(二)、大肠杆菌DNA聚合酶及其它复制 相关的蛋白 矿目前已发现30多种酶及蛋白质因子参与 DNA复制，DNA生物合成方向为5→3。 1.DNA聚合酶发生活性的条件 ()DNA聚合酶 (2)DNA模板（反转录时用RNA模板） 3)引物(RNA,提供游离3'-OH) (4)4种dNTP(高能底物) (⑤)Mg2+
⑴ DNA聚合酶 ⑵ DNA模板（反转录时用RNA模板） ⑶ 引物（RNA，提供游离3´-OH） ⑷ 4种dNTP（高能底物） ⑸ Mg2+ （二）、大肠杆菌DNA聚合酶及其它复制 相关的蛋白 1. DNA聚合酶发生活性的条件 目前已发现30多种酶及蛋白质因子参与 DNA复制，DNA生物合成方向为5´→3´
2DNA复制的条件 高能的底物：dATP、dGTP、dCTP dTTP。 酶：DNA聚合酶、解旋酶、拓扑异构酶、 单链DNA 结合蛋白、引物酶、DNA连接酶等。 模板：以DNA两条链为模板合成新DNA链。 引物：由引物酶催化一小段RNA(游离3'-OH)的合成作 为 引物。 方向：51 3 Ma2+
2 DNA复制的条件 ▪ 高能的底物：dATP、dGTP、dCTP dTTP。 ▪ 酶：DNA聚合酶、解旋酶、拓扑异构酶、 单链DNA 结合蛋白、引物酶、DNA连接酶等。 ▪ 模板：以DNA两条链为模板合成新DNA链。 ▪ 引物：由引物酶催化一小段RNA(游离3´-OH)的合成作 为 引物。 ▪ 方向：5´ 3´ ▪ Mg2+
n dATP n,dGTP+nadCTP+nadTTP 模板DNA引物RNA DNA+(n1+n2+n3+n4)PPi DNA聚合酶 Mg2+
n1 dATP + n2 dGTP + n3 dCTP + n4 dTTP DNA +（n1+n2+n3+n4）PPi 模板DNA 引物RNA Mg2+ DNA聚合酶
2.原核生物DNA聚合酶的种类 (I)DNA聚合酶I g单体酶，分子量109Kd,含一个Zn2+,催化 活性： ① 具有5'3聚合酶活性：不是主要的聚 合酶 ②具有3：→5'外切酶活性：只对单链，起 校对功能。 ③具有5'→3外切酶活性：对双链，损伤 修复作用，及切除RNA引物并填补其留下的缺 口
2. 原核生物DNA聚合酶的种类 ⑴ DNA聚合酶Ⅰ 单体酶，分子量109Kd，含一个Zn2+ ，催化 活性： ① 具有5´→ 3´ 聚合酶活性：不是主要的聚 合酶 ② 具有3´→ 5´ 外切酶活性：只对单链，起 校对功能。 ③ 具有5´→ 3´ 外切酶活性：对双链，损伤 修复作用，及切除RNA引物并填补其留下的缺 口
①5'→3'聚合酶 Incoming deoxynucleoside 5'-triphosphate 0=P-O 0 0=P-0 0 70 0=P-0 0=P-0 0 5'® Growing 3 O. 0=P0 DNA strand OHOH OH (primer) A 新生链 G T T Template DNA strand 模板链 3' (P5 61 Deoxyribose
① 5´ → 3´ 聚合酶 模板链 新生链