GST5 mL-镍柱简介1.HisTrapTMFF基本信息HisTrapTMFFtBedDimensions+7×25mm1mLsBedVolume4FlowRates<4mL/min4Pressure Max+5 bar [0.5 MPa] (70 psi)+90μmAverage Particle SizekStorage Conditions4 to30°C,20%Ethanol+Columni.d.7mmHisTrapTM FF,1 mL+Completepacksize1 mL-Stable in commonly used aqueous buffersChemical Stability(0.1 MHCL, 0.1 MNaOH, 8 M urea)12.HisTrapTMHP基本信息N4HisTrapTM HP+FlowRate3mL/min+Pressure Max5 bar [0.5 MPa] (70 psi)e4HaTrapStorage Conditions+4to30C,20%Ethanolt34μmAverage Particle Sizer+Binding Capacity/mLAtleast 40 mg histidine-tagged protein/mLttChromatography Medium+mediumeHisrapTM He,5mLChelating agents such as EDTA, EGTA,AvoidUsingcitrate, DTTtColumn i.d.16mmt3.HisPrepTMFF基本信息
GST 5 mL ► 镍柱简介 1. HisTrapTM FF 基本信息 2. HisTrapTM HP基本信息 3. HisPrepTM FF基本信息
型2HisPrepTM FFBed Dimensions16×100mm20mLBed Volume1FlowRate<10mL/min+Pressure Max1.5 bar [0.15 MPa] (22 psi) HisPrepTMFF,20mL+90 μmAverage Particle Size*Matrix6% cross-linked agarose+Particle Sizee45μm-165μmTColumni.d.16mm镍柱清洁方法-1.使用镍柱前，先用两个柱体积（columnvolume，CV)的水洗去柱子里的酒精，再用2CV的NiBindingbuffer将柱子中的水换成buffer，连接柱时必须湿接。2．使用完毕后，先用2CVddH2O清洗，最后用20%酒精保存柱子。当柱子使用多次以后或发现压力增加或者颜色变黑，需要对柱子进行深度清洗和重新灌镍。以下是镍柱的清洗步骤。Regenerate Ni-NTA resinWash with3CVwaterWashwith100mMEDTAfor2CVWashwithmorethan5CVwaterWashwith3-5CV0.2MNaOHWashwithmorethan5CVwaterRe-chargetheresinwith100mMNisO4for2CVand stayfor>3hoursWash theresinwithmorethan10CVwaterWashwith20%ethanol2CVStock the resin/column in 20%ethanol in 4C-分子筛简介1.SuperdexTM20010/300基本信息Superder20010/300+3:Bed Volume24mL)Sample Volume500-2000μl1Pressure Max+14bar [1.4MPa]*FlowRate0.5mL/min-0.7mL/min4to30C,20%EthanolStorage Conditions+13μmeAverage Particle SizesSuperdextm20010/300,24mL1Columni.d.10mmChemical StabilityStableinall commonbuffers:1Macetic-acid,8Murea,6Mguanidine.hydrochloride, 1 M NaOH (for cleaning-in place)e1
► 镍柱清洁方法 1. 使用镍柱前，先用两个柱体积（column volume，CV）的水洗去柱子里的酒精，再用2 CV的NiBinding buffer将柱子中的水换成buffer，连接柱时必须湿接。 2. 使用完毕后，先用2 CV ddH2O清洗，最后用20%酒精保存柱子。当柱子使用多次以后或发现压力增 加或者颜色变黑，需要对柱子进行深度清洗和重新灌镍。以下是镍柱的清洗步骤。 Regenerate Ni-NTA resin Wash with 3 CV water Wash with 100 mM EDTA for 2 CV Wash with more than 5 CV water Wash with 3-5 CV 0.2 M NaOH Wash with more than 5 CV water Re-charge the resin with 100 mM NiSO4 for 2 CV and stay for > 3 hours Wash the resin with more than 10 CV water Wash with 20% ethanol 2 CV Stock the resin/column in 20% ethanol in 4 °C ► 分子筛简介 1. SuperdexTM 200 10/300基本信息
2.SuperdexTM200G16/600基本信息SuperdexTM 200G 16/600BedDimensions16×600mmBed Volume120mLComplete Packsize+1 ×120mL4FlowRate<1.0mL/min+Flow Velocity10cm/h-50cm/h16mmColumni.d.+Pressure Max.3 bar [0.3 MPa] (42 psi)SuperdexM200G16500,120mL<10mLSample Volume4to30C,20%EthanolStorage Conditions+3.SuperdexTM20026/600基本信息SuperdexTM20026/6002BedDimensions+26×600mm*300mLBed Volume1×300mLComplete pack sizeFlow Rate2mL/min*Pressure Max4 bar [0.4 MPa] (42 psi) <30mLSample VolumeStorage Conditions4to30C,20%Ethanol Column i.d.26mmSuperdexM20026/600,380mL34 μmAverage Particle Size4.SuperdexTM200300mL基本信息0Superdex TN 200300mLBed VolumeFlowRatep2mL/minPressure Max+0.4 MPa25mLeSample VolumeSuperdexM200,300mL+Storage Conditionse4to30C.20%Ethanol5.SuperdexTM7524mL基本信息
2. SuperdexTM 200G 16/600基本信息 3. SuperdexTM 200 26/600基本信息 4. Superdex TM 200 300 mL 基本信息 5. Superdex TM 75 24 mL 基本信息
Superdex N 75+Bed Volume24 mL.FlowRate0.5mL/minPressure Max1.4MPaSampleVolume500-2000μlSuperdexM75,24mlStorage Conditions4to30°C,20%Ethanol6.BioRadErichTMSEC65024mL基本信息BioRad ErichIM SEC650Bed Volume.24mL0.5mL/minFlowRate32.0MPaPressureMaxaSampleVolume,<250μlBioRadErichMSEC650,24mL-4to30°C,20%Ethanol.Storage Conditions注意：使用分子筛要加滤膜！注意上样体积和总蛋白量。分析型不超过柱体积5%，制备型不超过柱体积10%。采用环形loop上样时，需选用大于样品体积一倍体积的loop。分子筛清洁方法1.分子筛使前先1CV水洗去酒精，然后冲洗1~2CVgelfiltrationbuffer，使柱子内充满buffer。接柱时必须湿接。分子筛使完毕后，用2CVddH2O冲洗柱子，最后用1~2CV20%酒精冲洗柱子，用于保存。在分子筛旁边的登记薄上标明柱子状态，使用者和日期。2.分子筛使3~4次以后，因为里面会存有杂质（如变性蛋白)，用3~4CV0.2MNaOH清洗柱子，然后再用2CVddH2O冲洗，最后2CV20%酒精填充柱子，并保存。离子柱（SourceQ柱）简介
6. BioRad Erich TM SEC650 24 mL基本信息 ▲ 注意：使用分子筛要加滤膜！注意上样体积和总蛋白量。分析型不超过柱体积5%，制备型不超过柱体 积10%。采用环形loop上样时，需选用大于样品体积一倍体积的loop。 ► 分子筛清洁方法 1. 分子筛使前先1 CV水洗去酒精，然后冲洗1~2 CV gel filtration buffer，使柱子内充满buffer。接柱时必 须湿接。分子筛使完毕后，用2 CV ddH2O冲洗柱子，最后用1~2 CV 20%酒精冲洗柱子，用于保存。在 分子筛旁边的登记簿上标明柱子状态，使用者和日期。 2. 分子筛使3~4次以后，因为里面会存有杂质(如变性蛋白)，用3~4 CV 0.2 M NaOH清洗柱子，然后再用 2 CV ddH2O冲洗，最后2 CV 20%酒精填充柱子，并保存。 ► 离子柱（Source Q柱）简介
1.SourceQ15Max8mL基本信息+t4SourceQ15MaxICEBed Volume-8mLeFlowRate3mL/minPressure Max2.0MPaStorage Conditions+4to30C.20%EthanolSourceQ15Max,8mL+2.SourceQ15tricom2mL基本信息R国4SourceQ15tricornDRBed Volume-2mLsFlowRatee1mL/min+2.0MPaePressureMax+SourceQ15tricorn,2mL+4to30C,20%EthanolStorage Conditions3.SourceQ15tricorm1mL基本信息eSourceQ15tricorn+Bed Volume1mLFlowRate1mL/minPressure Max2.0MPaSourceQ15tricorn,1mlStorage Conditions4to3020%EthanolCMSepharoseFastFlowlomL基本信息4国CM SepharoseFastFlow+.Bed Volume10mLFlowRate3mL/minPressure Max0.3MPaCMSepharoseFastFlow,10mL4to30C20%EthanolStorage Conditions注意：使用离子交换柱要加滤膜！-离子柱清洁方法1.使完毕后，5CV2MNaCI清洗掉残留蛋白→5CVddH2O清洗NaCI-→2CV20%酒精填充柱子，用于保存
▲ 注意：使用离子交换柱要加滤膜！ ► 离子柱清洁方法 1. 使完毕后，5 CV 2 M NaCl 清洗掉残留蛋白→ 5 CV ddH2O清洗NaCl →2 CV 20%酒精填充柱子，用 于保存