(5)基因扩增的诊断 以待测基因的DNA片段或cDNA片段作为探针，采用适当的 限制酶将基因组DNA进行酶切，通过Southernl印迹杂交分析。 若基因组中该基因（或DNA片段）的拷贝数发生改变，杂交后 显示的条带位置会发生改变，对放射性自显影条带进行吸光 度扫描，可进行基因定量
以待测基因的DNA片段或cDNA片段作为探针，采用适当的 限制酶将基因组DNA进行酶切，通过Southern印迹杂交分析。 若基因组中该基因(或DNA片段)的拷贝数发生改变，杂交后 显示的条带位置会发生改变，对放射性自显影条带进行吸光 度扫描，可进行基因定量。 （5）基因扩增的诊断
2、多态性分析 (1)限制性片段长度多态性分析 在人群中，个体间基因组的核苷酸序列存在着差异性，称为 DNA的多态性。突变、重排、单个核苷酸的插入或缺失可使DNA 顺序发生改变。其中有些可能造成限制酶切位点的增加、缺失 或易位，致使DNA分子的限制酶切位点数目、位置发生改变。用 限制酶切割基因组时，所产生的限制性片段的数目和每个片段 的长度就不同，这就是限制性片段长度多态性(RFLP restriction fragment length polymorphism)。能导致限制 性片段发生改变的酶切位点又称为多态性位点
在人群中，个体间基因组的核苷酸序列存在着差异性，称为 DNA的多态性。突变、重排、单个核苷酸的插入或缺失可使DNA 顺序发生改变。其中有些可能造成限制酶切位点的增加、缺失 或易位，致使DNA分子的限制酶切位点数目、位置发生改变。用 限制酶切割基因组时，所产生的限制性片段的数目和每个片段 的长度就不同 ， 这就是限制性片段长度多态性 (RFLP restriction fragment length polymorphism)。能导致限制 性片段发生改变的酶切位点又称为多态性位点。 2、多态性分析 （1）限制性片段长度多态性分析
限制酶酶切位点改变造成的RFLP可分为两种情况：①在 限制酶识别位点发生单个碱基置换，导致这一多态性位 点的丢失或获得，称为点多态性。这种多态性只有两个 等位片段，即多态性位点有或无。②由于限制酶识别位 点之间的DNA序列缺失、插入或重复，限制酶的识别序列 不发生改变，但它在基因组中相对位置发生了变化，这 类多态性可以有两个或两个以上的等位片段
限制酶酶切位点改变造成的RFLP可分为两种情况：①在 限制酶识别位点发生单个碱基置换，导致这一多态性位 点的丢失或获得，称为点多态性。这种多态性只有两个 等位片段，即多态性位点有或无。②由于限制酶识别位 点之间的DNA序列缺失、插入或重复，限制酶的识别序列 不发生改变，但它在基因组中相对位置发生了变化，这 类多态性可以有两个或两个以上的等位片段
RFLP分析法主要有限制酶酶切图谱直接分析法和RFLP 间接分析法。 ①限制酶酶切图谱直接分析法：适用于分析点多态性、 核苷酸的缺失、插入或重组引起的多态性，可用于诊断 疾病基因结构多态性变异已经明确的疾病
①限制酶酶切图谱直接分析法：适用于分析点多态性、 核苷酸的缺失、插入或重组引起的多态性，可用于诊断 疾病基因结构多态性变异已经明确的疾病。 RFLP分析法主要有限制酶酶切图谱直接分析法和RFLP 间接分析法
其方法有两种：一种是根据已知的变异选用特定的限制 酶水解DNA,然后用特异探针进行Southern!印迹杂交， 若存在疾病基因则显示与正常人不同舶杂交条带，据此 诊断疾病。另一方法是用PCR法将基因片段扩增后，再 用特定限制酶水解扩增产物，分析酶解后产物分子的大 小，判断是否有疾病基因
其方法有两种：一种是根据已知的变异选用特定的限制 酶水解DNA，然后用特异探针进行Southern印迹杂交， 若存在疾病基因则显示与正常人不同舶杂交条带，据此 诊断疾病。另一方法是用PCR法将基因片段扩增后，再 用特定限制酶水解扩增产物，分析酶解后产物分子的大 小，判断是否有疾病基因