讲稿课程名称：药物分析课程编号：H17035授课学期：第六学期11级药学、制剂授课班级：霍文任课教师：河北联合大学药学院1
1 讲 稿 课程名称： 药物分析 课程编号： H17035 授课学期： 第六学期 授课班级： 11 级药学、制剂 任课教师： 霍文 河北联合大学 药学院
首页课程名称：《药物分析》第6周，第讲次摘要第四章药物的定量分析和分析方法验证第一节、定量分析方法的特点授课题目（章、节）第二节定量分析样品的前处理方法第三节药品分析方法的验证【目的要求】通过本讲课程的学习，掌握容量，光谱和色谱分析法，滴定度与含量计算系统适用性试验内容与要求，样品分析的前处理方法；熟悉分析方法的验证内容，不同前处理方法的适用范围，不同方法对验证内容的要求。【难点】各种分析方法含量计算。【重点】各种分析方法含量计算，分析方法的验证内容。内容【本讲课程的引入】可供药物定量分析的方法主要有容量分析法，光谱分析法和色谱分析法，我们将围绕教学目的分别讲解学习。板书“药物的定量分析和分析方法验证”。写出章节的题目，参照讲稿列出标题：根据需要在每个标题下适当写出需解释的内容或强调重点、难点等。【本讲课程的内容】第一节定量分析方法特点（一）容量分析法1．容量法的特点简便、快速、比较准确，所用仪器普通易得，在药品检验中具有很大的使用价值。也称滴定法：将已知浓度滴定液滴加至，被测药物溶液中，至滴定终点，根据滴定液的浓度，体积和滴定度，计算含量。2.容量分析的计算问题（1）滴定度（T）的计算：在容量分析中，被测物质（B）与标准溶液（A）之间都按一定的摩尔比进行反应的，反应可表示为：aA+bBcC+dDT=Mx b× B(mg/ml)（2）百分含量的计算①直接滴定法：含量%=VXT/WX100%②间接滴定法：含量%=（V一VB）XTXF/WX100%2
2 首页 课 程 名 称 ：《 药 物 分 析 》 第 6 周，第 讲 次 摘 要 授课题目（章、节） 第四章 药物的定量分析和分析方法验证 第一节、定量分析方法的特点 第二节 定量分析样品的前处理方法 第三节 药品分析方法的验证 【目的要求】通过本讲课程的学习，掌握容量,光谱和色谱分析法， 滴定度与含量计算 系统适用性试验内容与要求 ， 样品分析的前处理方法；熟悉分析方法的验证内容，不同前处 理方法的适用范围，不同方法对验证内容的要求。 【难 点】各种分析方法含量计算。 【重 点】各种分析方法含量计算，分析方法的验证内容。 内 容 【本讲课程的引入】可供药物定量分析的方法主要有容量分析法,光谱分析法和色谱分析 法，我们将围绕教学目的分别讲解学习。 板书“药物的定量分析和分析方法验证”。写出章节的题目，参照讲稿列出标题；根 据需要在每个标题下适当写出需解释的内容或强调重点、难点等。 【本讲课程的内容】 第一节 定量分析方法特点 （一） 容量分析法 1．容量法的特点 简便、快速、比较准确，所用仪器普通易得，在药品检验中具有 很大的使用价值。也称滴定法: 将已知浓度滴定液滴加至，被测药物溶液中,至滴定终点, 根据滴定液的浓度,体积和滴定度,计算含量。 2．容量分析的计算问题 （1）滴定度（T）的计算：在容量分析中，被测物质（B）与标准溶液（A）之间都 按一定的摩尔比进行反应的，反应可表示为： aA + bB cC + dD T = M b a B(mg/ml) （2）百分含量的计算 ①直接滴定法：含量% = V×T/W×100% ②间接滴定法：含量% =（V — VB）×T×F/W×100%
（二）光谱法1.紫外-可见分光光度法（计算公式详见书149-150页）氟康唑片溶出度检查：取本品（规格：100mg)，盐酸溶液(9→1000)1000ml为溶出介质，经45分钟时，取溶液滤过；取续滤液，在261nmm波长处测定吸光度；另取氟康唑对照品适量，精密称定，加溶出介质溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，同法测定，计算每片的溶出量标示量(%)=4*XD×100%AR ×B2.荧光分析法（计算公式详见书151页）物质受UV或Vis照射激发后能发射出比激发光波长长的荧光；激发光停止照射，荧光随之消失；激发和发射光谱用于定性，荧光强度用于定量（三）色谱法1.HPLC法（计算公式详见书）不得改变：固定相种类,流动相组分，检测器类型可以改变：色谱柱内径，长度，载体粒度，流动相流速，混合流动相各组分的比例柱温；进样量；检测器的灵敏度仪器(RP-HPLC)(1）色谱柱：ODS最常用；粒径一般在3-10μum；温度+40℃(2)检测器:UV(DAD,PDA);Fluor,ELSD,RID,ECD,MS(3）流动相：首选甲醇-水(末端波长检测：乙腈-水)，有机相木5%;pH2-8系统适用性试验(1)色谱柱的理论板数(n)(2)色谱峰的分离度(R)(3）色谱系统的重复性(RSD%)(4)色谱峰的拖尾因子(T)测定法(1)内标法(2)外标法2.GC法（计算公式详见书）色谱柱：常用毛细管柱一一熔融石英或玻璃内径一般为0.25mm,0.32mm或0.53mm；柱长5~60m，内壁或载体经交联或3
3 （二）光谱法 1．紫外-可见分光光度法（计算公式详见书 149-150 页） 氟康唑片溶出度检查: 取本品(规格:100mg), 盐酸溶液(9→1000)1000ml 为溶出介 质, 经 45 分钟时, 取溶液滤过; 取续滤液, 在 261nmm 波长处测定吸光度; 另取氟康唑对 照品适量, 精密称定, 加溶出介质溶解并定量稀释制成每 1ml 中约含 0.1mg 的溶液, 同法 测定, 计算每片的溶出量 2．荧光分析法（计算公式详见书 151 页）物质受 UV 或 Vis 照射激发后能发射出比 激发光波长长的荧光; 激发光停止照射, 荧光随之消失; 激发和发射光谱用于定性, 荧光 强度用于定量 （三）色谱法 1． HPLC 法（计算公式详见书）不得改变：固定相种类,流动相组分,检测器类型 可以改变：色谱柱内径, 长度, 载体粒度，流动相流速, 混合流动相各组分的比例 柱温; 进样量; 检测器的灵敏度 仪器(RP-HPLC) (1) 色谱柱: ODS 最常用; 粒径一般在 3-10m; 温度≯40℃ (2) 检测器: UV(DAD,PDA); Fluor, ELSD, RID, ECD, MS (3) 流动相: 首选甲醇-水(末端波长检测:乙腈-水), 有机相≮5%; pH2-8 系统适用性试验 (1) 色谱柱的理论板数(n) (2) 色谱峰的分离度(R) (3) 色谱系统的重复性(RSD%) (4) 色谱峰的拖尾因子(T) 测定法 (1) 内标法 (2) 外标法 2． GC 法（计算公式详见书） 色谱柱：常用毛细管柱——熔融石英或玻璃 内径一般为 0.25mm,0.32mm 或 0.53mm; 柱长 5~60m，内壁或载体经交联或 (%) 100% R X R = A B A c D 标示量
涂渍固定液，固定液膜厚0.1~5.0μm固定液：甲基聚硅氧烷，苯基甲基聚硅氧烷，聚乙二醇第二节定量分析样品的前处理方法（一）不经有机破坏的分析方法2.经水解后测定（1）直接回流后测定法：例如三氯叔丁醇的含量测定（银量法）。（2）硫酸水解后测定法：例如硬质酸镁的含量测定（中和法）。3.经氧化还原后测定法（1）碱性还原后测定法：例如泛影酸的含量测定（银量法）。（2）酸性还原后测定法：例如碘番酸的含量测定（银量法）。（3）利用药物中可游离的金属离子的氧化性进行含量测定：例如含和含铁的药物，在酸性溶液中可游离出具有氧化性的Sb5+、Fe3+去氧化碘化钾，析出的碘可用硫代硫酸钠滴定（间接碘量法）。（二）经有机破坏的分析方法1.湿法破坏（1）HNO3-HCIO4法：本法破坏能力强，反应比较激烈。（2）HNO3-H2SO4法：本法是用于大多数有机物质的破坏。（3）硫酸-硫酸盐法：本法常用于含砷药物的破坏。（4）其它湿法：硝酸-硫酸-高氯酸法；硫酸-过氧化氢法；硫酸-高锰酸钾法。2.干法破坏（1）钠熔法：加无水碳酸钠高温炽灼，进行有机破坏。本法适用于湿法不易破坏完全的有机药物。（2）氧瓶燃烧法：本法是将有机药物放在纯氧中燃烧，是一种破坏最完全的方法，适用于有机卤素药物的有机破坏。含待测元素的有机药物在充满氧气的燃烧瓶中充分燃烧，有机结构：彻底分解为CO2和H2O待测元素：转化为不同价态的氧化物（或无氧酸)被吸收于适当的吸收液中（多以酸根离子形式存在)(1）仪器装置：铂丝：1mm;2/3，瓶：硬质玻璃(石英玻璃）10-20mg-500ml，200mg-1000-2000ml4
4 涂渍固定液; 固定液膜厚 0.1~5.0m 固定液: 甲基聚硅氧烷, 苯基甲基聚硅氧烷, 聚乙二醇 第二节 定量分析样品的前处理方法 （一）不经有机破坏的分析方法 2．经水解后测定 （1）直接回流后测定法：例如三氯叔丁醇的含量测定（银量法）。 （2）硫酸水解后测定法：例如硬质酸镁的含量测定（中和法）。 3．经氧化还原后测定法 （1）碱性还原后测定法：例如泛影酸的含量测定（银量法）。 （2）酸性还原后测定法：例如碘番酸的含量测定（银量法）。 （3）利用药物中可游离的金属离子的氧化性进行含量测定：例如含锑和含铁的药物， 在酸性溶液中可游离出具有氧化性的 Sb5+、Fe3+去氧化碘化钾，析出的碘可用硫代硫酸钠 滴定（间接碘量法）。 （二）经有机破坏的分析方法 1．湿法破坏 （1）HNO3-HClO4 法：本法破坏能力强，反应比较激烈。 （2）HNO3-H2SO4 法：本法是用于大多数有机物质的破坏。 （3）硫酸-硫酸盐法：本法常用于含砷药物的破坏。 （4）其它湿法：硝酸-硫酸-高氯酸法；硫酸-过氧化氢法；硫酸-高锰酸钾法。 2．干法破坏 （1）钠熔法：加无水碳酸钠高温炽灼，进行有机破坏。本法适用于湿法不易破坏完 全的有机药物。 （2）氧瓶燃烧法：本法是将有机药物放在纯氧中燃烧，是一种破坏最完全的方法， 适用于有机卤素药物的有机破坏。含待测元素的有机药物在充满氧气的燃烧瓶中充分燃 烧，有机结构: 彻底分解为 CO2 和 H2O 待测元素: 转化为不同价态的氧化物(或无氧酸)被吸收于适当的吸收液中(多以酸根 离子形式存在) (1) 仪器装置：铂丝: 1mm; 2/3，瓶: 硬质玻璃(石英玻璃) 10-20mg——500ml，200mg——1000-2000ml
燃烧产物与吸收液水氟HF:氯—HCI:水-氢氧化钠溴——Br2+HBr水-氢氧化钠-二氧化硫碘—12(+HIO)：水-氢氧化钠(二氧化硫）硫——SO3(+SO2)水-过氧化氢磷——P2Os-H4P2O7,(HPO3)n：水-硝酸(煮沸)第三节药品质量标准分析方法验证（一）准确度（accuracy）准确度系指用该法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率来表示1.含量测定方法的准确度2.杂质定量测定的准确度（二）精密度（precision）精密度系指在规定的条件下，同一均匀样品，经过多次取样测定所得结果之间的接近程度。1.精密度表示方法（1）标准差（Standarddeviation，SD）（2）相对标准差（relativestandarddeviation，RSD）容量法RSD<0.2%（n=5)；2.重复性、中间精密度及重现性（1）重复性：在相同条件下，有一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性。（2）中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果的精密度，称为中间精密度。（三）重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果的精密度，称为重现性。（三）专属性在其他成分（杂质，降解产物，辅料等）可能存在下，方法能正确测定出被测物的特性。1.鉴别反应应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别，不含被分析的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物，均应呈负反应。2.含量测定和杂质测定色谱法和其他方法，应附代表性图谱，亦说明专属性。图5
5 燃烧产物与吸收液 氟——HF: 水 氯——HCl: 水-氢氧化钠 溴——Br2+HBr: 水-氢氧化钠-二氧化硫 碘——I2(+HIO): 水-氢氧化钠(二氧化硫) 硫——SO3(+SO2): 水-过氧化氢 磷——P2O5→H4P2O7,(HPO3)n: 水-硝酸(煮沸) 第三节 药品质量标准分析方法验证 （一）准确度 (accuracy) 准确度系指用该法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率来表示 1．含量测定方法的准确度 2．杂质定量测定的准确度 （二）精密度 (precision) 精密度系指在规定的条件下，同一均匀样品，经过多次取样测定所得结果之间的接 近程度。 1．精密度表示方法 （1）标准差（Standard deviation，SD） （2）相对标准差（relative standard deviation，RSD） 容量法 RSD＜0.2%(n=5)； 2．重复性、中间精密度及重现性 （1）重复性：在相同条件下，有一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性。 （2）中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果 的精密度，称为中间精密度。 （三） 重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果的精密度，称为重现性。 （三）专属性在其他成分(杂质,降解产物,辅料等)可能存在下,方法能正确测定出被测物的 特性。 1．鉴别反应 应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别，不含被分析的样品， 以及结构相似或组分中的有关化合物，均应呈负反应。 2．含量测定和杂质测定 色谱法和其他方法，应附代表性图谱，亦说明专属性。图