讲禾稿课程名称：药物分析课程编号：y230508授课学期：第六学期授课班级：10级药学任课教师：一张志斐河北联合大学药学院1
1 讲 稿 课程名称： 药物分析 课程编号： y230508 授课学期： 第六学期 授课班级： 10 级药学 任课教师： 张志斐 河北联合大学 药学院
首页课程名称：《药物分析》第3周，第5讲次摘要第二章至药物的鉴别试验第一节、鉴别试验的内涵第二节、鉴别试验的项目授课题目（章、节）第三节、鉴别试验的方法第四节、鉴别试验的条件【目的要求】通过本讲课程，学习药物的鉴别试验。【重点】鉴别试验的项目和方法。【难点】鉴别试验的方法。内容【本讲课程的引入】药品检验工作的主要内容是什么？板书“鉴别”。【本讲课程的内容】第一节、鉴别试验的内涵1.目的：根据药物的分子结构特征，采用物理、化学、或生物学方法，判断（鉴别)药物真伪。2.适用性：仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，并非对未知物化学结构的确证鉴定。3.要求：方法专属，每个品种一般2～3项不同类型的鉴别试验第二节、鉴别试验的项目一、性状和物理常数1.性状（呈现状态)：反映了药物特有的物理性质2.外观：指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等3.溶解度：不同溶剂中的溶解特性：一定程度上反映了药品的纯度。4.物理常数：内在物理特征：既可鉴别，也可反映纯净的程度。（1）熔点及其测定法：1）熔点：固体熔化成液体的温度；熔融同时分解的温度；自初熔至全熔的一段温度2）测定法：第一法：测定易粉碎的固体药品（一端熔封）第二法：测定不易粉碎的固体药品（如脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等）（两端开口，吸入熔融样品，冷冻凝固测定）第三法：测定凡士林或其他类似物质（2）比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光2
2 首页 课程名称：《药物分析》 第 3 周，第 5 讲次 摘 要 授课题目（章、节） 第二章 药物的鉴别试验 第一节、鉴别试验的内涵 第二节、鉴别试验的项目 第三节、鉴别试验的方法 第四节、鉴别试验的条件 【目的要求】通过本讲课程,学习药物的鉴别试验 。 【重 点】鉴别试验的项目和方法。 【难 点】鉴别试验的方法。 内 容 【本讲课程的引入】药品检验工作的主要内容是什么？ 板书“鉴别”。 【本讲课程的内容】 第一节、鉴别试验的内涵 1.目的：根据药物的分子结构特征，采用物理、化学、或生物学方法，判断(鉴别) 药物真伪。 2.适用性：仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物， 并非对未知物化学结构的确证鉴定。 3.要求：方法专属，每个品种一般 2～3 项不同类型的鉴别试验 第二节、鉴别试验的项目 一、性状和物理常数 1. 性状(呈现状态)：反映了药物特有的物理性质 2. 外观：指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等 3.溶解度：不同溶剂中的溶解特性；一定程度上反映了药品的纯度。 4.物理常数：内在物理特征；既可鉴别，也可反映纯净的程度。 （1）熔点及其测定法： 1）熔点：固体熔化成液体的温度 ； 熔融同时分解的温度； 自初熔至全熔的一段温度 2）测定法：第一法：测定易粉碎的固体药品(一端熔封 ) 第二法：测定不易粉碎的固体药品(如脂肪、脂肪酸、石蜡、 羊毛脂等) (两端开口，吸入熔融样品，冷冻凝固测定) 第三法：测定凡士林或其他类似物质 （2）比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长 1dm 且每 1ml 中含有旋光
性物质1g的溶液时测得的旋光度应用：鉴别药物、检查纯度、含量测定（制剂）（3）吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。二、一般鉴别试验1.依据同类药物的结构、性质进行的真伪鉴别。（1）无机药物：其阴、阳离子的特殊反应；（2）有机药物：共有母核、官能团特征反应。2.特点：确定（区分）类别，不能够确定个别品种。3.常见一般鉴别试验：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、有机酸盐、无机金属盐类、无机酸盐、etc（1）水杨酸盐：1）鉴别方法一：取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。反应原理：本品在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液生成配位化合物，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。2）鉴别方法二：取供试品溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀：分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解（2）有机氟化物：鉴别方法：取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用水20ml与0.01mo1/L氢氧化钠溶液6.5ml为吸收液，侯燃烧完全后，充分振摇，取吸收液2ml，加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀释至4ml，加硝酸亚铺试液0.5ml，即显蓝紫色，同时做空白对照试验。三、专属鉴别试验依据：特定药物分子中的特殊性质、特征基团或官能团的专属反应或测定进行的真伪鉴别。第三节、鉴别试验方法一、药物的鉴别方法要求：1.专属性强，耐用性好，灵敏度高，操作简便、快速2.常用方法：化学法，光谱法，色谱法和生物学法。3.中药材鉴别方法：还有显微鉴别法和特征图谱或指纹图谱鉴别法。4.制剂的鉴别：尽可能与原料药相同；必须：排除辅料干扰：5.多组分或微量成分，须用更灵敏、专属的方法。6.特殊性质：采用特定方法。如手性、晶型等。二、方法分类1．化学鉴别法：特指其保持理化性质和生物学特性不变的能力（1）呈色反应鉴别法：指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物1）三氯化铁呈色反应：用于酚羟基或水解后产生酚羟基2）异羟酸铁反应：多用于芳酸及其酯类、酰胺类3）三酮呈色反应：用于AA和结构中含有氨基糖单元的药物4）重氮化-偶合显色反应：用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基5）氧化还原显色反应及其它颜色反应：多巴胺等酚性药物与三氯化铁试液呈色，加碱溶液后的变色反应3
3 性物质 1g 的溶液时测得的旋光度 应用：鉴别药物、检查纯度 、含量测定(制剂) （3）吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、 单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。 二、一般鉴别试验 1.依据同类药物的结构、性质进行的真伪鉴别。 （1）无机药物：其 阴、阳离子的特殊反应; (2) 有机药物：共有母核、官能团特征反应。 2.特点：确定(区分)类别，不能够确定个别品种。 3.常见一般鉴别试验：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、 有机酸盐、无机金属盐类、无机酸盐、etc （1）水杨酸盐： 1）鉴别方法一：取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液 1 滴，即显紫色。 反应原理：本品在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液生成配位化 合物，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。 2）鉴别方法二：取供试品溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀；分 离，沉淀在醋酸铵试液中溶解 （2）有机氟化物： 鉴别方法：取供试品约 7mg，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用水 20ml 与 0.01mol/L 氢氧化钠溶液 6.5ml 为吸收液，俟燃烧完全后，充分振摇，取吸收液 2ml， 加茜素氟蓝试液 0.5ml，再加 12%醋酸钠的稀醋酸溶液 0.2ml，用水稀释至 4ml，加硝 酸亚铈试液 0.5ml，即显蓝紫色，同时做空白对照试验。 三、专属鉴别试验 依据：特定药物分子中的特殊性质、特征基团或官能团的专属反应或测定进行的 真伪鉴别。 第三节、鉴别试验方法 一、药物的鉴别方法要求： 1.专属性强，耐用性好，灵敏度高，操作简便、快速 2.常用方法：化学法，光谱法，色谱法和生物学法。 3.中药材鉴别方法：还有显微鉴别法和特征图谱或指纹图谱鉴别法。 4.制剂的鉴别：尽可能与原料药相同；必须：排除辅料干扰； 5.多组分或微量成分，须用更灵敏、专属的方法。 6.特殊性质：采用特定方法。如手性、晶型等。 二、方法分类 1．化学鉴别法：特指其保持理化性质和生物学特性不变的能力 （1）呈色反应鉴别法 ：指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进 行反应，生成易于观测的有色产物 1）三氯化铁呈色反应：用于酚羟基或水解后产生酚羟基 2）异羟肟酸铁反应：多用于芳酸及其酯类、酰胺类 3）茚三酮呈色反应：用于 AA 和 结构中含有氨基糖单元的药物 4）重氮化-偶合显色反应：用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基 5）氧化还原显色反应及其它颜色反应：多巴胺等酚性药物与三氯化铁试液 呈色，加碱溶液后的变色反应
（2）沉淀生成反应鉴别法：1）与重金属离子的沉淀反应2）与生物碱沉淀剂的反应（3）荧光反应鉴别法：1）药物本身可在可见光下发射荧光；2）药物溶液加硫酸后，在可见光下发射荧光；3）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；4）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。（4）气体生成反应鉴别法：1）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气。2）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体。3）含碘有机药物，经直火加热，可生成紫色碘蒸气：含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。2.光谱鉴别法（1）紫外光谱鉴别法：1）规定：最大/最小吸收波长：2）规定：一定浓度供试液，最大吸收波长和吸收度：3）规定：吸收波长和吸收系数法；4）规定：几个吸收波长，和吸收度比值：5）规定：经化学处理后产物的光谱特性。（2）红外光谱鉴别法：供试品与对照品（或红外标准图谱）的一致性，指纹特性（3）其他光谱法：NIRNMRMSAASx-rayetc3.色谱鉴别法(1) TLC:1）相同浓度的供试品与对照品比较，主斑点：应一致：2）供试品溶液与对照品溶液等体积混合，供试品与混合液主斑点：应一致3）结构相似的其它药物与供试品溶液的主斑点比较：应区分4）3)项下两种溶液等体积混合，应显示两个清晰分离的斑点：应区分（2）HPLC法鉴别：（3）GC鉴别：4.显微鉴别法5.生物方法6.中药的指纹图谱/特征图谱鉴别法第四节、鉴别试验的条件一、溶液的浓度二、溶液的温度三、溶液的酸碱度四、试验时间五、方法验证：灵敏、专属、耐用1、反应灵敏度和空白试验最低检出量（minimumdetectablequantity）最低检出浓度（minimumdetectableconcentration）4
4 （2）沉淀生成反应鉴别法 ： 1） 与重金属离子的沉淀反应 2） 与生物碱沉淀剂的反应 （3）荧光反应鉴别法： 1）药物本身可在可见光下发射荧光； 2）药物溶液加硫酸后，在可见光下发射荧光； 3）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光； 4）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。 （4）气体生成反应鉴别法： 1）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及 某些酰胺类药物，可经强碱 处理后，加热，产生氨（胺）气。 2）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体。 3）含碘有机药物，经直火加热，可生成紫色碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药 物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。 2.光谱鉴别法 （1）紫外光谱鉴别法 ： 1）规定：最大/最小吸收波长； 2）规定：一定浓度供试液，最大吸收波长和吸收度； 3）规定：吸收波长和吸收系数法； 4）规定：几个吸收波长，和吸收度比值； 5）规定：经化学处理后产物的光谱特性。 （2）红外光谱鉴别法： 供试品与对照品(或红外标准图谱)的一致性，指纹特性 （3）其他光谱法：NIR NMR MS AAS x-ray etc 3.色谱鉴别法 （1）TLC： 1）相同浓度的供试品与对照品比较，主斑点：应一致； 2）供试品溶液与对照品溶液等体积混合，供试品与混合液主斑点：应一致 3）结构相似的其它药物与供试品溶液的主斑点比较：应区分 4) 3)项下两种溶液等体积混合，应显示两个清晰分离的斑点 ：应区分 （2）HPLC 法鉴别： （3）GC 鉴别： 4.显微鉴别法 5.生物方法 6.中药的指纹图谱/特征图谱鉴别法 第四节、鉴别试验的条件 一、溶液的浓度 二、溶液的温度 三、溶液的酸碱度 四、试验时间 五、方法验证：灵敏、专属、耐用 1、反应灵敏度和空白试验 最低检出量（minimum detectable quantity） 最低检出浓度（minimum detectable concentration）
空白试验（blanktest）：在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。2.提高反应灵敏度的方法（1）加入与水互不相溶的有机溶剂提取浓集（2）改进观测方法【本讲课程的小结】今天我们主要讲了药物的鉴别试验。希望同学们重点学习鉴别试验的项目和方法。【本讲课程的作业】1.药物的鉴别试验的方法都有哪些？2.简述紫外光谱法如何用于药物的鉴别？3.简述高效液相色谱法如何用于药物的鉴别？5
5 空白试验（blank test）：在与供试品鉴别 试验完全相同的条件下，除不 加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。 2.提高反应灵敏度的方法 （1）加入与水互不相溶的有机溶剂提取浓集 （2）改进观测方法 【本讲课程的小结】今天我们主要讲了药物的鉴别试验。希望同学们重点学 习鉴别试验的项目和方法。 【本讲课程的作业】 1.药物的鉴别试验的方法都有哪些？ 2.简述紫外光谱法如何用于药物的鉴别？ 3.简述高效液相色谱法如何用于药物的鉴别？