ELISA原理 (A)直接法 (1)抗体包被 YYYYY (2)抗原包被 (B)间接法 (C夹心法 (1)直接夹心法 YYYYY (2)间接夹心法 ▲代表抗原 代表酶标抗原丫代表抗体 犬代表酶标抗体 代表底物-产物
ELISA原理
特点： 。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫 反应的结果，使测定具有极高的灵敏度。 ELISA具有选择性好、结果判断客观准确、实 用性强、检测速度快、样品处理量大、以及 费用低等优点，弥补了经典化学分析方法和 其他仪器测试手段的不足
❖ 特点： ❖ 由于酶的催化效率很高， 间接地放大了免疫 反应的结果，使测定具有极高的灵敏度。 ELISA具有选择性好、结果判断客观准确、实 用性强、检测速度快、样品处理量大、以及 费用低等优点，弥补了经典化学分析方法和 其他仪器测试手段的不足
应用： ELISA:技术自二十世纪70年代出现开始，在临 床和生物疾病诊断与控制等领域中倍受重视。 随着蛋白质分离纯化技术和基因工程技术的 不断发展，各种高纯度抗体、抗原和抗体复合物 得以制备，单克隆抗体技术的应用，使得该诊断 检测技术在特异性、灵敏度和客观性方面都有了 大幅度的提高，并且在自动化免疫技术的推进之 下进一步具有了精确的定量分析能力
应用： ELISA技术自二十世纪70年代出现开始，在临 床和生物疾病诊断与控制等领域中倍受重视。 随着蛋白质分离纯化技术和基因工程技术的 不断发展，各种高纯度抗体、抗原和抗体复合物 得以制备，单克隆抗体技术的应用，使得该诊断 检测技术在特异性、灵敏度和客观性方面都有了 大幅度的提高，并且在自动化免疫技术的推进之 下进一步具有了精确的定量分析能力
由于ELISA的技术条件要求低、 适用范围宽、携带方便、且易商品化、 操作简便和经济实惠，它已成为一种 应用最为广泛和发展最为成熟的生物 检测与分析技术，常以试剂盒的形式 出现
由于ELISA的技术条件要求低、 适用范围宽、携带方便、且易商品化、 操作简便和经济实惠，它已成为一种 应用最为广泛和发展最为成熟的生物 检测与分析技术，常以试剂盒的形式 出现
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分： (1)包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）： (2)酶标记的抗原或抗体；(3)酶的底物：(4)阴性和 阳性对照品（定性测定），参考标准品和控制血清（定 量测定)；（⑤）结合物及标本的稀释液；(6)洗涤液； (7)酶反应终止液。 结合物为酶标记的抗体（或抗原），是ELISA中最 关键的试剂。良好的结合物既保持了酶的催化活性， 也保持了抗体（或抗原）的免疫活性。在ELISA中，常 用的酶为辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,AP)。国 产ELISA试剂一般都用HRP制各结合物。国外很多 ELISA试剂采用碱性磷酸酶(AP)作为标记酶
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分： (1)包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)； (2)酶标记的抗原或抗体；(3)酶的底物：(4)阴性和 阳性对照品(定性测定)，参考标准品和控制血清(定 量测定)；(5)结合物及标本的稀释液；(6)洗涤液； (7)酶反应终止液。 结合物为酶标记的抗体(或抗原)，是ELISA中最 关键的试剂。良好的结合物既保持了酶的催化活性， 也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。在ELISA中，常 用的酶为辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase， HRP)和碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase，AP) 。国 产ELISA试剂一般都用HRP制各结合物。国外很多 ELISA试剂采用碱性磷酸酶(AP)作为标记酶