糖体DNA( ribosome dnA.r dna)基因片段 IGS 18S r DNA [ 5.8S ITs2 28s r DNA FIGs T DNA 18s r ITS TS N高等植物中nDNA基因重复单位的基本结构,P1、P2为PCR扩增的两引物 S pacer region o. 在高等植物中,5SDNA Coding Coding 是编码5s核糖体RNA的 多拷贝基因,以串联重 region region 复的形式存在,每个重 复单位包括一个大约 AS AS-1 120bp的编码区和长度 ERSITY 在100~700b之间的转 5S-rRNA 录间隔区 生药盏定常用的基因 理 2021/2/21 各论m
2021/2/21 11 高等植物中nrDNA基因重复单位的基本结构，P1、P2为PCR扩增的两引物 18S r DNA ITS ITS Spacer region AS AS-1 5S-rRNA Coding region Coding region 在高等植物中，5SDNA 是编码5S核糖体RNA的 多拷贝基因，以串联重 复的形式存在，每个重 复单位包括一个大约 120bp的编码区和长度 在100~700bp之间的转 录间隔区 核糖体DNA(ribosome DNA,r DNA)基因片段 生药鉴定常用的基因 各 论
母其品浙贝母约小鳞的状显微征 cirrhosa F cirrhosa F. unibractea F przewalskii The young bulbs of F thunbergii ⊙ F przewalskii 浙贝 两者性状和显微特征滩难以区别 Funibracteata WERSITY T 2021/2/21 12
2021/2/21 12 F.unibracteata F.cirrhosa F.przewalskii F.thunbergii 浙贝 母 川贝母及其伪品浙贝母幼小鳞茎的性状和显微特征 两者性状和显微特征难以区别 各 论
浙贝母的鉴别性PCR鉴定 浙贝母 M: 100bp Ladder DNA 分子量标记 1浙贝母 2东贝母 243 3平贝母 4伊贝母 5新疆贝母 6蒲圻贝母 500 蒲圻贝母 FthP2、P3于60°℃的扩增 8湖北贝母 9梭砂贝母 暗紫贝母 11甘肃贝母 12卷叶贝母 13紫花贝母 14绿黄贝母 15康定贝母 上游引物:Fth-P3:5- GGT GAG ATT AGA TCATAATTT CGG TG3329 下游引物:Fth-P2:5- TAT TAG CAT TAA TCG ATC GAATTC3 522 基于5SRNA基因间区序列:152(P1):522(P2329P3):505(P4) 2021/2/21 论
2021/2/21 13 浙贝母的鉴别性PCR鉴定 上游引物：Fth-P3: 5’- GGT GAG ATT AGA TCA TAA TTT CGG TG -3’ 329 下游引物：Fth-P2: 5’-TAT TAG CAT TAA TCG ATC GAA TTC-3’ 522 基于5S-rRNA 基因间区序列: 152(P1);522(P2);329(P3);505(P4) 300 400 500 FthP2、P3于60℃的扩增 243 M：100bp Ladder DNA 分子量标记， 1 浙贝母 2 东贝母 3 平贝母 4 伊贝母 5 新疆贝母 6 蒲圻贝母 7 蒲圻贝母 8 湖北贝母 9 梭砂贝母 10 暗紫贝母 11 甘肃贝母 12 卷叶贝母 13 紫花贝母 14 绿黄贝母 15 康定贝母 浙贝母 各 论
川贝母类药材的 PCR-RFLP鉴 nrDNAITS区(含58S序列全长610bp非 TS1区序列全长212bp 类T 75bp l类特异性序列5- TGCCCGCCCT GCCCGGGACC TCGC3 1234567890113150 10 20 118 T GCCCGCCCT GdCCGGGACCTCGC 0=, 308 Cac8工 AspN士 Af工 Asp745工 AspS9工 Avc工 Pf127工 川贝类》Bma卫 TS1区SmaT酶 031317987 Bsc4工 Hpa工工 Ahy工 基于5S-RNA基因间区序列 川母 Ama87工 暗紫贝母 Aqu工 Hinf I梭砂贝母;Bcn工暗紫贝母 甘肃贝母 梭砂贝母 Primer .3ncr 2021/2/21
2021/2/21 14 川贝母类药材的PCR-RFLP鉴 定nrDNA ITS区(含5.8S) 序列全长610bp 川贝类特异性序列: 5’- TGCCCGCCCT GCCCGGGACC TCGC–3’ 非川贝 类 T 75bp ITS1区序列全长212bp 200 300 400 ITS1区SmaⅠ酶 03131798.7 118 190 308 川贝类 川贝母 暗紫贝母 甘肃贝母 梭砂贝母 基于5S-rRNA基因间区序列 HinfⅠ梭砂贝母;BcnⅠ暗紫贝母 Primer Premier 各 论
金银花道地药材的鉴定 金银花存在明显的道 地性,同一物种产地不 同质量差异明显 巨 各论15
2021/2/21 15 金银花存在明显的道 地性，同一物种产地不 同质量差异明显 金银花道地药材的鉴定 各 论