1(2)β-半乳糖苷酶显色反应选择法1/11111111111111HindlllS更小的分子量和11/1Pstl111更高的拷贝数Xbal11SphlSallHincllAccixmalBamHISβ-半乳糖苷酶BanllKpnlSstiEcoRIlaczAmpicillin显色反应检测重generesistancegene1Polylinker region组体11/12686bp-111拉pUC181S具有多克隆位点(Klug&Cummings1997)11RE11111111111111111
§ 更小的分子量和 更高的拷贝数 § β-半乳糖苷酶 显色反应检测重 组体 § 具有多克隆位点 2686bp (2) β-半乳糖苷酶显色反应选择法
吉祥11β-半乳糖苷酶法1111111laczAm11...........1..-稻1111111111兴业X兴YN,HCOOH11口片段口片111段O1I1智1
β-半乳糖苷酶法 Am lacZ N2H 片 段 COOH 片段
口-半乳糖苷酶显色反应选择法+半乳糖葡萄糖乳糖口-半乳糖苷酶5-溴-4-氯靛蓝半乳糖Xgal深蓝色原理：载体上有一段-半乳糖苷酶基因（LacZ）的口片段（氨基端），其上有外源DNA的插入位点。受体菌基因组中有突变的口-半乳糖苷酶基因（口片段缺失）可以被IPTG诱导表达。I载体和受体菌基因组可以互补形成完整有功能的口-半乳糖苷酶1包
-半乳糖苷酶显色反应选择法 -半乳糖苷酶 乳糖 半乳糖 葡萄糖 Xgal 半乳糖 5-溴-4-氯靛蓝 + + 深蓝色 原理： 载体上有一段-半乳糖苷酶基因（Lac Z）的片段 （氨基端），其上有外源DNA的插入位点。 受体菌 基因组中有突变的-半乳糖苷酶基因（ 片段缺失）。 可以被IPTG诱导表达。 载体和受体菌基因组可以互 补形成完整有功能的-半乳糖苷酶
克祥选择过程含Amp、Xgal、LacZaLacZaIPTG的培养基AmprAmprB-半乳糖苷酶基因载体挑选白色克隆的a片段中插入外源DNA11假阳性：如果插入的外源DNA正好是3的倍数并且没有中止密码（不破坏口肽）怡1
假阳性： 如果插入的外源DNA正好是3的倍数并且没有中止 密码（不破坏肽）。 选择过程
X/1白色菌落（重组子）蓝色菌落（非重组子）1111
白色菌落 （重组子） 蓝色菌落 （非重组子）