中f日品包头医学院e生物化学与分子生物学实验课程血浆清蛋白分离、纯化与鉴定生物化学与分子生物学教研室
血浆清蛋白分离、纯化与鉴定 生物化学与分子生物学教研室
中afEan包头医学院生物化学与分子生物学实验课程实验目的掌握盐析法的基本原理及操作方法。掌握凝胶层析技术的基本原理及操作方法。掌握醋酸纤维薄膜电泳的原理和操作方法
实验目的 掌握盐析法的基本原理及操作方法。 掌握凝胶层析技术的基本原理及操作 方法。 掌握醋酸纤维薄膜电泳的原理和操作 方法
实验原理中aTEE包头医学Be生物化学与分子生物学实验课程一、粗分离一盐析法盐析：指向蛋白质溶液中加入某些高浓度的无机盐溶液后，使蛋白质的溶解度降低，进而使蛋白质凝聚从溶液中析出。蛋白质溶液是稳定的亲水胶体溶液维持稳定性的因素半饱和硫酸铵溶液中：血浆中球蛋白析出饱和硫酸铵溶液：球蛋水密和清蛋白都析出。离子强度改变对水分子亲和力+中性盐溶液中和表面电荷大于蛋白质，破坏水化膜蛋白质溶解度降低，分子聚集沉淀
实验原理 一、粗分离—盐析法 盐析：指向蛋白质溶液中加入某些高浓度的无机盐溶液后，使 蛋白质的溶解度降低，进而使蛋白质凝聚从溶液中析出。 蛋白质溶液是稳定的亲水胶体溶液 维持稳定性的因素 分子表面电荷 水化膜 +中性盐溶液 离子强度改变， 中和表面电荷 对水分子亲和力 大于蛋白质，破 坏水化膜 蛋白质溶解度降低，分子聚集沉淀 半饱和硫酸铵溶液中：血浆中球蛋白析出 饱和硫酸铵溶液中：球蛋白和清蛋白都析出
中aan包头医学院F生物化学与分子生物学实验课程（分子筛层析）细分离一凝胶层析二、乡按分子大小分离样品中各组分的一种物理分离方法混合物通过凝胶时，由于分子大小不同，通过凝胶柱的速度不同，得以分离。分子筛效应：移动速①小分子物质：易进入凝胶网孔，流程长、度慢。①大分子物质：沿凝胶颗粒间不能进入凝胶网孔，流动，流程短、移动快中
二、细分离—凝胶层析（分子筛层析） 分子筛效应： Ø小分子物质：易进入凝胶网孔，流程长、移动速 度慢。 Ø大分子物质：不能进入凝胶网孔，沿凝胶颗粒间 流动，流程短、移动快。 按分子大小分离样品中各组分的一种物理分离方法。 混合物通过凝胶时，由于分子大小不同，通过凝胶 柱的速度不同，得以分离
中社包头医学院eC生物化学与分子生物学实验课程(1)(3)(5)(2)(4)000000C-硫酸铵0000006oo00SGO0000OO60o0000C0000-凝胶颗粒000000ooo20000000000000000OrO多孔板清蛋白0006002CB00清蛋白硫酸铵+磺基水杨酸+奈氏试剂白色浑黄色浊沉淀
硫酸铵 清蛋白 清蛋白 硫酸铵 白色浑 浊沉淀 黄色 +磺基水杨酸 +奈氏试剂