、用酶解法、发酵法和半合成法制备核苷酸 (一)酶解法及碱水解法制备核苷酸 1酶解法制备脱氧核苷酸
二、用酶解法、发酵法和半合成法制备核苷酸 （一）酶解法及碱水解法制备核苷酸 1.酶解法制备脱氧核苷酸
桔青霉或熄曲霉 鱼精 液体培养2天 绞肉机粉碎 发酵液 鱼精匀浆 压滤除菌体 热变性冷却,过滤 酶液 混合,调pH DNA溶液 保温 酶解液 加热使酶失活,调ph9.0置冷过夜,过滤 DNA降解液 吸附于氯型阴离子交换树脂分步洗脱 脱氧胞苷酸 脱氧腺苷 脱氧胸苷酸 脱氧鸟苷酸 dCMP dAMP dTMP dGMP
桔青霉或熄曲霉 液体培养2天 发酵液 压滤除菌体 酶液 酶解液 鱼精 绞肉机粉碎 鱼精匀浆 热变性 冷却，过滤 DNA溶液 加热使酶失活，调pH9.0置冷过夜，过滤 DNA降解液 吸附于氯型阴离子交换树脂分步洗脱 脱氧胞苷酸 dCMP 脱氧腺苷 dAMP 脱氧胸苷酸 dTMP 脱氧鸟苷酸 dGMP 混合，调pH 保温
2.酶解法制备戊糖核苷酸 桔青霉M843培养酵母提取 产生核酸酶Pl RNA RNA降解成5一核苷酸 阳离子树脂分离 无离子水洗涤 流出液pH.5 2.0~3.5 3.5~4.0 3.5~4.5 UMP 浑浊液GMP,CMP混和液CMP稀溶液AMP稀溶液 碳柱吸附解析阴离子树脂 CMP溶液 减压浓缩 除盐等杂质UMP 阴离子树脂 阴离子树脂GMP浓溶液 GMP浓溶液AMP浓溶液 UMP稀溶液 乙醇沉淀 乙醇沉淀 乙醇沉淀 乙醇沉淀 UMP干粉 GMP干粉 GMP干粉 AMP干粉
2.酶解法制备戊糖核苷酸 桔青霉M843培养 产生核酸酶P1 酵母提取 RNA RNA降解成5‘－核苷酸 阳离子树脂分离 无离子水洗涤 UMP浑浊液 除盐等杂质UMP UMP稀溶液 UMP干粉 GMP，CMP混和液 GMP浓溶液 GMP干粉 CMP稀溶液 GMP浓溶液 GMP干粉 AMP稀溶液 AMP浓溶液 AMP干粉 流出液pH1.5 CMP溶液 2.0~3.5 3.5~4.0 3.5~4.5 碳柱吸附，解析 阴离子树脂 乙醇沉淀 阴离子树脂 阴离子树脂 乙醇沉淀 乙醇沉淀 乙醇沉淀 减压浓缩