基因工程流程分(离目的基因)爆切（割目的基因和载体)接（连目的基因和载体转专（化宿主细胞）1筛（选阳性克隆）"表（达目的基因）
分（离目的基因） 切（割目的基因和载体） 接（连目的基因和载体） 转（化宿主细胞） 筛（选阳性克隆） 表（达目的基因） 基因工程流程
第十五章外源基因在细胞中的表达1.表达目的：(1)产生大量标记RNA探针：(2)产生突变型和野生型蛋白，研究蛋白质结构与功能。(3)生产商业性蛋白，如药物;(4)制备抗体；(5)捕捉相互作用的蛋白，研究相互作用
第十五章 外源基因在细胞中的表达 1.表达目的: (1)产生大量标记RNA探针； (2)产生突变型和野生型蛋白，研究蛋白质 结构与功能。 (3)生产商业性蛋白，如药物； (4)制备抗体； (5)捕捉相互作用的蛋白，研究相互作用
袁2.表达系统8 基因工程的表达系统有原核表达系统和真核.表达系统两大类1应用最为S原核表达系统是了解得最为深入，1广范的表达系统，1福稻1
2.表达系统 § 基因工程的表达系统有原核表达系统和真核 表达系统两大类。 § 原核表达系统是了解得最为深入，应用最为 广范的表达系统
u1宿主菌一般是经过改造后的1S原因：野生型细菌有针对外源DNA的限制修饰系统111111111改造菌株特点：61S不切割外源DNA1111S避免重组S改变细胞壁的通透性，提高转化效率。1118.在大肠杆菌是主要的克隆和表达宿主?拉1111111111111111
宿主菌一般是经过改造后的 § 原因：野生型细菌有针对外源DNA的限制修饰系统。 § 改造菌株特点： § 不切割外源DNA § 避免重组 § 改变细胞壁的通透性，提高转化效率。 § 在大肠杆菌是主要的克隆和表达宿主
游第一节原核基因表达的特点A克隆载体上加上转录和翻译调控序列即可使它变为表达载体V1111111111图1-3pBV220的物理图谱1.表达载体带有强启动子或组成型启动子或如lac或trp操纵子启动子、2PR、2PLEcoRI,Smal,BamHl,Sall,Hincll,Rstl,HindillT7噬菌体启动子。Xmml111Bglll1/PLt2.转录终止子和SD序列IIMBT1T21PRSspl-Xmnl3.外源基因与表达载体连接时，要能形HindillpBV220-HincllScalHindill成正确的开放读框CIts857-AmpHincll11Pvul3666bp4.AUG是首选起始密码子，-Bgll?orit1111a11
第一节 原核基因表达的特点 克隆载体上加上转录和翻译调控序列即可使它变为表达载体。 1. 表达载体带有强启动子或组成型启动子。 如lac或trp操纵子启动子、λPR、λPL 或 T7噬菌体启动子。 2.转录终止子和SD序列。 3.外源基因与表达载体连接时，要能形 成正确的开放读框。 4.AUG是首选起始密码子