注入清水,再离心沉淀,如此反复沉淀3~4次,直至上液澄清为止, 最后倒去上液,取沉渣镜检。本法省时、省力,适用于临床检验。 (3)汞碘醛离心沉淀法( merthiolate- iodine- formal dehyde centrifugation sedimentation method,MIFC):本法既可浓集,又 可固定和染色,适用于原虫包囊、滋养体及蠕虫卵和幼虫的检査。如 准确称取1g粪便,即可作蠕虫卵的定量检査。 取粪便1g,加适量(约10m1)汞碘醛液,充分调匀,用2层脱脂 纱布过滤,再加入乙醚4ml,摇2分钟,离心(2000rpm/min)1~2 分钟,即分成乙醚、粪渣、汞碘醛及沉淀物4层。吸弃上面3层,取 沉渣镜检 汞碘醛配制: 1)汞醛(MF)液:1/1000硫柳汞酊200ml,甲醛(40%)25ml, 甘油50ml,蒸馏水200m 2)卢戈氏液:碘5g,碘化钾10g,蒸馏水100ml 检査时取汞醛液2.35m及5%卢戈氏液0.15ml混合备用。但混合液 保存8小时后即变质,不应再用;碘液亦不宜于1周后再用。 (4)醛醚沉淀法( formalin- ether sedimentation):取粪便1 2g置于小容器内,加水10~20ml调匀,将粪便混悬液经2层纱布(或 100目金属筛网)过滤,离心(200rpm/min)2分钟;倒去上层粪液, 保留沉渣,加水10m1混匀,离心2分钟;倒去上液,加10%甲醛7ml
6 注入清水，再离心沉淀，如此反复沉淀 3～4 次，直至上液澄清为止， 最后倒去上液，取沉渣镜检。本法省时、省力，适用于临床检验。 （3）汞碘醛离心沉淀法（merthiolate-iodine-formaldehyde centrifugation sedimentation method, MIFC）：本法既可浓集，又 可固定和染色，适用于原虫包囊、滋养体及蠕虫卵和幼虫的检查。如 准确称取 1g 粪便，即可作蠕虫卵的定量检查。 取粪便 1g，加适量（约 10ml）汞碘醛液，充分调匀，用 2 层脱脂 纱布过滤，再加入乙醚 4ml，摇 2 分钟，离心（2000rpm/min）1～2 分钟，即分成乙醚、粪渣、汞碘醛及沉淀物 4 层。吸弃上面 3 层，取 沉渣镜检。 汞碘醛配制： 1) 汞醛（MF）液：1/1000 硫柳汞酊 200ml，甲醛（40%）25ml， 甘油 50ml，蒸 馏水 200ml。 2）卢戈氏液：碘 5g，碘化钾 10g，蒸馏水 100ml。 检查时取汞醛液 2.35ml 及 5%卢戈氏液 0.15ml 混合备用。但混合液 保存 8 小时后即变质，不应再用；碘液亦不宜于 1 周后再用。 （4）醛醚沉淀法（formalin-ether sedimentation）：取粪便 1～ 2g 置于小容器内，加水 10～20ml 调匀，将粪便混悬液经 2 层纱布（或 100 目金属筛网）过滤，离心（200rpm/min）2 分钟；倒去上层粪液， 保留沉渣，加水 10ml 混匀，离心 2 分钟；倒去上液，加 10%甲醛 7ml
5分钟后加乙醚3ml,塞紧管口并充分摇匀,取下管口塞,离心2分 钟;即可见管内自上而下分为4层。取管底沉渣涂片镜检。 本法不仅浓集效果好,而且不损伤包囊和虫卵的形态,易于观察 和鉴定。对于含脂肪较多的粪便,本法效果优于硫酸锌漂浮法。但对 布氏嗜碘阿米巴包囊、贾第虫包囊及微小膜壳绦虫卵等的检査效果较 差 2.浮聚法( flotation method)利用比重较大的液体,使原虫 包囊或蠕虫卵上浮,集中于液体表面,常用的方法有两种: (1)饱和盐水浮聚法( brine flotation):此法用以检查钩虫 卵效果最好,也可用于检查其它线虫卵和微小膜壳绦虫卵。但不适于 检査吸虫卵和原虫包囊。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于浮聚瓶(高 3.5cm,直径约2cm的圆形直筒瓶)中,加入少量饱和盐水调匀,再 慢慢加入饱和盐水至液面略高于瓶口,以不溢出为止。此时在瓶口覆 盖一载玻片,静置15分钟后,将载玻片提起并迅速翻转,镜检(图 17-2)。 图17-2饱和盐水浮聚法 饱和盐水配制:将食盐徐徐加入盛有沸水的容器内,不断搅动, 直至食盐不再溶解为止
7 5 分钟后加乙醚 3ml，塞紧管口并充分摇匀，取下管口塞，离心 2 分 钟；即可见管内自上而下分为 4 层。取管底沉渣涂片镜检。 本法不仅浓集效果好，而且不损伤包囊和虫卵的形态，易于观察 和鉴定。对于含脂肪较多的粪便，本法效果优于硫酸锌漂浮法。但对 布氏嗜碘阿米巴包囊、贾第虫包囊及微小膜壳绦虫卵等的检查效果较 差。 2．浮聚法（flotation method）利用比重较大的液体，使原虫 包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面，常用的方法有两种： (1)饱和盐水浮聚法（brine flotation）：此法用以检查钩虫 卵效果最好，也可用于检查其它线虫卵和微小膜壳绦虫卵。但不适于 检查吸虫卵和原虫包囊。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于浮聚瓶（高 3.5cm，直径约 2cm 的圆形直筒瓶）中，加入少量饱和盐水调匀，再 慢慢加入饱和盐水至液面略高于瓶口，以不溢出为止。此时在瓶口覆 盖一载玻片，静置 15 分钟后，将载玻片提起并迅速翻转，镜检（图 17-2）。 图 17-2 饱和盐水浮聚法 饱和盐水配制： 将食盐徐徐加入盛有沸水的容器内，不断搅动， 直至食盐不再溶解为止
(2)硫酸锌离心浮聚法( zinc sulfate centrifugal flotation method):此法适用于检査原虫包囊、球虫卵囊、线虫卵和微小膜壳 绦虫卵。取粪便约1g,加10-15倍的水,充分搅碎,按离心沉淀法 过滤,反复离心3-4次,至清水为止,最后倒去上清液,在沉渣中 加入比重1.18的硫酸锌液(33%的溶液),调匀后再加硫酸锌溶液至 距管口约lcm处,离心1分钟。用金属环钩取表面的粪液置于载玻片 上,加碘液一滴(査包囊),镜检。钩取标本时,用金属环轻轻接触 液面即可,切勿搅动。离心后应立即取标本镜检,如若放置时间超过 1小以上,会因包囊或虫卵变形而影响观察效果。 (3)蔗糖离心浮聚法:此法适用于检査粪便中隐孢子虫的卵囊。 取粪便约5g,加水15-20ml,以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤 液离心5-10分钟,吸弃上清液,加蔗糖溶液(蔗糖500g,蒸馏水320m, 石炭酸6.5m1)再离心,然后如同饱和盐水浮聚法,取其表面膜镜检 (高倍或油镜)。卵囊透明无色,囊壁光滑,内含一小暗点和发出蛋 黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大,常紧贴于盖片 之下,鉴于1小时后卵囊脱水变形不易辨认,故应立即镜检。也可用 饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖容液。 常见蠕虫卵、包囊的比重见表17-1
8 （2）硫酸锌离心浮聚法（zinc sulfate centrifugal flotation method）：此法适用于检查原虫包囊、球虫卵囊、线虫卵和微小膜壳 绦虫卵。取粪便约 1g，加 10—15 倍的水，充分搅碎，按离心沉淀法 过滤，反复离心 3—4 次，至清水为止，最后倒去上清液，在沉渣中 加入比重 1.18 的硫酸锌液（33%的溶液），调匀后再加硫酸锌溶液至 距管口约 1cm 处，离心 1 分钟。用金属环钩取表面的粪液置于载玻片 上，加碘液一滴（查包囊），镜检。钩取标本时，用金属环轻轻接触 液面即可，切勿搅动。离心后应立即取标本镜检，如若放置时间超过 1 小以上，会因包囊或虫卵变形而影响观察效果。 （3）蔗糖离心浮聚法：此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。 取粪便约 5g，加水 15-20ml，以 260 目尼龙袋或 4 层纱布过滤。取滤 液离心5-10分钟，吸弃上清液，加蔗糖溶液（蔗糖500g，蒸馏水320ml， 石炭酸 6.5ml）再离心，然后如同饱和盐水浮聚法，取其表面膜镜检 （高倍或油镜）。卵囊透明无色，囊壁光滑，内含一小暗点和发出蛋 黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大，常紧贴于盖片 之下，鉴于 1 小时后卵囊脱水变形不易辨认，故应立即镜检。也可用 饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖容液。 常见蠕虫卵、包囊的比重见表 17—1
表17-1蠕虫卵、包囊的比重 虫卵或包囊 比重 华支睾吸虫卵 1.170—1.190 姜片吸虫卵 1.190 肝片形吸虫卵 1.200 日本血吸虫卵 20 带绦虫卵 1.140 微小膜壳绦虫卵 1.050 钩虫卵 1.055-1.080 鞭虫卵 1.150 蛲虫卵 1.105-1.115 受精蝈虫卵 1.110—1.130 未受精蛔虫卵 1.210-1.230 毛圆线虫卵 1.115-1.130 溶组织内阿米巴包囊 1.060-1.070 结肠内阿米巴包囊 1.070 微小内蜒阿米巴包囊 1.065-1.070 蓝氏贾第鞭毛虫包囊 1.040-1.060 3.尼龙袋集卵法本法主要用于血吸虫卵的浓集。先将120目/ 吋(孔径略大于血吸虫卵)的尼龙袋套于260目/吋(孔径略小于血 吸虫卵)的尼龙袋内(两袋的底部均不粘合,分别用金属夹夹住)。 取粪便30g,放入搪瓷杯内加水捣碎调匀,经60目/吋铜筛滤入内 层尼龙袋,然后将两个尼龙袋一起在清水桶内缓慢上下提动洗滤袋内 粪液,或在自来水莲蓬头下缓缓冲洗,至袋内流出清水为止。将120
9 表 17－1 蠕虫卵、包囊的比重 虫卵或包囊 比重 华支睾吸虫卵 1.170－1.190 姜片吸虫卵 1.190 肝片形吸虫卵 1.200 日本血吸虫卵 1.200 带绦虫卵 1.140 微小膜壳绦虫卵 1.050 钩虫卵 1.055－1.080 鞭虫卵 1.150 蛲虫卵 1.105－1.115 受精蛔虫卵 1.110－1.130 未受精蛔虫卵 1.210－1.230 毛圆线虫卵 1.115－1.130 溶组织内阿米巴包囊 1.060－1.070 结肠内阿米巴包囊 1.070 微小内蜒阿米巴包囊 1.065－1.070 蓝氏贾第鞭毛虫包囊 1.040－1.060 3．尼龙袋集卵法 本法主要用于血吸虫卵的浓集。先将 120 目/ 吋（孔径略大于血吸虫卵）的尼龙袋套于 260 目/吋（孔径略小于血 吸虫卵）的尼龙袋内（两袋的底部均不粘合，分别用金属夹夹住）。 取粪便 30g，放入搪瓷杯内加水捣碎调匀，经 60 目/吋 铜筛滤入内 层尼龙袋，然后将两个尼龙袋一起在清水桶内缓慢上下提动洗滤袋内 粪液，或在自来水莲蓬头下缓缓冲洗，至袋内流出清水为止。将 120