶带正电荷 卵蛋白带负电荷 （碱性） （酸性） Tip: 菌体细胞一般带负电荷，指的是：中 性水。但在pH < 4.0以下，则带正 电荷。 关键是要了解它的pI。 联系上表， 26
(3)体系pH的影响 ①影响蛋白质中可离解基团的离解 4.0m 3.0 血清蛋白 度，因而改变蛋白质所带电荷和分 2.0 配系数； ②pH还影响系统缓冲物质磷酸盐的 0.4 0.3 离解程度，影响相间电位差，从而 0.2 影响分配系数。 pH ●0.1mo/1NaC1 o0.05mol/L.NazSO. 根据这一原侧测定蛋白质等电点pI 图7-8血清蛋白的交错分配， 的方法，称为交错分配法。 在两种盐系统中，分配系数K与pH的关系3] 27
(3)体系pH的影响 ①影响蛋白质中可离解基团的离解 度，因而改变蛋白质所带电荷和分 配系数； ②pH还影响系统缓冲物质磷酸盐的 离解程度，影响相间电位差，从而 影响分配系数。 27 根据这一原则测定蛋白质等电点pI 的方法，称为交错分配法
(4)体系温度的影响 >温度影响相图，同时影响分配率和蛋白质的生物活性。 >一般地，临界点附近，温度对分配率的影响较大，远离临界点时， 影响较小。 28
（4）体系温度的影响 Ø 温度影响相图，同时影响分配率和蛋白质的生物活性。 Ø 一般地，临界点附近，温度对分配率的影响较大，远离临界点时， 影响较小。 28
(5)体系中微生物的影响 分配的差异主要是由细胞破碎程度引起的，细胞壁和细胞膜不同的化学 结构也会导致体系上下比例的改变。 102030405060 102030405086 细地浓度/% 细胞浓度/% omm). 。皆鲁兰酶 。a葡萄糖苷醉 图7-10不同细胞在同一体系中的相分配刃 图7-11细胞浓度对酶分配系数的影响刊 体系：9%PEG4000,2%DexT500 体系：9%PEG4000,2%DexT500 29
（5）体系中微生物的影响 分配的差异主要是由细胞破碎程度引起的，细胞壁和细胞膜不同的化学 结构也会导致体系上下比例的改变。 29
双水相萃取学习提纲 1.双水相由哪些成分组成？ 一、概念和原理 2.双水相体系是如何形成的？ 3.双水相萃取有哪些优点？ 4.双水相体系相图 二、双水相的分配理论 1.表面自由能的影响 2.表面电荷的影响 三、影响双水相萃取的因素 1.聚合物 2.无机盐 3.pH值 四、应用 4.温度 5.微生物 30
30 双水相萃取学习提纲 一、概念和原理 二、双水相的分配理论 四、应用 1. 双水相由哪些成分组成？ 2. 双水相体系是如何形成的？ 3. 双水相萃取有哪些优点？ 4. 双水相体系相图 三、影响双水相萃取的因素 1. 表面自由能的影响 2. 表面电荷的影响 1. 聚合物 2. 无机盐 3. pH值 4. 温度 5. 微生物