Ju11蓝色菌落(非重组子)麺起
蓝色菌落 (非重组子)
■-半乳糖苷酶使Xgal分解成兰色产物
-半乳糖苷酶使Xgal分解成兰色产物
HostBacteriophageADNAchromosom(3)溶菌选择法1CireularizedADNAS2DNA感染E.coli发LyticLysogenic生溶菌生长,形成cyelecycleADNA integrated intohostchromosome很亮的噬菌斑,溶Cell源生长多少也有溶Assembled授divisionbacteriophage菌,挑选噬菌斑即Lsiso稻hoxt.cell可分析鉴定转化子
(3)溶菌选择法 § λDNA感染E.coli发 生溶菌生长,形成 很亮的噬菌斑,溶 源生长多少也有溶 菌,挑选噬菌斑即 可分析鉴定转化子
2根据插入序列的表型特征选择重组体分子基本原理:转化的外源DNA编码的基因,能够对O大肠杆菌寄主菌株所具有的突变发生体内抑制或互补效应,从而使被转化的寄主细胞表现出外源基因编码的表型特征。例如,编码大肠杆菌生物合成基因的克隆所具有的8外源DNA片段,对于大肠杆菌寄主菌株的不可逆的营养缺陷突变具有互补的功能。根据这种特性,便可以分离到获得了这种基因的重组体克隆
2.根据插入序列的表型特征选择重组体分子 § 基本原理:转化的外源DNA编码的基因,能够对 大肠杆菌寄主菌株所具有的突变发生体内抑制或互 补效应,从而使被转化的寄主细胞表现出外源基因 编码的表型特征。 § 例如,编码大肠杆菌生物合成基因的克隆所具有的 外源DNA片段,对于大肠杆菌寄主菌株的不可逆 的营养缺陷突变具有互补的功能。根据这种特性, 便可以分离到获得了这种基因的重组体克隆
弥补缺陷营养缺陷型筛选法可以区分转化子与非转化子。其原理是:载体分子上携带某种营养组份的合成基因,而受体细胞本身不能合成这霜一营养组份,将转化细胞涂布在不含此营养组份的培养基上,长出的便是转化子福
§ 营养缺陷型筛选法可以区分转化子与非转化 子。其原理是:载体分子上携带某种营养组 份的合成基因,而受体细胞本身不能合成这 一营养组份,将转化细胞涂布在不含此营养 组份的培养基上,长出的便是转化子 弥补缺陷