微丝染色及形态观察 [目的要求] 1.掌握微丝的染色方法 2.了解光镜下微丝的基本形态结构。 3.了解细胞松弛素B对微丝的作用及原理
[目的要求] 1. 掌握微丝的染色方法。 2. 了解光镜下微丝的基本形态结构。 3. 了解细胞松弛素B对微丝的作用及原理。 微丝染色及形态观察
[实验原理] 真核细胞质中纵横交错的纤维网称为细胞骨架, 在维持细胞形状和运动方面具有重要作用。根据组成 成分和组装结构的不同,可将细胞骨架分为微管、微 丝和中间纤维。微丝普遍存在于多种细胞,对细胞的 形状和运动有一定作用。微丝由蛋白单体聚合形成 细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合,从而 破坏微丝,改变细胞的形状。细胞松弛素B对微丝的 作用具有可逆性
[实验原理] 真核细胞质中纵横交错的纤维网称为细胞骨架, 在维持细胞形状和运动方面具有重要作用。根据组成 成分和组装结构的不同,可将细胞骨架分为微管、微 丝和中间纤维。微丝普遍存在于多种细胞,对细胞的 形状和运动有一定作用。微丝由蛋白单体聚合形成, 细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合,从而 破坏微丝,改变细胞的形状。细胞松弛素B对微丝的 作用具有可逆性
当细胞用TritonX-100溶液处理,能够溶解质 膜结构中及细胞内许多蛋白质,而细胞骨架中的 蛋白质却不被破坏,经固定和考马斯亮蓝(非特 异性蛋白质染料)染色后,胞质背景着色弱,微 管等蛋白结构在光镜下无法分辨,在光镜下观察 到主要是由微丝组成的应力纤维 。 应力纤维由平行排列的微丝组成,体外培养的 贴壁细胞应力纤维尤为发达,形态长而直,常与 细胞长轴平行并贯穿细胞全长
当细胞用TritonX-100溶液处理,能够溶解质 膜结构中及细胞内许多蛋白质,而细胞骨架中的 蛋白质却不被破坏,经固定和考马斯亮蓝(非特 异性蛋白质染料)染色后,胞质背景着色弱,微 管等蛋白结构在光镜下无法分辨,在光镜下观察 到主要是由微丝组成的应力纤维。 应力纤维由平行排列的微丝组成,体外培养的 贴壁细胞应力纤维尤为发达,形态长而直,常与 细胞长轴平行并贯穿细胞全长
Key to Cytoskeletal Functions (1Structure and Support 2) Intracellular Transport (3)Contrac面y and Motility y(4)Spatial Organization Actin filaments Actin faments 2 31 Motorroten Intermediate Microtubdle flament Intermediate flaments Nerve cell 时 Motor proten Actin fiaments Microtubule 2 2 Microtubule Motor proten 3 a Epithelial cell d Dividing cell
微丝在细胞内的分布特征
微丝在细胞内的分布特征