碱性磷酸酶标记的链霉亲和素一生物素法(SAP法）免疫组织化学实验二
碱性磷酸酶标记的链霉亲和 素－生物素法（SAP法） 免疫组织化学实验二
业福
实验原理ABC法SAP法
实验原理 ABC法 SAP法
实验方法或步骤1、石蜡切片脱蜡至水，蒸馏水洗，PBS浸泡2min；（如需采用抗原修复，可在此步后进行)。2、10%正常羊血清封闭，室温孵育10min；3、倾去血清，勿洗，滴加适当比例稀释的胰岛素一抗或一抗工作液，37C孵育45min。PBS冲洗，3X3min；4、滴加生物素标记羊抗鼠IgG工作液，37C孵育20min；5、PBS冲洗，3X3min6、滴加碱性磷酸酶标记链霉亲和素工作液，37℃或室温孵育20min。PBS冲洗，3X3min；8、自来水充分冲洗，封片
实验方法或步骤 1、石蜡切片脱蜡至水，蒸馏水洗，PBS浸泡2min；(如需采用 抗原修复，可在此步后进行)。 2、10％正常羊血清封闭，室温孵育10min； 3、倾去血清，勿洗，滴加适当比例稀释的胰岛素一抗或一抗工 作液，37℃孵育45min。 PBS冲洗，3×3min； 4、滴加生物素标记羊抗鼠IgG工作液，37℃孵育20min； 5、 PBS冲洗，3×3min； 6、滴加碱性磷酸酶标记链霉亲和素工作液，37℃或室温孵育 20min。 PBS冲洗，3×3min； 8、自来水充分冲洗，封片
结果胰岛内可见蓝色或紫蓝色着色的阳性细胞，阳性产物见于细胞质
结果 胰岛内可见蓝色或紫蓝色着色的阳 性细胞，阳性产物见于细胞质