第一节糖和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 >活性炭柱层析：含糖的水溶液通过柱一水洗脱（无机盐、单 糖等)→不同浓度乙醇洗脱（依次洗出二糖、三糖以及更大的 低聚糖) >离子交换层析：阳离子和阴离子交换树脂对除去水提液中的 酸、碱性成分和无机离子，然后进一步分离糖和苷。 注意：分离时最好采用弱酸弱碱型的交联度比较小的离子交换树 脂
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 ➢ 活性炭柱层析：含糖的水溶液通过柱 水洗脱（无机盐、单 糖等 ） 不同浓度乙醇洗脱（依次洗出二糖、三糖以及更大的 低聚糖）。 ➢ 离子交换层析：阳离子和阴离子交换树脂对除去水提液中的 酸、碱性成分和无机离子，然后进一步分离糖和苷。 注意：分离时最好采用弱酸弱碱型的交联度比较小的离子交换树 脂
第一节和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 >凝胶过滤法： 凝胶类型：葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等。 分离方法：低聚糖和苷类一般用孔隙小的凝胶分离。多糖先用孔 隙小的凝胶除去无机盐和小分子化合物，再用大孔隙的凝胶进行 分离。 >分级沉淀法：在混合多糖的高浓度水溶液中，逐步加入乙醇或 丙酮，收集不同浓度下析出的沉淀，得到不同的多糖组分
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 ➢凝胶过滤法： 凝胶类型：葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等。 分离方法：低聚糖和苷类一般用孔隙小的凝胶分离。多糖先用孔 隙小的凝胶除去无机盐和小分子化合物，再用大孔隙的凝胶进行 分离。 ➢分级沉淀法：在混合多糖的高浓度水溶液中，逐步加入乙醇或 丙酮，收集不同浓度下析出的沉淀，得到不同的多糖组分
第一节糖和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 >蛋白质除去法：用分级沉淀法得到的多糖，常伴有较多的蛋白 质，必须予以去除。 试剂：选择使蛋白质沉淀而多糖不沉淀的试剂，如三氟三氯乙烷 法和Sevag法（用氯仿-正丁醇按4：1混合) 。 注意：要达到除尽游离蛋白质的目的仍需反复多次处理。因此配 合加入蛋白质水解酶，使蛋白质大分子进行一定程度降解后，再 用Sevag法处理，效果会更好
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 ➢蛋白质除去法：用分级沉淀法得到的多糖，常伴有较多的蛋白 质，必须予以去除。 试剂：选择使蛋白质沉淀而多糖不沉淀的试剂，如三氟三氯乙烷 法和Sevag法（用氯仿-正丁醇按4∶1混合）。 注意：要达到除尽游离蛋白质的目的仍需反复多次处理。因此配 合加入蛋白质水解酶，使蛋白质大分子进行一定程度降解后，再 用Sevag法处理，效果会更好
第一节和苷类化合物制备与鉴定实例 二、 含有糖和苷类化合物的中药制备与鉴定实例 黄芪-黄芪多糖 黄芪为豆科植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge)Hsiao)或膜荚黄芪 (Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge)的干燥根。 >黄芪的化学成分：主要有多糖、黄酮和皂苷类等，多糖的成分 主要为葡聚糖和杂多糖。 >2010年版《中国药典》规定：含黄芪甲苷不得少于0.04%， 毛 蕊异黄酮葡萄糖苷不得少于0.02%。 >黄芪多糖提取分离：利用其易溶于热水、难溶于乙醇的特点进 行提取分离（如下图）
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 二、含有糖和苷类化合物的中药制备与鉴定实例 黄芪---黄芪多糖 黄芪为豆科植物蒙古黄芪（Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var.mongholicus (Bge) Hsiao）或膜荚黄芪 （Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge）的干燥根。 ➢黄芪的化学成分：主要有多糖、黄酮和皂苷类等，多糖的成分 主要为葡聚糖和杂多糖。 ➢ 2010年版《中国药典》规定：含黄芪甲苷不得少于0.04%，毛 蕊异黄酮葡萄糖苷不得少于0.02%。 ➢黄芪多糖提取分离：利用其易溶于热水、难溶于乙醇的特点进 行提取分离（如下图）
黄芪饮片 12倍水煎煮3次，每次1.5h,过滤 药渣 合并水提液 ↓减压浓缩 浓缩液 加95%乙醇搅拌，使醇浓度至80%，放置过夜 上清液 沉淀 加水溶解、过滤 减压浓缩，加95%乙醇，搅拌，使 滤液 不溶物 醇浓度至80%，放置过夜，抽滤 上清液 沉淀 ↓95%乙醇洗涤，减压干燥 黄芪多糖