(六)保持实验室的整洁和干燥，实验完毕后，各组应将本组使用的器械清洗干净，擦 干水分，清点整齐，经老师验收后方可离开实验室；卫生值日小组负责实验台、地面、水 池等处的清洗，动物尸体的倾倒等工作。 实验一鱼类血管导管手术 一、实验目的 掌握进行鱼类血管导管手术的基本步骤和方法，并了解它在鱼类生理研究工作中的作用和 意义。 二、实验材料 （一)实验动物草鱼。 (二)实验器材流水式手术台、手术台、剪、镊、针、缝线、止血棉花、内径0.6和 0.25毫米塑料管、金属套管和长注射针、流水式小长格水族箱。 (三)药品麻醉剂(MS222,尿烷或喹那啶)、肝素、鱼用生理盐水。 三、实验步骤与观察项目 (一)配制鱼用生理盐水 采用Cortland淡水鱼用生理盐水，其配置方法是：用NaCI7.25克，Ka0.38克，caCl20.162 克，Mgs04.7H200.23克，NaHC031.0克，NaH2P04.2H200,41克，葡萄糖1.0克配制成1 升(1000毫升)生理溶液。氩化钙和葡萄糖应在使用前再加入；蒸溜水在配制生理盐水 之前最好能进行充气。 进行血管导管手术用的生理盐水，要在使用前加入肝素，份量是：每升加入肝素10个国 际单位 (二)配制麻醉溶液与手术前麻醉鱼 常用的麻醉剂及其配制浓度是： 1.MS-222浓度为1：10,0001：45,000，进行血管导管手术时，用1：20,000的浓 度浸泡鱼体使之麻醉；用1：45,000的浓度通过胶管不断灌注鳃部。 2.尿烷浓度是540毫克/升。 3.喹那啶浓度是0.010.03毫升溶解于等量的丙酮中，然后加入1升水中。 配制麻醉溶液的水要取自手术鱼类原来驯养的水体。如能用低温的水配制麻醉溶液，将 增强麻醉效果。 麻醉溶液配好后将鱼放入，12分钟后停止游动，身体失去平衡，鳃盖活动中止，对外 界刺激无任何反应，就可将它置于手术台上。由于血管导管手术需时较长，通常是半小时
（六）保持实验室的整洁和干燥，实验完毕后，各组应将本组使用的器械清洗干净，擦 干水分，清点整齐，经老师验收后方可离开实验室；卫生值日小组负责实验台、地面、水 池等处的清洗，动物尸体的倾倒等工作。 实验一 鱼类血管导管手术 一、实验目的 掌握进行鱼类血管导管手术的基本步骤和方法，并了解它在鱼类生理研究工作中的作用和 意义。 二、实验材料 （一）实验动物 草鱼。 （二）实验器材 流水式手术台、手术台、剪、镊、针、缝线、止血棉花、内径 0.6 和 0.25毫米塑料管、金属套管和长注射针、流水式小长格水族箱。 （三）药品 麻醉剂（MS-222，尿烷或喹那啶）、肝素、鱼用生理盐水。 三、实验步骤与观察项目 （一）配制鱼用生理盐水 采用 Cortland 淡水鱼用生理盐水，其配置方法是：用 NaCI7.25 克，KCI0.38 克,CaCI20.162 克，MgSO4.7H2O0.23克，NaHCO31.0 克，NaH2PO4.2H2O0.41 克，葡萄糖 1.0 克配制成 1 升（1000 毫升）生理溶液。氯化钙和葡萄糖应在使用前再加入；蒸馏水在配制生理盐水 之前最好能进行充气。 进行血管导管手术用的生理盐水，要在使用前加入肝素，份量是：每升加入肝素 10 个国 际单位。 （二）配制麻醉溶液与手术前麻醉鱼 常用的麻醉剂及其配制浓度是： 1．MS-222 浓度为 1：10，000~1：45，000，进行血管导管手术时，用 1：20，000 的浓 度浸泡鱼体使之麻醉；用 1：45，000 的浓度通过胶管不断灌注鳃部。 2．尿烷 浓度是 5—40 毫克/升。 3．喹那啶 浓度是 0.01~0.03 毫升溶解于等量的丙酮中，然后加入 1 升水中。 配制麻醉溶液的水要取自手术鱼类原来驯养的水体。如能用低温的水配制麻醉溶液，将 增强麻醉效果。 麻醉溶液配好后将鱼放入，1~2 分钟后停止游动，身体失去平衡，鳃盖活动中止，对外 界刺激无任何反应，就可将它置于手术台上。由于血管导管手术需时较长，通常是半小时
以上，因此，应将浓度较低的麻醉溶液通过胶管不断地灌注鱼鳃部，既供给必要的氧气又 保证鱼在整个手术过程始终处于麻醉状态。 (三)背大动脉导管手术 1,用粗注射针将麻醉鱼上颌两鼻腔之间刺穿，插入一长约34厘米的粗塑料管，以备手 术后将血管导管引出体外。然后，将鱼腹部向上置于用塑料网制成的吊床上，左右鳃盖下 插入小胶管，使循环流动的低浓度麻醉溶液不断灌注鳃部，并使鱼体表保持潮湿。用一吊 钩把鱼下颌往上拉起，使口腔尽可能张大。用手术弯针穿线后，在口腔顶部正中线的上皮 下，一点进一点出系上两个活结，前后相距约1厘米，以备将导管固定在口腔顶部上皮 用。 2.用2毫升的注射器装满含肝素的鱼用生理盐水，接上注射针头（注射针头的口径应与 做导管用的塑料小管内径相一致)；针头末端再套上长约50厘米的塑料小管。轻轻推动注 射器筒塞，使整条塑料小管都充满含肝素的鱼用生理盐水。如有气泡，应来回移动射器筒 塞或挤出少许生理盐水而将它排除。 3用特制的金属套管和插入套管内的注满抗凝剂的塑料导管在咽腔上壁第 一对鳃弓和第 二对鳃弓之间的正中线轻轻以300角斜刺入上皮组织以及在其下方的背大动脉插入动作要 小心，稳而准（为了保证血管导管手术成功，手术前应通过解剖了解实验鱼背大动脉在咽 腔上壁的具体部位)。如果套管正好刺入背大动脉（注意刺入动作不可用力过大，以免穿 过背大动脉)，血液将立即沿塑料导管向外涌出。此时，一手应将金属套管轻轻稳住，不 可移动， 手将塑料导管沿着金属套管小心地插入背大动脉内，如果塑料导管正好插入 背大动脉内，则背大动脉的血液就会沿着塑料导管向外流。此时亦可轻轻来回移动注射器 筒塞，以观察血流在塑料导管内是否通畅。如果血流通畅，说明塑料导管已经准确插入背 大动脉内，如果血流中断，则表示塑料导管并未插入背大动脉内或者只在背大动脉出血的 部位，必须把塑料导管取出，重新再寻找合适的部位刺入。 4·将塑料导管准确插入背大动脉后，一手用镊子轻轻夹住塑料小管，将它的位置稳住， 切不可移动，另一手慢慢将金属套管小心移出。移出一段距离后，使其位置固定。在系紧 塑料小管前必须移动注射器筒塞，以检查小管内的血流是否畅通无阻以及有无气泡。结系 塑料导管时不可太紧，以免影响血液流通。塑料导管固定在口腔顶部上皮后，将塑料导管 穿过鱼上颌两鼻腔之间的穿孔，把塑料导管引出体外。并用相线将塑料导管结扎。这时 可用注射器把少量生理盐水通过塑料导管注入鱼体内以补充手术过程的失血，并使整个塑 料导管充满生理盐水而无气泡，然后取走注射器和注射针头，用线将塑料导管未端扎紧封 闭。 (四)鱼在手术后护理 做完背大动脉导管手术后，鱼应立即移入有新鲜流水与充气的水族箱中，迅速让其苏醒。 如因麻醉较深，苏醒缓慢时，可用手帮助其口腔和鳃盖运动（相当于人工呼吸），促使它 恢复呼吸运动。苏醒后的鱼应移入特别的用黑色塑料板间隔成长格的流水式水族箱内，每
以上，因此，应将浓度较低的麻醉溶液通过胶管不断地灌注鱼鳃部，既供给必要的氧气又 保证鱼在整个手术过程始终处于麻醉状态。 （三）背大动脉导管手术 1．用粗注射针将麻醉鱼上颌两鼻腔之间刺穿，插入一长约 3~4 厘米的粗塑料管，以备手 术后将血管导管引出体外。然后，将鱼腹部向上置于用塑料网制成的吊床上，左右鳃盖下 插入小胶管，使循环流动的低浓度麻醉溶液不断灌注鳃部，并使鱼体表保持潮湿。用一吊 钩把鱼下颌往上拉起，使口腔尽可能张大。用手术弯针穿线后，在口腔顶部正中线的上皮 下，一点进一点出系上两个活结，前后相距约 1 厘米，以备将导管固定在口腔顶部上皮 用。 2．用 2 毫升的注射器装满含肝素的鱼用生理盐水，接上注射针头（注射针头的口径应与 做导管用的塑料小管内径相一致）；针头末端再套上长约 50 厘米的塑料小管。轻轻推动注 射器筒塞，使整条塑料小管都充满含肝素的鱼用生理盐水。如有气泡，应来回移动射器筒 塞或挤出少许生理盐水而将它排除。 3．用特制的金属套管和插入套管内的注满抗凝剂的塑料导管在咽腔上壁第一对鳃弓和第 二对鳃弓之间的正中线轻轻以 300 角斜刺入上皮组织以及在其下方的背大动脉插入动作要 小心，稳而准（为了保证血管导管手术成功，手术前应通过解剖了解实验鱼背大动脉在咽 腔上壁的具体部位）。如果套管正好刺入背大动脉（注意刺入动作不可用力过大，以免穿 过背大动脉），血液将立即沿塑料导管向外涌出。此时，一手应将金属套管轻轻稳住，不 可移动，另一手将塑料导管沿着金属套管小心地插入背大动脉内，如果塑料导管正好插入 背大动脉内，则背大动脉的血液就会沿着塑料导管向外流。此时亦可轻轻来回移动注射器 筒塞，以观察血流在塑料导管内是否通畅。如果血流通畅，说明塑料导管已经准确插入背 大动脉内，如果血流中断，则表示塑料导管并未插入背大动脉内或者只在背大动脉出血的 部位，必须把塑料导管取出，重新再寻找合适的部位刺入。 4．将塑料导管准确插入背大动脉后，一手用镊子轻轻夹住塑料小管，将它的位置稳住， 切不可移动，另一手慢慢将金属套管小心移出。移出一段距离后，使其位置固定。在系紧 塑料小管前必须移动注射器筒塞，以检查小管内的血流是否畅通无阻以及有无气泡。结系 塑料导管时不可太紧，以免影响血液流通。塑料导管固定在口腔顶部上皮后，将塑料导管 穿过鱼上颌两鼻腔之间的穿孔，把塑料导管引出体外。并用粗线将塑料导管结扎。这时， 可用注射器把少量生理盐水通过塑料导管注入鱼体内以补充手术过程的失血，并使整个塑 料导管充满生理盐水而无气泡，然后取走注射器和注射针头，用线将塑料导管末端扎紧封 闭。 （四）鱼在手术后护理 做完背大动脉导管手术后，鱼应立即移入有新鲜流水与充气的水族箱中，迅速让其苏醒。 如因麻醉较深，苏醒缓慢时，可用手帮助其口腔和鳃盖运动（相当于人工呼吸），促使它 恢复呼吸运动。苏醒后的鱼应移入特别的用黑色塑料板间隔成长格的流水式水族箱内，每