实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。 实验5.粗脂肪的提取和定量测定 实验目的：通过实验掌握索氏提取器提取脂肪的原理与方法；学习和掌握用重量分析法 对粗脂肪进行定量测定。 实验原理：利用脂质物质溶于有机溶剂的特性，在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的 脂质物质进行提取。因提取的是脂质物质的混合物，故称粗脂肪。在索氏提取器中用沸程为 低于30～60°C的石油醚提取样品中的脂质物质，此法为重量法，将由样品提出的粗脂肪， 蒸去溶剂，干燥，称重，求出样品中粗脂肪的百分含量。 实验仪器：索氏提取器（50mL）、电子天平、烧杯、烘箱、干燥器、恒温水浴锅。 实验安排：教师讲解索氏提取法的原理、操作步骤及实验注意事项；讲解索氏提取器的 原理及安装；学生以6人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。 实验6.蛋白质含量的测定（考马斯亮兰染色法） 实验目的：学习用考马斯亮兰染色法测定蛋白质的含量。 实验原理：利用染色方法提高蛋白质消光系数，以提高分光光度法检测灵敏度。考马斯 亮蓝G250与蛋白质结合后，染料的最大吸收从465nm变为595nm，用制定标准曲线的方法 测595nm吸光度，用标准曲线计算蛋白质含量。 实验仪器：分光光度计、电子天平、水浴锅、移液管、烧杯、试管、试管架。 实验安排：教师讲解实验原理、操作步骤及实验注意事项；学生以4人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。 实验7.氨基酸的分离鉴定（纸层析法） 实验目的：学习纸层析法分离氨基酸的基本原理及操作方法。 实验原理：纸层析法是用滤纸作为支持物的分配层析法。滤纸上吸附的水作为固定相， 有机溶剂为有机相，有机溶剂流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。物质被分
实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。 实验 5. 粗脂肪的提取和定量测定 实验目的：通过实验掌握索氏提取器提取脂肪的原理与方法；学习和掌握用重量分析法 对粗脂肪进行定量测定。 实验原理：利用脂质物质溶于有机溶剂的特性，在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的 脂质物质进行提取。因提取的是脂质物质的混合物，故称粗脂肪。在索氏提取器中用沸程为 低于 30～60℃的石油醚提取样品中的脂质物质，此法为重量法，将由样品提出的粗脂肪， 蒸去溶剂，干燥，称重，求出样品中粗脂肪的百分含量。 实验仪器：索氏提取器（50mL）、电子天平、烧杯、烘箱、干燥器、恒温水浴锅。 实验安排：教师讲解索氏提取法的原理、操作步骤及实验注意事项；讲解索氏提取器的 原理及安装；学生以 6 人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。 实验 6. 蛋白质含量的测定（考马斯亮兰染色法） 实验目的：学习用考马斯亮兰染色法测定蛋白质的含量。 实验原理：利用染色方法提高蛋白质消光系数，以提高分光光度法检测灵敏度。考马斯 亮蓝 G250 与蛋白质结合后，染料的最大吸收从 465nm 变为 595nm，用制定标准曲线的方法 测 595nm 吸光度，用标准曲线计算蛋白质含量。 实验仪器：分光光度计、电子天平、水浴锅、移液管、烧杯、试管、试管架。 实验安排：教师讲解实验原理、操作步骤及实验注意事项；学生以 4 人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。 实验 7. 氨基酸的分离鉴定（纸层析法） 实验目的：学习纸层析法分离氨基酸的基本原理及操作方法。 实验原理：纸层析法是用滤纸作为支持物的分配层析法。滤纸上吸附的水作为固定相， 有机溶剂为有机相，有机溶剂流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。物质被分
离在纸层析图谱上的位置用R+值（比移）表示。 Rr值=原点到层析点中心的距离／原点到溶剂前沿距离 实验仪器：层析缸、毛细管、喷雾器、培养血、层析滤纸。 实验安排：教师讲解纸层析法分离氨基酸的原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2 人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理，报告单上附层析结果（滤纸）。 实验8.蛋白质及氨基酸的呈色反应 实验目的：掌握双缩脲反应、三酮反应、黄色反应原理和操作方法；利用这些反应了 解蛋白质的基本结构及主要连接方式；利用这些反应鉴定蛋白质和氨基酸。 实验原理：尿素加热至180°℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中 能与Cu+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子能发生此反应。除 脯氨酸、羟脯氨酸和三酮反应产生黄色物之外，所有α-氨基酸及一切蛋白质都能和三酮 反应生成蓝紫色化合物。含有苯环的氨基酸遇硝酸后可被硝化成黄色物质，该物质在碱性溶 液中进一步形成橙黄色的邻硝醒酸钠。多数蛋白质含带苯环的氨基酸，所以有黄色反应。 实验仪器：试管、试管架、吸管、酒精灯、滤纸。 实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。列表表示各颜色反应的现象及现象解释。 实验9.蛋白质的沉淀反应 实验目的：加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识：了解蛋白质沉淀的方法及其实践意 义；了解蛋白质变性与沉淀的关系。 实验原理：蛋白质在溶液中的稳定性受到外界因素的影响，任何影响蛋白质的带电性和 水化作用的因素都会影响蛋白质溶液的稳定性，在适当条件下，蛋白质分子就会因失去电荷 和脱水二从溶液中沉淀出来。蛋白质沉淀方法有可逆的等电点沉淀法、盐析法、低温下短时 间的有机溶剂沉淀法，不可逆的加热沉淀法、重金属盐沉淀法、有机酸沉淀法、生物碱沉淀 法等。 实验仪器：电子天平、玻璃漏斗、量筒、试管与试管架、滴管、滤纸
离在纸层析图谱上的位置用 Rf值（比移）表示。 Rf值=原点到层析点中心的距离 / 原点到溶剂前沿距离 实验仪器：层析缸、毛细管、喷雾器、培养皿、层析滤纸。 实验安排：教师讲解纸层析法分离氨基酸的原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理，报告单上附层析结果（滤纸）。 实验 8. 蛋白质及氨基酸的呈色反应 实验目的：掌握双缩脲反应、茚三酮反应、黄色反应原理和操作方法；利用这些反应了 解蛋白质的基本结构及主要连接方式；利用这些反应鉴定蛋白质和氨基酸。 实验原理：尿素加热至 180℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中 能与 Cu 2+ 结合 生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子能发生此反应。除 脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物之外，所有α-氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮 反应生成蓝紫色化合物。含有苯环的氨基酸遇硝酸后可被硝化成黄色物质，该物质在碱性溶 液中进一步形成橙黄色的邻硝醌酸钠。多数蛋白质含带苯环的氨基酸，所以有黄色反应。 实验仪器：试管、试管架、吸管、酒精灯、滤纸。 实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。 实验场所：生物化学实验室。 实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确， 实验结果要真实，实验结果分析要合理。列表表示各颜色反应的现象及现象解释。 实验 9. 蛋白质的沉淀反应 实验目的：加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识；了解蛋白质沉淀的方法及其实践意 义；了解蛋白质变性与沉淀的关系。 实验原理：蛋白质在溶液中的稳定性受到外界因素的影响，任何影响蛋白质的带电性和 水化作用的因素都会影响蛋白质溶液的稳定性，在适当条件下，蛋白质分子就会因失去电荷 和脱水二从溶液中沉淀出来。蛋白质沉淀方法有可逆的等电点沉淀法、盐析法、低温下短时 间的有机溶剂沉淀法，不可逆的加热沉淀法、重金属盐沉淀法、有机酸沉淀法、生物碱沉淀 法等。 实验仪器：电子天平、玻璃漏斗、量筒、试管与试管架、滴管、滤纸