说明K和B菌株中存在一种限制系统，可排除外来的DNA;当用入首 先浸染K菌株后释放的子代噬菌体，其DNA得到了K菌株修饰系统的 修饰，因此子代噬菌体在再次浸染K菌株时就会被误认为K本身的 DNA而不遭受限制系统限制，故保持100%的浸染率。而浸染B菌株 时，受到B限制系统的限制；04的存活率是由宿主限制系统未发挥 作用时，修饰系统作用的结果
说明K和B菌株中存在一种限制系统，可排除外来的DNA；当用首 先浸染K菌株后释放的子代噬菌体，其DNA得到了K菌株修饰系统的 修饰，因此子代噬菌体在再次浸染K菌株时就会被误认为K本身的 DNA而不遭受限制系统限制，故保持100%的浸染率。而浸染B菌株 时，受到B限制系统的限制；10-4的存活率是由宿主限制系统未发挥 作用时，修饰系统作用的结果
限制-修饰的酶学假说 入(B B 酶切位点 © 噬菌体DNA 不被修饰 ©© 被切割 K菌株 酶切位点 基因组DNA 被修饰 不被切割 Methy lation ● B菌株
限制-修饰的酶学假说 酶切位点 不被修饰 噬菌体DNA 被切割 酶切位点 被修饰 Methylation 基因组DNA 不被切割 B菌株 K菌株
2.限制酶的发现 60年代，限制内切酶和限制酶切的概念 1968年首次从E.co1iK中分离限制性内切酶，但该酶的理 化特性非常复杂，未产生应用； 1970年美国约翰·霍布金斯大学H.Smith在研究流感嗜 血杆菌(Haemophilus influenzae)发现了Hindll酶，引 发了对限制酶应用的研究
60年代，限制内切酶和限制酶切的概念 1968年 首次从E.coli K中分离限制性内切酶，但该酶的理 化特性非常复杂，未产生应用； 1970年 美国约翰·霍布金斯大学 H. Smith在研究流感嗜 血杆菌（Haemophilus influenzae）发现了HindII酶，引 发了对限制酶应用的研究。 2. 限制酶的发现
2006 Restriction Enzymes 3773 Type I 68 Type Il 3692 Type III 10 Methyl-Directed 3
Type I 68 Type II 3692 Type III 10 Methyl-Directed 3 2006 Restriction Enzymes 3773
限制性核酸内切酶的概念 限制性核酸内切酶(Restriction endonucleases):一类能 够识别双链DNA分子中某种特定的核苷酸序列，并能精确特 异地切割双链DNA分子的核酸内切酶。 Eco82 I Mnl I BstF5 I EcoR I Hin8 ll CViA lI Mnl I Bst295 I Hsp92 Il Bst29 I Dde I Nla III Bst295 I HinGU I Fokl Bsu36 I Bcc I Sts I Dde I ATTCCTACCCGTACCCTCCCCCACCCCAAAGTTGGACTCCTAAAAA
限制性核酸内切酶的概念 限制性核酸内切酶（ Restriction endonucleases）：一类能 够识别双链DNA分子中某种特定的核苷酸序列，并能精确特 异地切割双链DNA分子的核酸内切酶