第十一章基因载体的选择与构建载体的一般特性=质粒载体入噬菌体载体四cos质粒（cosmid）五人造染色体载体（酵母人工染色体，细菌人工染色体载体和噬菌体人工染色体载体
第十一章 基因载体的选择与构建 • 一 载体的一般特性 • 二 质粒载体 • 三 λ噬菌体载体 • 四 cos质粒（cosmid） • 五 人造染色体载体（酵母人工染色体，细菌人工染色体载 体和噬菌体人工染色体载体）
一、载体（vector）的一般特性分子克隆载体是可供外源DNA插入并携带重组DNA分子进入适当宿主细胞的DNA分子。1.载体功能：·为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；·为外源基因提供在受体细胞的复制能力或整合能力；·为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力
一、载体(vector)的一般特性 l 分子克隆载体是可供外源DNA插入并携带重组DNA分子进入适 当宿主细胞的DNA分子。 1.载体功能: • 为外源基因提供进入受体细胞的转移能力； • 为外源基因提供在受体细胞的复制能力或整合能力； • 为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力
(一）、发展概况·第一阶段（1977年前）：天然质粒和重组质粒的利用，如pSC101ColE1, pCR, pBR313。·第二阶段：增大载体容量，建立多克隆位点区和新的遗传标记基因。第三阶段：进一步完善载体的功能以满足基因工程克隆中的不同要求。VectorTypeExpression(212)ThermoFisherSCIENTIFICCloning (84)CloningtorSequencing(13)RNAI(7)DNAAssembly (5)Two Hybrid (1)
（一）、发展概况 • 第一阶段（1977年前）：天然质粒和重组质粒的利用，如pSC101, ColE1, pCR, pBR313。 • 第二阶段：增大载体容量，建立多克隆位点区和新的遗传标记基因。 • 第三阶段：进一步完善载体的功能以满足基因工程克隆中的不同要求。 4
（二）、载体的结构特点至少有一个复制起点，至少可在一种生物体中有效复制，稳定遗传·至少有一个限制酶识别位点，供外源DNA插入，·至少有一个遗传标记基因，以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞，·具有较小的分子量和较高的拷贝数，，具有对受体细胞的可转移性，提高载体导入受体细胞的效率
（二）、载体的结构特点 • 至少有一个 ，至少可在一种生物体中有效复制，稳定遗传， • 至少有一个 ，供外源DNA插入， • 至少有一个 ，以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞， • 具有 的分子量和 的拷贝数， • 具有对受体细胞的 , 提高载体导入受体细胞的效率
一个理想的载体应具备以下的特点：·（1)能自主复制·（2)易于分离和纯化；·（3）含有可供选择的遗传标记·(4)含酶切位点·(5)不含与复制无关的区域·（6)不影响宿主的生长和繁殖
一个理想的载体 应具备以下的特点: • (1)能自主复制; • (2)易于分离和纯化; • (3)含有可供选择的遗传标记; • (4)含酶切位点; • (5)不含与复制无关的区域; • (6)不影响宿主的生长和繁殖。 6