讲稿课程名称：药物分析课程编号：H17035授课学期：第六学期11级药学、制剂授课班级：霍文任课教师：河北联合大学药学院1
1 讲 稿 课程名称： 药物分析 课程编号： H17035 授课学期： 第六学期 授课班级： 11 级药学、制剂 任课教师： 霍文 河北联合大学 药学院
首页课程名称：《药物分析》第_8周，第15讲次摘要第七章老苯乙胺类药物的分析Phenethylamine授课题目（章、节）第一节典型药物的结构和性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质检查第四节含量测定第五节体内药物分析【目的要求】通过本讲课程的学习，熟悉苯乙胺类药的结构和性质，掌握苯乙胺类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。熟悉本类药物杂质的结构检查方法与限度。了解体内样品分析与监测。【重点】苯乙胺类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。【难点】苯乙胺类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。内容【本讲课程的引入】拟肾上腺素类药物，分子结构中大都具有苯乙胺基本结构。临床上应用广泛，本章主要介绍苯乙胺类拟肾上腺素药的性质及分析。板书“苯乙胺类Phenethylamine药物的分析”。写出章节的题目，参照讲稿列出标题：根据需要在每个标题下适当写出需解释的内容或强调重点、难点等。【本讲课程的内容】（一）苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质1.基本结构与典型药物R-CH-CH—NH-ROH R3由于R1，R2，R3取代基的不同构成本类药物，药典收载的本类药物有20种，书中列举出14各品种的典型药物。例如：肾上腺素、去甲肾上腺素2.主要化学性质（1）弱碱性：烃氨基侧链，其氮为仲胺氮，故显弱碱性。（2）酚羟基特性：易氧化，可与金属离子络合呈色。邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色：在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深：在碱性溶液中更易变色。（3）光学活性：具有旋光活性。（4）苯环取代基特性：根据苯环取代基的电负性，最大吸收波长以254nm为中心2
2 首页 课程名称：《药物分析》 第 8 周，第 15 讲次 摘 要 授课题目（章、节） 第七章 苯乙胺类药物的分析 Phenethylamine 第一节 典型药物的结构和性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质检查 第四节 含量测定 第五节体内药物分析 【目的要求】通过本讲课程的学习，熟悉苯乙胺类药的结构和性质，掌握苯乙胺类药物鉴别和 含量测定的基本原理与方法。熟悉本类药物杂质的结构检查方法与限度。了解体内样品分析与 监测。 【重 点】苯乙胺类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。 【难 点】苯乙胺类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。 内 容 【本讲课程的引入】拟肾上腺素类药物，分子结构中大都具有苯乙胺基本结构 。临床上应用广泛，本章主要介绍苯乙胺类拟肾上腺素药的性质及分析。 板书“苯乙胺类 Phenethylamine 药物的分析”。写出章节的题目，参照讲稿列出标 题；根据需要在每个标题下适当写出需解释的内容或强调重点、难点等。 【本讲课程的内容】 （一）苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质 1．基本结构与典型药物 R CH CH NH R OH R 1 2 3 由于 R1, R2, R3 取代基的不同构成本类药物，药典收载的本类药物有 20 种， 书中列举出 14 各品种的典型药物。 例如：肾上腺素、去甲肾上腺素 2．主要化学性质 （1）弱碱性：烃氨基侧链，其氮为仲胺氮，故显弱碱性。 （2）酚羟基特性：易氧化，可与金属离子络合呈色。邻苯二酚（或苯酚）结 构，与金属离子络合呈色；在空气中或遇光、热易氧化， 色泽变深；在碱性溶液 中更易变色。 （3）光学活性：具有旋光活性。 （4）苯环取代基特性：根据苯环取代基的电负性，最大吸收波长以 254nm 为中心
红移或者蓝移；紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。（二）鉴别试验1.与三氯化铁反应2.与甲醛-硫酸反应3．氧化反应酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色。4.紫外特征吸收与红外吸收光谱5.与亚硝基铁氰化钠反应（Rmini试验）为脂肪族伯胺的专属性反应。6.双缩脲反应为盐酸麻黄碱专属性的鉴别反应。盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。例：Chp2010，鉴别盐酸麻黄碱方法：取本品1%水溶液1ml，加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠液1ml，即显蓝紫色，加乙醚1ml振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。盐酸去氧肾上腺素的鉴别：乙醚层不显色，可与盐酸麻黄碱区别（三）特殊杂质的检查1.酮体检查所有的典型药物中都要检查酮体。生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。例如：肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素和盐酸甲氧明等2.光学纯度检查大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子结构中存在手性碳原子通过比旋度测定控制药物的质量。手性药物光学纯度检查的最佳方法是实现对映体分离分析，目前常用的方法为色谱法和电泳法。例：重酒石酸去甲肾上腺素的光学纯度检查：称取重酒石酸去甲肾上腺素消旋体约50mg溶于5ml蒸馏水中，滴加氨水调pH为7~8：以乙酸乙酯萃取3次，所得乙酸乙酯层用蒸馏水洗涤2次，再用1g硫酸钠脱水，过滤除去硫酸钠，得到溶液置于50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得手性分离系统适用性溶液。同法制备（R)-重酒石酸去甲肾上腺素供试品溶液。取20μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定。用ChiralpakAD-H色谱柱，；以正已烷-乙醇-乙醇胺（800：200:2)为流动相；检测波长为280nm；流速0.8ml/min。对映体的分离因子为7.2。通3
3 红移或者蓝移 ；紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。 （二）鉴别试验 1．与三氯化铁反应 2．与甲醛-硫酸反应 3．氧化反应 酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色。 4．紫外特征吸收与红外吸收光谱 5．与亚硝基铁氰化钠反应（Rmini 试验） 为脂肪族伯胺的专属性反应。 6．双缩脲反应 为盐酸麻黄碱专属性的鉴别反应。盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄 碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。 例：Chp2010，鉴别盐酸麻黄碱 方法：取本品 1%水溶液 1ml，加硫酸铜试液 2 滴与 20%氢氧化钠液 1ml， 即显蓝紫色，加乙醚 1ml 振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。 盐酸去氧肾上腺素的鉴别：乙醚层不显色，可与盐酸麻黄碱区别 (三)特殊杂质的检查 1． 酮体检查 所有的典型药物中都要检查酮体。 生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。 例如：肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素 和盐酸甲氧明等 2. 光学纯度检查 大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子结构中存在手性碳原子， 通过比旋度测定控制药物的质量。手性药物光学纯度检查的最佳方法是实现对映体 分离分析，目前常用的方法为色谱法和电泳法。 例：重酒石酸去甲肾上腺素的光学纯度检查：称取重酒石酸去甲肾上腺素消旋体 约 50mg 溶于 5ml 蒸馏水中，滴加氨水调 pH 为 78；以乙酸乙酯萃取 3 次，所得乙 酸乙酯层用蒸馏水洗涤 2 次，再用 1g 硫酸钠脱水，过滤除去硫酸钠，得到溶液置 于 50ml 量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得手性分离系统适用性溶液。同 法制备(R)-重酒石酸去甲肾上腺素供试品溶液。取 20 l 注入液相色谱仪，照高效 液相色谱法测定。用 Chiralpak AD-H 色谱柱，；以正己烷-乙醇-乙醇胺(800∶200 ∶ 2)为流动相；检测波长为 280 nm；流速 0.8 ml/min。对映体的分离因子为 7.2。通
过手性高效液相色谱法分离，按峰面积归一化法，可以测定重酒石酸去甲肾上腺素的光学纯度3.有关物质的检查盐酸去氧肾上腺素和硫酸沙丁醇等药物列此项检查。TLC法检查有关物质例：盐酸去氧肾上腺素检查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每1ml中含0.10mg的溶液，作为对照溶液。吸取上述两种溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇一氯仿一浓氨溶液（80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查有关双胍取本品1.00g，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法（附录VA）试验，精密吸取上述溶液0.2ml，分别点于两张色谱滤纸条（7.5cm×50cm）上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为0.5～1cm：照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯一乙醇一水（6:3:1）为展开剂，展开至前沿距下端约7cm处，取出，晾干，用显色剂（取10%铁氰化钾溶液1ml，加10%亚硝基铁氰化钠溶液与10%氢氧化钠溶液各1ml，摇匀，放置15min，加水10ml与丙酮12ml，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，Rf值约为0.1），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸1cm，并分剪成碎条，精密吸取甲醇各20ml分别进行萃取后，照分光光度法（附录IVA)，在232nm的波长处测定吸收度，不得过0.48。（四）含量测定√原料：非水溶液滴定法、溴量法制剂：比色法、提取容量法、紫外分光光度法、高效液相色谱法一、非水溶液滴定法非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐以及有机酸碱金属盐类药物的含量。也用于测定某些有机弱酸的含量。非水滴定法表7-7中给出10种原料药的非水溶液测定法。①惰性溶剂：氯仿，甲苯，丙酮4
4 过手性高效液相色谱法分离，按峰面积归一化法，可以测定重酒石酸去甲肾上腺素 的光学纯度 3. 有关物质的检查 盐酸去氧肾上腺素和硫酸沙丁醇等药物列此项检查。 TLC 法检查有关物质 例：盐酸去氧肾上腺素 检查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每 1ml 含 20mg 的溶液，作为供试品溶 液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每 1ml 中含 0.10mg 的溶液，作为对照 溶液。吸取上述两种溶液各 10μl，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以异丙醇－氯 仿－浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。 供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 有关双胍 取本品 1.00g ，置 10ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照 纸色谱法（附录Ⅴ A）试验，精密吸取上述溶液 0.2ml ，分别点于两张色谱滤纸条 (7.5cm ×50cm) 上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为 0.5 ～ 1cm ；照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯－乙醇－水(6:3:1) 为展开剂，展开至前沿距下端约 7cm 处，取出，晾干，用显色剂（取 10％铁氰化 钾溶液 1ml ，加 10％ 亚硝基铁氰化钠溶液与 10％氢氧化钠溶液各 1ml ，摇匀， 放置 15min，加水 10ml 与丙酮 12ml，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红 色带，Rf 值约为 0.1 ），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应 部分并向外延伸 1cm ，并分剪成碎条，精 密吸取甲醇各 20ml 分别进行萃取后，照 分光光度法（附录Ⅳ A），在 232nm 的波长处测定吸收度，不得过 0.48。 （四）含量测定 ✓ 原料：非水溶液滴定法、溴量法 ✓ 制剂：比色法、提取容量法、紫外分光光度法、高效液相色谱法 一、非水溶液滴定法 非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测定有机碱 及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐以及有机酸碱金属盐类药物的含量。也用于测定某 些有机弱酸的含量。 非水滴定法 表 7-7 中给出 10 种原料药的非水溶液测定法。 ① 惰性溶剂：氯仿，甲苯，丙酮
②酸性溶剂：冰醋酸③碱性溶剂：DMF④两性溶剂：甲醇·非水溶液滴定法一弱碱性以冰醋酸为溶剂醋酸汞消除氢卤酸的干扰指示剂（终点颜色应以电位滴定时的突跃点为准，并将滴定结果用空白试验校正）若碱性较弱则加醋酐使突跃明显BHA'+HCIO4→BHCIO4'+HA1.基本原理：式中BH+·A-表示游离碱类盐；HA表示被置换出的弱酸。由于被置换出的HA的酸性强弱不同，因而对滴定反应的影响也不同。当HA酸性较强时，反应不能定量完成，根据化学反应平衡的原理，必须采取措施，除去或降低滴定反应产生的HA的酸性，使反应顺利地完成。因此，必须根据不同情况采用相应的测定条件。2，一般方法取经适当方法干燥的供试品适量（其量一般以消耗标准液约8ml为度），加冰醋酸10ml~30ml（必要时可温热使溶解，放冷）。若供试品为氢卤酸盐，应再加5%醋酸汞的冰醋酸溶液3ml~5ml，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定至终点，并将滴定结果用空白试验校正。3.问题讨论（1）适用范围本法主要用于Kb<10-8的有机碱盐，如有机酸盐、氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐、硝酸盐及有机酸碱金属盐类的含量测定。（2）酸根的影响本类药物盐中被置换出的无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：高氯酸>氢溴酸>硫酸>盐酸>硝酸若在滴定过程中被置换出的HA，其酸性较强，则反应将不能进行到底，如测定杂环类药物氢卤酸盐时，由于被置换出的氢卤酸的酸性相当强，影响滴定终点，不能直接滴定，需要进行处理。一般处理方法是加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其生成在醋酸中难解离的卤化汞，以消除氢卤酸对滴定的干扰与不良影响：2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX25
5 ② 酸性溶剂：冰醋酸 ③ 碱性溶剂：DMF ④ 两性溶剂：甲醇 • 非水溶液滴定法－弱碱性 以冰醋酸为溶剂 醋酸汞消除氢卤酸的干扰 指示剂（终点颜色应以电位滴定时的突跃点为准，并将滴定结果用空白试验校正 ） 若碱性较弱则加醋酐使突跃明显 1.基本原理： BH+ ·A - + HClO4 → BH+ ·ClO4 - + HA 式中 BH+·A-表示游离碱类盐；HA 表示被置换出的弱酸。由于被置换出的 HA 的酸 性强弱不同，因而对滴定反应的影响也不同。当 HA 酸性较强时，反应不能定量完 成，根据化学反应平衡的原理，必须采取措施，除去或降低滴定反应产生的 HA 的 酸性，使反应顺利地完成。因此，必须根据不同情况采用相应的测定条件。 2．一般方法 取经适当方法干燥的供试品适量（其量一般以消耗标准液约 8ml 为度），加冰 醋酸 10ml~30ml（必要时可温热使溶解，放冷）。若供试品为氢卤酸盐，应再加 5% 醋酸汞的冰醋酸溶液 3ml~5ml，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至终点，并将滴 定结果用空白试验校正。 3．问题讨论 （1）适用范围 本法主要用于 Kb＜10-8 的有机碱盐，如有机酸盐、氢卤酸盐、磷 酸盐、硫酸盐、硝酸盐及有机酸碱金属盐类的含量测定。 （2）酸根的影响 本类药物盐中被置换出的无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下 列排序递减：高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸 若在滴定过程中被置换出的 HA，其酸性较强，则反应将不能进行到底，如 测定杂环类药物氢卤酸盐时，由于被置换出的氢卤酸的酸性相当强，影响滴定 终点，不能直接滴定，需要进行处理。一般处理方法是加入定量的醋酸汞冰醋 酸溶液，使其生成在醋酸中难解离的卤化汞，以消除氢卤酸对滴定的干扰与不 良影响：2B·HX + Hg(Ac)2 → 2B·HAc + HgX2