第五节重组DNA分子导入大肠杆葡得 DNA分子只有存在话细胞中，生命的特征才展示 大肠杆菌是目前最成熟的受体条统。 >从遗传学的角度来说，遗传物质的转移有转化、转 导、转染和接合等主要的方式 >DNA转入大肠杆菌主要是通过转化来完成。 >噬菌体感染宿主细胞时涉及转导和转染的过程
第五节 重组DNA分子导入大肠杆菌 DNA分子只有存在活细胞中，生命的特征才展示 大肠杆菌是目前最成熟的受体系统。 ➢从遗传学的角度来说，遗传物质的转移有转化、转 导、转染和接合等主要的方式。 ➢ＤＮＡ转入大肠杆菌主要是通过转化来完成。 ➢噬菌体感染宿主细胞时涉及转导和转染的过程
转化(transformation): 和 ■一种细菌菌株由于捕获了外源DNA导致性状特征 发生遗传改变的生命过程。 转化在细菌中是一种善遍的现象。 ■细菌能够从周圆环境中吸收DNA分子进行转化的生理状态 ■供体DNA与受体细胞特异结合位点结合，达到饱和时开始 摄取外源DNA只有一条DNA单链进入细胞（单链摄入），另一 条链在膜上降解。 ■单链的转化DNA与受体DNA对应位点的置换，从而稳定地 掾入到受体DNA中的过程
转化(transformation): ◼一种细菌菌株由于捕获了外源DNA导致性状特征 发生遗传改变的生命过程。 转化在细菌中是一种普遍的现象。 ◼细菌能够从周围环境中吸收DNA分子进行转化的生理状态 ◼供体DNA与受体细胞特异结合位点结合，达到饱和时开始 摄取外源DNA只有一条DNA单链进入细胞(单链摄入)，另一 条链在膜上降解。 ◼单链的转化DNA与受体DNA对应位点的置换，从而稳定地 掺入到受体DNA中的过程
供体DNA 重组 受体灌 转化体 (6】 Throm 侵人 DNA的级入 分支迁移 修整 连接 错误任复 细菌转化过程图解 (a)供体DNA双链吸附，单链吸入并整合到受体，然后插入： (b)单链供体DNA整合的假说机制
■受体细胞(receptor cell) 又称为宿主细胞或寄主细胞host ce)等，从实脸技术上讲是能摄取外源 DNA并使其稳定维持的细胞；从实验目的上讲是有应用价值和理论研究 价值的细胞。 ●感受态(competence) 细胞处于能够吸收DNA的状态，称为感受态。 ●感受态细胞(competence cell) 处于能够吸收DNA状态的细胞，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外 源DNA的载体分子通过。 ■转化子(transformant):经转化获得外源遗传物质的细胞
▪ 受体细胞(receptor cell) 又称为宿主细胞或寄主细胞(host cell)等，从实验技术上讲是能摄取外源 DNA并使其稳定维持的细胞;从实验目的上讲是有应用价值和理论研究 价值的细胞。 ● 感受态(competence) 细胞处于能够吸收DNA的状态，称为感受态。 ● 感受态细胞(competence cell) 处于能够吸收DNA状态的细胞，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外 源DNA的载体分子通过。 ▪ 转化子(transformant)：经转化获得外源遗传物质的细胞
感受态的建立 >感受态主要受一类蛋白质（感受态因子）影响，感受 态因子可以在细菌间进行转移，从感受态细菌中传 递到非感受态细菌中，可以使后者变为感受态。 >一般认为感受态出现在细菌对数生长后期，并且某 些处理过程可以诱导或加强感受态，以大肠杆菌为 例，用Ca2+(如CaCl2)处理对数生长后期的大肠杆菌 可以增强其感受能力。 >肺炎双球菌中存在感受态因子、而在大肠杆菌中目 前还未发现明确的遗传因子，但用物理和化学的方 法处理能增强其感受能力
感受态的建立 ➢ 感受态主要受一类蛋白质(感受态因子)影响，感受 态因子可以在细菌间进行转移，从感受态细菌中传 递到非感受态细菌中，可以使后者变为感受态。 ➢ 一般认为感受态出现在细菌对数生长后期，并且某 些处理过程可以诱导或加强感受态，以大肠杆菌为 例，用Ca2+ (如CaCl2 )处理对数生长后期的大肠杆菌 可以增强其感受能力。 ➢ 肺炎双球菌中存在感受态因子、而在大肠杆菌中目 前还未发现明确的遗传因子，但用物理和化学的方 法处理能增强其感受能力