第三章」 分子克隆载体 引言(introduction) 第一节质粒载体 (plasimid vectors） 第二节噬菌体载体(phage vectors). 园 第三节单链丝状噬菌体载体 函 2
2 第三章 分子克隆载体 引 言（introduction） 第一节 质粒载体（plasimid vectors） 第二节 λ噬菌体载体（phage vectors） 第三节 单链丝状噬菌体载体
第二节入phage vectors 噬菌体是一类细菌病毒 (Bacteriophage) 结构： 蛋白质外壳内包裹 着DNA（双链、单 链、线性、环状 等) 6 3
3 第二节 phage vectors 噬菌体是一类细菌病毒（Bacteriophage）。 结构： 蛋白质外壳内包裹 着DNA（双链、单 链、线性、环状 等）
一、入噬菌体的分子生物学 1.入DNA分子的特点 (1) 长度为48502bp; (2) 双链线性DNA; (3) 但在两端有cos位点，可以环化。 c0s位点 (cohensive-end site) 超 入DNA两端各有12bp的粘性末端，粘性末 端形成的双链区域称为cos位点。 4
4 一、噬菌体的分子生物学 （1）长度为48502 bp； （2）双链线性DNA； （3）但在两端有cos位点，可以环化。 DNA两端各有12bp的粘性末端，粘性末 端形成的双链区域称为cos位点。 1. DNA分子的特点 cos位点（cohensive-end site）：
A map of phage入，showing the major genes. Regulator of入 cl,and int gene expression Regulator of cl gene Phage DNA Regulator replication of early genes 入repressor proteins cro Stabilizer cⅡ of cll protein Regulator Phage of late genes recombination PRMPRE Q proteins OL:PL OR PE Origin Lysis Excisionase of replication R proteins (for excision from Early promoters A chromosome】 xis and operators PR Late gene Integrase int Cutting of promoter Nul (for integration DNA at into chromosome cos site for A Terminase packaging -48kb Nu3 Genes for head proteins 7 and assembly 非必需区 F11 Genes for tail proteins and assembly
5 非必需区
(一)λ发育调节 λ噬菌体感染大肠杆菌后呈现两种类型的生长方式，即 溶菌性反应与溶源性反应。 在感染早期，当入噬菌体DNA进入宿主细胞后，其 两端互补单链通过碱基配对形成环状DNA分子，而后 在宿主细胞的DNA连接酶和旋促酶(gyrase)作用 下，形成封闭的环状DNA分子，充当转录的模板。 ·溶原溶菌的选择和分化问题. 6
6 （一）发育调节 ▪ λ噬菌体感染大肠杆菌后呈现两种类型的生长方式，即 溶菌性反应与溶源性反应。 ▪ 在感染早期，当 噬菌体 DNA 进入宿主细胞后，其 两端互补单链通过碱基配对形成环状 DNA 分子，而后 在宿主细胞的 DNA 连接酶和旋促酶（gyrase）作用 下，形成封闭的环状 DNA 分子，充当转录的模板。 ▪ 溶原溶菌的选择和分化问题