共价结合法的优缺点 ■共价结合法与离子结合法和物理吸附法 相比,反应条件苛刻,操作复杂,而且 由于采用了比较强烈的反应条件,会引 起酶蛋白高级结构的变化,破坏部分活 性中心,因此往往不能得到比活性高的 固定化酶,甚至酶的底物专一性等性质 也会发生变化。但是酶与载体结合牢 般不会因底物浓度高或存在盐类等原 因而轻易脱落
共价结合法的优缺点 ◼ 共价结合法与离子结合法和物理吸附法 相比，反应条件苛刻，操作复杂，而且 由于采用了比较强烈的反应条件，会引 起酶蛋白高级结构的变化，破坏部分活 性中心，因此往往不能得到比活性高的 固定化酶，甚至酶的底物专一性等性质 也会发生变化。但是酶与载体结合牢固， 一般不会因底物浓度高或存在盐类等原 因而轻易脱落
(2)交联法 交联法是用双功能或多功能试剂使酶与酶或微 生物的细胞与细胞之间交联的固定化方法。交 联法有可分为交联酶法、酶与辅助蛋白交联法 吸附交联法及载体交联法4种。其内容有酶分 子交联、分子间交联或辅助蛋白与酶分子间交 联;也可以先将酶或细胞吸附于载体表面而后 再交联或者在酶与载体之间进行交联。常用的 交联剂有戊二醛、双重氮联苯胺-2,2-二磺酸 1,5-二氟-2,4-二硝基苯及己二酰亚胺二甲酯等。 参与交联反应的酶蛋白的功能团有N-末端的 α氨基、赖氨酸的ε氨基、酪氨酸的酚基、半 胱氨酸的巯基及组氨酸的咪唑基等
（2）交联法 ◼ 交联法是用双功能或多功能试剂使酶与酶或微 生物的细胞与细胞之间交联的固定化方法。交 联法有可分为交联酶法、酶与辅助蛋白交联法、 吸附交联法及载体交联法4种。其内容有酶分 子交联、分子间交联或辅助蛋白与酶分子间交 联；也可以先将酶或细胞吸附于载体表面而后 再交联或者在酶与载体之间进行交联。常用的 交联剂有戊二醛、双重氮联苯胺-2,2-二磺酸、 1,5-二氟-2,4-二硝基苯及己二酰亚胺二甲酯等。 参与交联反应的酶蛋白的功能团有N-末端的- 氨基、赖氨酸的-氨基、酪氨酸的酚基、半 胱氨酸的巯基及组氨酸的咪唑基等
交联法的优缺点 ■交联法的反应条件比较强烈,固定化酶 的酶活回收一般较低,但是尽可能降低 交联剂的浓度和缩短反应时间将有利于 固定化酶比活的提高
交联法的优缺点 ◼ 交联法的反应条件比较强烈，固定化酶 的酶活回收一般较低，但是尽可能降低 交联剂的浓度和缩短反应时间将有利于 固定化酶比活的提高