第十三章 食品中矿物质元素的测定 【教学目标】： 1.掌握原子化、原子吸收光谱、原子发射光谱等的概念及相关理论，原子吸收分光光 度法的基本原理，分子吸收光谱、分光光度法的基本原理； 2.掌握各种矿物质元素测定的基本原理和方法； 3.掌握各种金属离子的标准溶液、标准使用液的配制和使用方法，掌握对不同的待测 样品的不同处理方法，掌握样品消化 3 的方法和才作技能。 4.掌握原子吸收分光光度计、火焰光度计、分光光度计的使用方法及操作技能、掌握 标准曲线的绘制和测定结果的计算方法及技能。 第一节 食品中钙含量的测定 钙是人体必需的微量元素，为了增加食品营养价值，作为食品营养强化剂使用。我国 制定了食品营养强化剂使用卫生标准，将柠檬酸钙、葡萄糖酸钙、碳酸钙、乳酸钙、磷酸 钙为钙元素强化源，并规定符合卫生标准的牦牛等骨粉、蛋壳钙源和活性离子钙也允许使 用。 一、食品营养强化剂使用卫生标准 （一）我国食品营养强化剂使用卫生标准 表 4-31 食品营养强化剂使用卫生标准（GB-14880-94） 品种 使用范围 每公斤使用量 备注 钙：柠檬酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 8~16g 1.8~3.6g 1、以元素钙计强化量： 饮 液 及 乳 饮 料 0.6~0.8g/kg, 谷 类 及 其 制 品 1.6~3.2g/kg 婴幼儿食品 3.0~6.0g/kg. 2、各种钙盐中钙元素含量： 葡萄糖酸钙 9%； 碳酸钙 40% 磷酸钙（含 2 结晶水）23%; 磷酸氢钙（含 5 结晶水）17.7% 柠檬酸钙（含 4 结晶水）21%; 乳酸钙 13%。 酸钙 22.2%。 3、钙源亦可采用牦牛等符合 卫生标准的骨粉、蛋壳粉、 活性离子钙等其他钙盐，如 氯化钙、甘油磷酸钙、氧化 钙、硫酸钙等均可用，强化 时均以元素钙计。 葡萄糖酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 18~36g 4.5~9.0g 碳酸钙或生物碳酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 4~8g 1~2g 婴幼儿食品 7.5~15g 乳酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 婴幼儿食品 12~24g 3~6g 23~46g 磷酸氢钙 谷类及其制品 饮料及乳饮料 婴幼儿食品 10~20g 2.5~5g 19~38g （二）食品强化剂活性钙（GB-9990-88） 本标准适用于由牡蛎壳经高温煅烧、水解提纯而得制品，在食品工业中可作强化剂。 规定钙（Ca）含量大于或等于 50.0%。 二、标准方法 （一）火焰原子吸收光谱法（GB-12398-90）
第十三章 食品中矿物质元素的测定 【教学目标】： 1.掌握原子化、原子吸收光谱、原子发射光谱等的概念及相关理论，原子吸收分光光 度法的基本原理，分子吸收光谱、分光光度法的基本原理； 2.掌握各种矿物质元素测定的基本原理和方法； 3.掌握各种金属离子的标准溶液、标准使用液的配制和使用方法，掌握对不同的待测 样品的不同处理方法，掌握样品消化 3 的方法和才作技能。 4.掌握原子吸收分光光度计、火焰光度计、分光光度计的使用方法及操作技能、掌握 标准曲线的绘制和测定结果的计算方法及技能。 第一节 食品中钙含量的测定 钙是人体必需的微量元素，为了增加食品营养价值，作为食品营养强化剂使用。我国 制定了食品营养强化剂使用卫生标准，将柠檬酸钙、葡萄糖酸钙、碳酸钙、乳酸钙、磷酸 钙为钙元素强化源，并规定符合卫生标准的牦牛等骨粉、蛋壳钙源和活性离子钙也允许使 用。 一、食品营养强化剂使用卫生标准 （一）我国食品营养强化剂使用卫生标准 表 4-31 食品营养强化剂使用卫生标准（GB-14880-94） 品种 使用范围 每公斤使用量 备注 钙：柠檬酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 8~16g 1.8~3.6g 1、以元素钙计强化量： 饮 液 及 乳 饮 料 0.6~0.8g/kg, 谷 类 及 其 制 品 1.6~3.2g/kg 婴幼儿食品 3.0~6.0g/kg. 2、各种钙盐中钙元素含量： 葡萄糖酸钙 9%； 碳酸钙 40% 磷酸钙（含 2 结晶水）23%; 磷酸氢钙（含 5 结晶水）17.7% 柠檬酸钙（含 4 结晶水）21%; 乳酸钙 13%。 酸钙 22.2%。 3、钙源亦可采用牦牛等符合 卫生标准的骨粉、蛋壳粉、 活性离子钙等其他钙盐，如 氯化钙、甘油磷酸钙、氧化 钙、硫酸钙等均可用，强化 时均以元素钙计。 葡萄糖酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 18~36g 4.5~9.0g 碳酸钙或生物碳酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 4~8g 1~2g 婴幼儿食品 7.5~15g 乳酸钙 谷类及其制品 饮液及乳饮料 婴幼儿食品 12~24g 3~6g 23~46g 磷酸氢钙 谷类及其制品 饮料及乳饮料 婴幼儿食品 10~20g 2.5~5g 19~38g （二）食品强化剂活性钙（GB-9990-88） 本标准适用于由牡蛎壳经高温煅烧、水解提纯而得制品，在食品工业中可作强化剂。 规定钙（Ca）含量大于或等于 50.0%。 二、标准方法 （一）火焰原子吸收光谱法（GB-12398-90）
本标准参照采用国际标准 ISO6490/2-1983《动物饲料-钙含量测定-原子吸收光谱 法》。 本标准适用于各种食物中钙的测定。 1.原理 样品经湿消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收 422.7nm 的共 振线，其口吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量。 2.试剂 要求使用去离子水，优级纯试剂。 （1）盐酸（GB622） （2）硝酸（GB626） （3）高氯酸（GB623） （4）混合酸消化液：硝酸：高氯酸（4：1）。 （5）0.5moL/L 硝酸溶液：量取 45mL 硝酸，加去离子水并稀释至 1000mL。 （6）2%氧化镧溶液：称取 25g 氧化镧（纯度大于 99.99%），加 75mL 盐酸于 1000mL 容量 瓶中，加去离子水稀释至刻度。 （7）钙标准溶液：精确称取 1.2486g 碳酸钙（纯度大于 99.99%）,加 50mL 去离子水，加 盐酸溶解，移入 1000mL 容量瓶中，加 2%氧化镧稀释至刻度，贮存于聚乙烯瓶内，4℃保 存。此溶液每毫升相当于 500μg 钙。 （8）钙标准使用液：钙标准使用液的配制见表 4-32。 表 4-32 钙标准使用液配制 元素 标准溶液浓度 μg/mL 吸取标准溶液量 mL 稀释体积（容量瓶） 标准应用液浓度 稀释溶液 钙 500 5．0 100 25 2%镧溶液 钙标准使用液配制后，贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。 3.仪器与设备 所用玻璃仪器均以硫酸-重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反 复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。 （1）实验室常用设备。 （2）原子吸分光光度计。 4、操作方法 ①样品处理 微量元素分析的样品制备过程中应特别注意防止污染。所用设备如电磨、绞肉机、匀 浆器、打碎机等必须是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品，做钙测定的样 品不得用石磨研碎。湿样（如蔬菜、水果、鲜鱼、鲜肉等）用水冲洗干净后，要用支离子 水充分洗净。干粉类样品（如面粉、奶粉等）取样后产即装容器密封保存，防止空气中的 灰尘和水分污染。 ②样品消化 精确称取均匀样品干样 0.5~1.5g(湿样 2.0~4.0g，饮料等液体样品 5.0~10.0g)于 250mL 高型烧杯中，加混合酸消化液 20~30mL,上盖表皿。置于电热板或电砂浴上加热消化。如 未消化好而酸液过少时，再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。 加几毫升去离子水，加热以除去多余的硝酸。待烧杯中的液体接近 2~3mL 时，取下冷却。 用去离子水洗并移于 10mL 刻度试管中，加去离子水定容至刻度（测钙时用 2%氧化镧溶 液稀释定容）。 取与消化样品相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。 （2）测定 将钙、标准使用液分别配制不同浓度系列的标准稀释液见表 4-33,测定操作参数见表 4-34。 表 4-34 不同浓度系列标准稀释液的配制方法
本标准参照采用国际标准 ISO6490/2-1983《动物饲料-钙含量测定-原子吸收光谱 法》。 本标准适用于各种食物中钙的测定。 1.原理 样品经湿消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收 422.7nm 的共 振线，其口吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量。 2.试剂 要求使用去离子水，优级纯试剂。 （1）盐酸（GB622） （2）硝酸（GB626） （3）高氯酸（GB623） （4）混合酸消化液：硝酸：高氯酸（4：1）。 （5）0.5moL/L 硝酸溶液：量取 45mL 硝酸，加去离子水并稀释至 1000mL。 （6）2%氧化镧溶液：称取 25g 氧化镧（纯度大于 99.99%），加 75mL 盐酸于 1000mL 容量 瓶中，加去离子水稀释至刻度。 （7）钙标准溶液：精确称取 1.2486g 碳酸钙（纯度大于 99.99%）,加 50mL 去离子水，加 盐酸溶解，移入 1000mL 容量瓶中，加 2%氧化镧稀释至刻度，贮存于聚乙烯瓶内，4℃保 存。此溶液每毫升相当于 500μg 钙。 （8）钙标准使用液：钙标准使用液的配制见表 4-32。 表 4-32 钙标准使用液配制 元素 标准溶液浓度 μg/mL 吸取标准溶液量 mL 稀释体积（容量瓶） 标准应用液浓度 稀释溶液 钙 500 5．0 100 25 2%镧溶液 钙标准使用液配制后，贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。 3.仪器与设备 所用玻璃仪器均以硫酸-重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反 复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。 （1）实验室常用设备。 （2）原子吸分光光度计。 4、操作方法 ①样品处理 微量元素分析的样品制备过程中应特别注意防止污染。所用设备如电磨、绞肉机、匀 浆器、打碎机等必须是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品，做钙测定的样 品不得用石磨研碎。湿样（如蔬菜、水果、鲜鱼、鲜肉等）用水冲洗干净后，要用支离子 水充分洗净。干粉类样品（如面粉、奶粉等）取样后产即装容器密封保存，防止空气中的 灰尘和水分污染。 ②样品消化 精确称取均匀样品干样 0.5~1.5g(湿样 2.0~4.0g，饮料等液体样品 5.0~10.0g)于 250mL 高型烧杯中，加混合酸消化液 20~30mL,上盖表皿。置于电热板或电砂浴上加热消化。如 未消化好而酸液过少时，再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。 加几毫升去离子水，加热以除去多余的硝酸。待烧杯中的液体接近 2~3mL 时，取下冷却。 用去离子水洗并移于 10mL 刻度试管中，加去离子水定容至刻度（测钙时用 2%氧化镧溶 液稀释定容）。 取与消化样品相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。 （2）测定 将钙、标准使用液分别配制不同浓度系列的标准稀释液见表 4-33,测定操作参数见表 4-34。 表 4-34 不同浓度系列标准稀释液的配制方法
元素 使用液浓度 μg/mL 吸取使用液量 稀释体积（容量瓶） mL 标准系列浓度 μg/mL 稀释溶液 钙 25 1 2 3 4 6 50 0.5 1 1.5 2 3 2%镧溶液 表 4-34 测定操作参数 元素 波长 nm 光源 火焰 标准系列浓度范围 μg/mL 稀释溶液 钙 422.7 可见 空 气 — —乙炔 0.5~3.0 2%镧溶液 其他实验条件：仪器狭缝、空气及乙炔的流量、灯头高度、元素灯电流等均匀按使用的仪 器说明调至最佳状态。 将消化好的样液、试剂空白液和各元素的标准系列分别导入火焰进行测定。 （3）计算 ①标准曲线法 以各浓度系列标准溶液与对应的吸光度绘制标准曲线。钙标准曲线如图 4-6 所示。它 的线形相关系数为 0.9996。 测定用样品液及试剂空白液标准曲线查出浓度值（c 及 c0）,再按式（4-42）计算。 式中：X-样品中元素的含量，mg/100g; c-测定用样品中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL; c0-试剂空白液中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL; V-样品定容体积，mL; f-稀释倍数; m-样品质量，g; -折算成每百克样品中元素的质量，以毫克计。 吸光度 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 1.0 1.5 2.0 2.5 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 浓度 c, 图 4-6 钙标准曲线 ②回归方程法 由各元素标准稀释液浓度与对应的吸光度计算出回归方程（也可以输入计算器得出加 回归方程），计算见式（4-43）。 .(4 42) 1000 ( 0 ) 100 − − = m c c V X 1000 100 c = ay + b.(4 − 43)
元素 使用液浓度 μg/mL 吸取使用液量 稀释体积（容量瓶） mL 标准系列浓度 μg/mL 稀释溶液 钙 25 1 2 3 4 6 50 0.5 1 1.5 2 3 2%镧溶液 表 4-34 测定操作参数 元素 波长 nm 光源 火焰 标准系列浓度范围 μg/mL 稀释溶液 钙 422.7 可见 空 气 — —乙炔 0.5~3.0 2%镧溶液 其他实验条件：仪器狭缝、空气及乙炔的流量、灯头高度、元素灯电流等均匀按使用的仪 器说明调至最佳状态。 将消化好的样液、试剂空白液和各元素的标准系列分别导入火焰进行测定。 （3）计算 ①标准曲线法 以各浓度系列标准溶液与对应的吸光度绘制标准曲线。钙标准曲线如图 4-6 所示。它 的线形相关系数为 0.9996。 测定用样品液及试剂空白液标准曲线查出浓度值（c 及 c0）,再按式（4-42）计算。 式中：X-样品中元素的含量，mg/100g; c-测定用样品中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL; c0-试剂空白液中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL; V-样品定容体积，mL; f-稀释倍数; m-样品质量，g; -折算成每百克样品中元素的质量，以毫克计。 吸光度 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 1.0 1.5 2.0 2.5 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 浓度 c, 图 4-6 钙标准曲线 ②回归方程法 由各元素标准稀释液浓度与对应的吸光度计算出回归方程（也可以输入计算器得出加 回归方程），计算见式（4-43）。 .(4 42) 1000 ( 0 ) 100 − − = m c c V X 1000 100 c = ay + b.(4 − 43)
式中：c-测定用样品中元素的浓度（可由计算器直接得出），μg/mL; a-曲线斜率; y-元素的吸收度; b-曲线的过程中截距。 由回归方程或计算器得出测定样液及试剂空白液的浓度后，再由式（4-44） 计算。 式中：各符号的含义同曲线法说明。 5.说明 （1）实验室平行测定或边续两次测定结果的重现性钙小于 10%。 (2)最低检测限：钙 0.1μg。 (二)EDTA 滴定法（GB 12398-90） 1、原理 钙与氨羧络合剂能定量地形成金属络合物，其稳定性较钙与指示剂所形成的络合物 为强。在适当的 pH 值范围内，以氨羧络合剂 EDTA 滴定，在达到当量点时，EDTA 就自 指示剂络合物中夺取钙离子，使溶液呈现游离指示剂的颜色（终点）。根据 EDTA 络合剂 用量，可计算钙的含量。 2、试剂 要求使用去离子水，优级纯试剂。 （1）25moL/L 氢氧化钾溶液：精确称取 71.13g 氢氧化钾，用去离子水稀释至 1000mL。 （2）10g/L 氰化钠溶液：称取 1.0g 氰化钠，用去离子水稀释至 100mL。 （3）0.05moL/L 柠檬酸钠溶液：称取 14.7g 柠檬酸钠（ ） ，用去离子水 稀释至 1000mL。 （4）混合酸消化液：硝酸（GB 626）与高氯酸（GB 623）(4：1)。 （5）EDTA 溶液：精确称取 4.50gEDTA（乙二胺四乙酸二钠），用去离子水稀释至 1000mL， 贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。使用时稀释 10 倍即可。 （6）钙标准溶液：精确称取 0.1248g 碳酸钙（纯度大于 99.99%，105~110℃烘干 2h），加 20mL 去离子水及 3mL 0.5moL/L 盐酸溶解，移入 500mL 容量瓶中，加去离子水稀释至刻 度，贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。此溶液每毫升相当于 100μg 钙。 （7）钙红指示剂：称取 0.1g 钙红指示剂（ ） ，用去离子水稀释至 100mL， 溶解后即可使用，贮存于冰箱中可保持一个半月以上。 3、仪器与设备 所有玻璃仪器均以硫酸-重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反 复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。 （1）实验室常用玻璃仪器：高型烧杯（250mL），微量滴定管（1 或 2mL），碱式滴 定管（50mL），刻度吸管（0.5~1mL），试管等。 （2）电热板：1000~3000W，消化样品用。 4、样品制备 同火焰原子吸收分光谱法 5、操作步骤 （1）样品消化 同火焰原子吸收分光光度法。 (2)测定 ①标定 EDTA 浓度 吸取 0.5mL 钙标准溶液，以 EDTA 滴定，标定其 EDTA 的浓度，根据滴定结果计算出每 毫升 EDTA 相当于钙的毫克数，即滴定度（T）。 ②样品及空白滴定 吸取 0.1-0.5mL（根据钙的含量而定）样品消化液及空白于试管中，加 1 滴氰化钠 .(4 44) 1000 ( 0 ) 100 − − = m c c V f X C21O7N2 SH14
式中：c-测定用样品中元素的浓度（可由计算器直接得出），μg/mL; a-曲线斜率; y-元素的吸收度; b-曲线的过程中截距。 由回归方程或计算器得出测定样液及试剂空白液的浓度后，再由式（4-44） 计算。 式中：各符号的含义同曲线法说明。 5.说明 （1）实验室平行测定或边续两次测定结果的重现性钙小于 10%。 (2)最低检测限：钙 0.1μg。 (二)EDTA 滴定法（GB 12398-90） 1、原理 钙与氨羧络合剂能定量地形成金属络合物，其稳定性较钙与指示剂所形成的络合物 为强。在适当的 pH 值范围内，以氨羧络合剂 EDTA 滴定，在达到当量点时，EDTA 就自 指示剂络合物中夺取钙离子，使溶液呈现游离指示剂的颜色（终点）。根据 EDTA 络合剂 用量，可计算钙的含量。 2、试剂 要求使用去离子水，优级纯试剂。 （1）25moL/L 氢氧化钾溶液：精确称取 71.13g 氢氧化钾，用去离子水稀释至 1000mL。 （2）10g/L 氰化钠溶液：称取 1.0g 氰化钠，用去离子水稀释至 100mL。 （3）0.05moL/L 柠檬酸钠溶液：称取 14.7g 柠檬酸钠（ ） ，用去离子水 稀释至 1000mL。 （4）混合酸消化液：硝酸（GB 626）与高氯酸（GB 623）(4：1)。 （5）EDTA 溶液：精确称取 4.50gEDTA（乙二胺四乙酸二钠），用去离子水稀释至 1000mL， 贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。使用时稀释 10 倍即可。 （6）钙标准溶液：精确称取 0.1248g 碳酸钙（纯度大于 99.99%，105~110℃烘干 2h），加 20mL 去离子水及 3mL 0.5moL/L 盐酸溶解，移入 500mL 容量瓶中，加去离子水稀释至刻 度，贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。此溶液每毫升相当于 100μg 钙。 （7）钙红指示剂：称取 0.1g 钙红指示剂（ ） ，用去离子水稀释至 100mL， 溶解后即可使用，贮存于冰箱中可保持一个半月以上。 3、仪器与设备 所有玻璃仪器均以硫酸-重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反 复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。 （1）实验室常用玻璃仪器：高型烧杯（250mL），微量滴定管（1 或 2mL），碱式滴 定管（50mL），刻度吸管（0.5~1mL），试管等。 （2）电热板：1000~3000W，消化样品用。 4、样品制备 同火焰原子吸收分光谱法 5、操作步骤 （1）样品消化 同火焰原子吸收分光光度法。 (2)测定 ①标定 EDTA 浓度 吸取 0.5mL 钙标准溶液，以 EDTA 滴定，标定其 EDTA 的浓度，根据滴定结果计算出每 毫升 EDTA 相当于钙的毫克数，即滴定度（T）。 ②样品及空白滴定 吸取 0.1-0.5mL（根据钙的含量而定）样品消化液及空白于试管中，加 1 滴氰化钠 .(4 44) 1000 ( 0 ) 100 − − = m c c V f X C21O7N2 SH14
溶液和 0.1mL 柠檬酸钠溶液，用滴定管加 1.5mL 1.25moL/L 氢氧化钾溶液，加 3 滴钙红指 示剂，立即以稀释 10 倍 EDTA 溶液滴定，至指示剂由紫红色变蓝为止。 ③计算 样品中该元素的含量按式（4-45）计算。 式中：X-样品中元素含量，mg/100g。 T-EDTA 滴定度，mg/mL; V-滴定样品时所用 EDTA 量，mL; V0-滴定空白时所用 EDTA 量，mL; f-样品稀释倍数; m-样品称重量，g。 6、说明 本方法同实验室平行测定或连续两次测定结果的重复性小于 10%。本方法的检测范 围为 5~50 μg。 （三）活性钙中钙的测定（GB 9990-88） 1.原理 同 EDTA 滴定法。 2.试剂 （1）盐酸（GB 622）(1+1)溶液。 （2）酒石酸铵（GB 602）(100g/L) （3）三乙醇铵（1+2）溶液：量取三乙醇铵 50mL，加水 100mL，混匀 （4）氰化钾（50g/L）溶液。 （5）氢氧化钠（GB 629）100g/L 和 200g/L 溶液。 （6）钙红指示剂：称取钙红（ ）0.5g 与干燥后的氯化钠 50g 于研钵中， 充分研磨均匀粉末，放入棕色瓶中保存。 （7）0.02moL/L 乙二胺四乙酸二钠标准溶液：称取乙二胺四乙酸二钠 8g，加热溶于 1000mL 水中，冷却，摇匀。 标定：称取于 800C 灼烧至恒量的基准氧化锌 0.4g（称准至 0.0002g）,用少量水湿 润，加盐酸溶液（20%）至样品溶解，移入 250mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取 30.00~35.00mL，加 70mL 水，用氨水溶液（10%）中和至 pH7~8,加 10mL 氨-氯化铵缓冲 溶液甲（pH=10）及 5 滴络黑 T 指示剂（5g/L）,用配制好的乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至 溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白试验。 计算： 乙二胺四乙酸二钠标准溶液浓度按式（4-46）计算。 式中：cedta-乙二胺四乙酸二钠标准溶液之物质的量浓度，moL/L。 m-氧化锌之质量，mL; V1-乙二胺四乙酸二钠溶液之用量，mL; V2-空白试验中乙二胺四乙酸二铵溶液之用量，mL; 0.08138-与 1.00mL 乙二胺四乙酸二钠标准溶液[c(EDTA)=1.000moL/L]相当的 以克表示的氧化锌的质量。 3.仪器 实验室常规仪器。 4.操作方法 称取活性钙样品 2.0g 于烧杯中，加 25mL 水，缓慢滴加盐酸至全溶，加热驱除二氧 化碳，冷却后，于容量瓶中加水稀释至 250mL.。用移液管吸取 25mL 混匀的溶液于 250mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，再用称液管吸取上述溶液 25mL，于锥形瓶中，加入酒石酸 铵2.5mL,三乙醇胺5mL，混匀后再加200g/L氢氧化钠10mL，氰化钾5mL,钙红指示剂0.2g， .(4 45) ( 0 ) 100 − − = m T V V f X C20H14N2O7 S .(4 46) ( 1 2 ) 0.08138 − − = V V m cedta
溶液和 0.1mL 柠檬酸钠溶液，用滴定管加 1.5mL 1.25moL/L 氢氧化钾溶液，加 3 滴钙红指 示剂，立即以稀释 10 倍 EDTA 溶液滴定，至指示剂由紫红色变蓝为止。 ③计算 样品中该元素的含量按式（4-45）计算。 式中：X-样品中元素含量，mg/100g。 T-EDTA 滴定度，mg/mL; V-滴定样品时所用 EDTA 量，mL; V0-滴定空白时所用 EDTA 量，mL; f-样品稀释倍数; m-样品称重量，g。 6、说明 本方法同实验室平行测定或连续两次测定结果的重复性小于 10%。本方法的检测范 围为 5~50 μg。 （三）活性钙中钙的测定（GB 9990-88） 1.原理 同 EDTA 滴定法。 2.试剂 （1）盐酸（GB 622）(1+1)溶液。 （2）酒石酸铵（GB 602）(100g/L) （3）三乙醇铵（1+2）溶液：量取三乙醇铵 50mL，加水 100mL，混匀 （4）氰化钾（50g/L）溶液。 （5）氢氧化钠（GB 629）100g/L 和 200g/L 溶液。 （6）钙红指示剂：称取钙红（ ）0.5g 与干燥后的氯化钠 50g 于研钵中， 充分研磨均匀粉末，放入棕色瓶中保存。 （7）0.02moL/L 乙二胺四乙酸二钠标准溶液：称取乙二胺四乙酸二钠 8g，加热溶于 1000mL 水中，冷却，摇匀。 标定：称取于 800C 灼烧至恒量的基准氧化锌 0.4g（称准至 0.0002g）,用少量水湿 润，加盐酸溶液（20%）至样品溶解，移入 250mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取 30.00~35.00mL，加 70mL 水，用氨水溶液（10%）中和至 pH7~8,加 10mL 氨-氯化铵缓冲 溶液甲（pH=10）及 5 滴络黑 T 指示剂（5g/L）,用配制好的乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至 溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白试验。 计算： 乙二胺四乙酸二钠标准溶液浓度按式（4-46）计算。 式中：cedta-乙二胺四乙酸二钠标准溶液之物质的量浓度，moL/L。 m-氧化锌之质量，mL; V1-乙二胺四乙酸二钠溶液之用量，mL; V2-空白试验中乙二胺四乙酸二铵溶液之用量，mL; 0.08138-与 1.00mL 乙二胺四乙酸二钠标准溶液[c(EDTA)=1.000moL/L]相当的 以克表示的氧化锌的质量。 3.仪器 实验室常规仪器。 4.操作方法 称取活性钙样品 2.0g 于烧杯中，加 25mL 水，缓慢滴加盐酸至全溶，加热驱除二氧 化碳，冷却后，于容量瓶中加水稀释至 250mL.。用移液管吸取 25mL 混匀的溶液于 250mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，再用称液管吸取上述溶液 25mL，于锥形瓶中，加入酒石酸 铵2.5mL,三乙醇胺5mL，混匀后再加200g/L氢氧化钠10mL，氰化钾5mL,钙红指示剂0.2g， .(4 45) ( 0 ) 100 − − = m T V V f X C20H14N2O7 S .(4 46) ( 1 2 ) 0.08138 − − = V V m cedta