血浆清蛋白分离纯化筛板生化与分生教研室李嘉欣样本凝胶加样收集不同组分
血浆清蛋白分离纯化 生化与分生教研室 李嘉欣
分离得到高纯度并具有生物学活性的自的蛋白是研究蛋白质结构和功能的基础，也是生物化学与分子生物学技术的重要组成部分。分离纯化原则1、样本的选择：选择稳定性强、含量高、来源广、数量足且成本低的蛋白质样本。还要考虑目的蛋白在细胞中的分布。2、目的蛋白信息的掌握：如了解等电点、分子量、胶体性质和稳定性等根据终产品的用途选择，并3、纯化过程的选择：综合考虑纯化产品的质量、数量和经济性等
分离得到高纯度并具有生物学活性的目的蛋白是研究蛋白质结构 和功能的基础，也是生物化学与分子生物学技术的重要组成部分。 分离纯化原则 1、样本的选择：选择稳定性强、含量高、来源广、 数量足且成本低的蛋白质样本。还要考虑目的蛋白 在细胞中的分布。 2、目的蛋白信息的掌握：如了解等电点、分子量、 胶体性质和稳定性等。 3、纯化过程的选择：根据终产品的用途选择，并 综合考虑纯化产品的质量、数量和经济性等
分离纯化方法1、初级分离-沉淀法：：将目的蛋白与其他杂质蛋白分离。常用沉淀分离方法，如盐析法、有机溶剂沉淀法和等电点沉淀法。2、高级分离：根据目的蛋白质纯化度的要求，采用层析（凝胶层析、分配层析、吸附层析、离子交换层析和亲和层析等）和电泳大（醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳等）等方法进一步纯化
分离纯化方法 1、初级分离-沉淀法：将目的蛋白与其他杂质蛋白分离。 常用沉淀分离方法，如盐析法、有机溶剂沉淀法和等电点 沉淀法。 2、高级分离：根据目的蛋白质纯化度的要求，采用层析 （凝胶层析、分配层析、吸附层析、离子交换层析和亲和 层析等）和电泳（醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳和 聚丙烯酰胺凝胶电泳等）等方法进一步纯化
定量和定性分析·定量分析：凯氏定氮法、双缩脲法、Foloin-酚试剂法、考马斯亮蓝法等。·定性分析：等电聚焦电泳、SDS-PAGE、Westernblotting等。蛋白质的鉴定免疫印迹、质谱分析
• 定量分析：凯氏定氮法、双缩脲法、Foloin-酚试剂 法、考马斯亮蓝法等。 • 定性分析：等电聚焦电泳、SDS-PAGE、Western blotting等。 定量和定性分析 蛋白质的鉴定 • 免疫印迹、质谱分析
实验目的：n1、学习利用盐析法分离血浆清蛋白的实验方法。n2、掌握盐析法的基本原理n3、掌握凝胶层析技术的基本原理n4、熟悉凝胶层析技术的实验方法
实验目的： n 1、学习利用盐析法分离血浆清蛋白的实验 方法。 n 2、掌握盐析法的基本原理。 n 3、掌握凝胶层析技术的基本原理。 n 4、熟悉凝胶层析技术的实验方法