武汉大学wunan University5、小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)SiRNA既存在内源性,但多为外源性,如病毒感染,转座子或人工插入双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)诱导产生的。因此siRNA具有独特的双链结构,长21-23nt,该序列与所作用的靶mRNA序列具有同源性。在Dicer作用下裂解成3'端带有两个突出碱基的21-23nt的siRNA,并与RNA诱导的基因沉默复合物(RNA-induced silencingcomplex,RISC)结合,由于RISC含有多种成分核酸酶,在ATP参与下,RISC内的siRNA解链为SsRNA,引导RISC寻找互补的mRNA,在内切酶作用下降解mRNA,从而沉默相应基因表达
5、小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA) siRNA既存在内源性,但多为外源性,如病毒感染,转座子或人工插 入双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)诱导产生的。因此, siRNA具有独特的双链结构,长21-23nt,该序列与所作用的靶mRNA序 列具有同源性。在Dicer作用下裂解成3’端带有两个突出碱基的21-23nt的 siRNA,并与RNA诱导的基因沉默复合物(RNA-induced silencing complex, RISC)结合,由于RISC含有多种成分核酸酶,在ATP参与下, RISC内的siRNA解链为ssRNA,引导RISC寻找互补的mRNA,在内切酶 作用下降解mRNA,从而沉默相应基因表达
武汉大学wunan Universit6、内含子(intron)内含子广泛分布于真核生物基因组中,前体mRNA的内含子可能由自我剪切II型内含子进化而来,它们不仅具有相似的剪切机制,还具有可移动和转座的功能。内含子可调节真核生物mRNA的选择性剪接,剪接后可产生有功能活性RNA,并可形成发夹状的miRNA、以及circRNA而调节其它基因活性
6、内含子(intron) 内含子广泛分布于真核生物基因组中,前体 mRNA的内含子可能由自我剪切II型内含子进化而 来,它们不仅具有相似的剪切机制,还具有可移动 和转座的功能。内含子可调节真核生物mRNA的选 择性剪接,剪接后可产生有功能活性RNA,并可形 成发夹状的miRNA、以及circRNA而调节其它基因 活性
武汉大学wunan University八、RNA干扰转录后基因沉默RNA干扰的发现与作用1990年,ArizonaUniversity,RichJorgensen小组,转查耳酮合基因以成酶(chalconesynthase)加深矮牵牛花的紫色。结果→转基因的植株一些花瓣santtsiureAltnldeepen thepurplehme of petuniasbygeneticimodification produced颜色并未加深,反而呈杂色甚至白inexpededrestitsRatherthanhrighteningpigmentstioa,aainsertedgeneswitchedcolourproductiosoflcrestingvariegited biooms (nset.色→不仅没有新基因的表达,反而PTGS in now thought to be anancient self-defence mechanismn evolwed tocombatinfectionbyvirusesandtransposonsrwao使原有的色素基因的表达也受到了抑制,他们将这种现象称为“共抑制”(co-suppression
八、RNA干扰转录后基因沉默 1、RNA干扰的发现与作用 1990年,Arizona University, Rich Jorgensen小组,转查耳酮合 成酶(chalcone synthase)基因以 加深矮牵牛花的紫色。 结果→转基因的植株一些花瓣 颜色并未加深,反而呈杂色甚至白 色→不仅没有新基因的表达,反而 使原有的色素基因的表达也受到了 抑制,他们将这种现象称为“共抑制” (co-suppression)