第十三章 重组DNA导入受体细胞ROSS一|重组DNA导入受体细胞的基本策略重组体DNA分子的转化或转染S三I植物细胞的转基因方法S 四 哺乳动物的转基因方法
第十三章 重组DNA导入受体细胞 § 一 重组DNA导入受体细胞的基本策略 § 二 重组体DNA分子的转化或转染 § 三 植物细胞的转基因方法 § 四 哺乳动物的转基因方法
吉祥重组DNA导入受体细胞的基本策略1 流程1ES|载体DNA的分离纯化S目的基因与载体的连接主要是依赖于核酸内切限制酶和DNA连接酶的作用-重组体向宿主细胞的导入11转将外源重组体分子导入受体细胞的途径，包括转化、福染、显微注射和电穿孔等多种不同的方式。1
一 重组DNA导入受体细胞的基本策略 1 流程 § 载体DNA的分离纯化 § 目的基因与载体的连接 主要是依赖于核酸内切限制酶和DNA连接酶的作用 § 重组体向宿主细胞的导入 将外源重组体分子导入受体细胞的途径，包括转化、转 染、显微注射和电穿孔等多种不同的方式
吉12. 导入目的（1）克隆扩增：rDNA导入宿主细胞，利用宿主的生理条件，克隆扩增，克隆片段随着载体（如质粒）“起扩增获得扩增DNA片段（如细菌分裂繁殖）。（2）克隆表达：利用宿主的生理条件，生产基因工程产品或开展基因治疗。受体细胞：接受rDNA分子的细胞称作受体细胞或宿主细胞。有2种既可以复制扩增，也可以基因表达S原核细胞s真核细胞、一般只用作基因表达系统。1招蒙41
2. 导入目的 （1）克隆扩增：rDNA导入宿主细胞，利用宿主的 生理条件，克隆扩增，克隆片段随着载体（如质粒）一 起扩增获得扩增DNA片段（如细菌分裂繁殖）。 （2）克隆表达：利用宿主的生理条件，生产基因工 程产品或开展基因治疗。 受体细胞：接受rDNA分子的细胞称作受体细胞或宿主 细胞。有2种 §原核细胞 既可以复制扩增，也可以基因表达。 §真核细胞 一般只用作基因表达系统
11111111/1111111Prokaryotic hosts111111111111I11ES E.coli：包涵体蛋白1111拉11sBacillus（芽孢杆菌）工程菌11S Streptomyces（链霉菌）：抗生素基因，生物合成基因11111SPseudomonas（假单孢菌）：工程菌SB.Subtilis（枯草杆菌）：分泌型表达1111111E1111111
Prokaryotic hosts § E.coli：包涵体蛋白 § Bacillus（芽孢杆菌）工程菌 § Streptomyces（链霉菌）：抗生素基因，生物 合成基因 § Pseudomonas（假单孢菌）：工程菌 § B.Subtilis (枯草杆菌 )：分泌型表达
111.11/1111111111111111Eukaryotic hosts1/111111111111E1E-（酿酒酵母）§ Saccharomyces cerevisiaes Plants：双子叶植物11肿SAnimals：多用于抗体生产。生殖细胞，大瘤细胞(HeLa细胞)111111111111111111[111111111/11111111111
Eukaryotic hosts § Saccharomyces cerevisiae（酿酒酵母） § Plants：双子叶植物 § Animals：多用于抗体生产。生殖细胞，肿 瘤细胞(HeLa细胞)