2.IFV-FM1的50%鸡胚感染量(EID50)测定 用生理盐水将病毒作10倍系列稀释，分别 接种鸡胚，0.1ml/胚，同时设正常对照， 共6组，每组5胚。35℃孵育72h,置4°℃冰 箱过夜，收集尿囊液做血凝试验，按Reed- Muench法计算FM1的EID5o
2. IFV-FM1的50%鸡胚感染量（EID50）测定 用生理盐水将病毒作10倍系列稀释，分别 接种鸡胚，0.1ml /胚，同时设正常对照， 共6组，每组5胚。35℃孵育72 h，置4℃冰 箱过夜，收集尿囊液做血凝试验，按ReedMuench法计算FM1的EID50
3.药物对鸡胚的毒性作用 选用健康的9~11日龄鸡胚，消毒备用。将 受试药和对照药作10倍系列稀释5~6个浓度， 如100mg/ml、10mg/ml、1mg/ml、 100μg/ml、10μg/ml,每个浓度接种5胚， 0.25ml/胚。35℃培养5d后观察结果（死 亡/存活)。确定两种药物对鸡胚的最大无 毒剂量(TCo),用于正式实验
3. 药物对鸡胚的毒性作用 选用健康的9~11日龄鸡胚，消毒备用。将 受试药和对照药作10倍系列稀释5~6个浓度， 如100mg/ml、10mg/ml、1mg/ml、 100μg/ml、10μg/ml，每个浓度接种5胚， 0.25ml /胚。35℃培养5 d后观察结果（死 亡/存活）。确定两种药物对鸡胚的最大无 毒剂量（TC0），用于正式实验
4.药物对FM1的抑制作用 鸡胚随机分为14组，每组5胚，即试验药 的六个剂量组（从T℃，开始作10倍系列稀 释)、阳性对照药六个剂量组（同前）、 生理盐水和病毒对照组。将不同浓度的药 液注入鸡胚中，0.25ml/胚，30min后经相 同途径注入100EID50病毒0.1ml,对照组以 生理盐水代替。35℃温箱孵育5d。收获尿 囊液，测其血凝效价，以能抑制32倍以上 所注射的最小药物量，即为其最小抑制剂 量(MIC)
4. 药物对FM1的抑制作用 鸡胚随机分为14组，每组5胚，即试验药 的六个剂量组（从TC0开始作10倍系列稀 释）、阳性对照药六个剂量组（同前）、 生理盐水和病毒对照组。将不同浓度的药 液注入鸡胚中，0.25ml /胚，30 min后经相 同途径注入100 EID50病毒0.1ml，对照组以 生理盐水代替。35℃温箱孵育5 d。收获尿 囊液，测其血凝效价，以能抑制32倍以上 所注射的最小药物量，即为其最小抑制剂 量（MIC）
4.1鸡胚接种 (1)孵育9~10d左右的鸡胚，在照蛋灯下用蜡笔 标出气室和胎位。 (2)鸡胚直立于固定架上，气室端向上，按常规以 碘酒，酒精消毒。 (3)用磨蛋器在气室中央磨一小孔，再用碘酒擦拭。 (4)用I注射器吸取病毒悬液，针头从气室小孔 刺入，沿胚胎的长轴刺入0.5~1.0cm深度；此时 针头已在尿囊腔中，注入0.2ml病毒悬液。 (5)拔出针头，用镊子将胶布沾酒精烧灼后将小孔 封闭，置于35~36°℃温箱内培养二天，每天翻动 两次，用照蛋灯检视一次。培养二天后。置- 20°C冰箱2h后，无菌操作收获尿囊液
4.1鸡胚接种 （1）孵育9~10 d左右的鸡胚，在照蛋灯下用蜡笔 标出气室和胎位。 （2）鸡胚直立于固定架上，气室端向上，按常规以 碘酒，酒精消毒。 （3）用磨蛋器在气室中央磨一小孔，再用碘酒擦拭。 （4）用lml注射器吸取病毒悬液，针头从气室小孔 刺入，沿胚胎的长轴刺入0.5~1.0cm深度；此时 针头已在尿囊腔中，注入0.2ml病毒悬液。 （5）拔出针头，用镊子将胶布沾酒精烧灼后将小孔 封闭，置于35~36℃温箱内培养二天，每天翻动 两次，用照蛋灯检视一次。培养二天后。置 - 20℃冰箱2 h后，无菌操作收获尿囊液
4.2尿囊液的收获 (1)从冰箱中取出鸡胚，用碘酒，酒精消毒 气室部位。 (2)用无菌镊子除去胶布并去除气室部分的 卵壳 (3)用无菌的毛细吸管插入尿囊腔中轻轻吸 取尿囊液（避免血管破裂），置于无菌试 管中 (4)获得的尿囊液取一部分做血凝和血凝抑 制试验（定性），判断病毒的增殖情况并 对病毒进行鉴定；同时做无菌实验
4.2尿囊液的收获 （1）从冰箱中取出鸡胚，用碘酒，酒精消毒 气室部位。 （2）用无菌镊子除去胶布并去除气室部分的 卵壳。 （3）用无菌的毛细吸管插入尿囊腔中轻轻吸 取尿囊液（避免血管破裂），置于无菌试 管中。 （4）获得的尿囊液取一部分做血凝和血凝抑 制试验（定性），判断病毒的增殖情况并 对病毒进行鉴定；同时做无菌实验