专嘉 Chromosomal DNA (e.g.Suspect 1) Cleave with restriction 二二 DNA pape e Figure 1 The Southern blot procedure,as applied
②常用的转移方法 奏 毛细管渗吸印迹法 真空转移法 电转移法
②常用的转移方法 毛细管渗吸印迹法 真空转移法 电转移法
毛细管渗吸印迹法 >利用浓盐转移缓冲液的推动作用,将凝胶中的 DNA转移到固相支持物上。 >基本原理:容器中的转移缓冲液含有高浓度的 NaC和柠檬酸钠,上层吸水纸的虹吸作用使缓 冲液通过滤纸桥、滤纸、凝胶、硝酸纤维素滤 膜向上运动,同时带动凝胶中的DNA片段垂直 向上运动,凝胶中的DNA片段移出凝胶而滞留 在膜上
➢利用浓盐转移缓冲液的推动作用,将凝胶中的 DNA转移到固相支持物上。 ➢基本原理:容器中的转移缓冲液含有高浓度的 NaCl和柠檬酸钠,上层吸水纸的虹吸作用使缓 冲液通过滤纸桥、滤纸、凝胶、硝酸纤维素滤 膜向上运动,同时带动凝胶中的DNA片段垂直 向上运动,凝胶中的DNA片段移出凝胶而滞留 在膜上 毛细管渗吸印迹法
凝胶 婆 玻璃板 尼龙膜 滤纸 白瓷盘 吸水纸 玻璃板 重物
白瓷盘 玻 璃 板 滤 纸 凝胶 尼龙膜 滤纸 吸水纸 玻璃板 重物 吸水纸转膜
毛细管法(Capillary blotting method) 重物 玻板 纸巾 3MM NCF 玻板 凝胶 滤纸 缓冲液 6×SSC 支撑物 Southern印迹:1977年southern发明 时间:<1kb<1hr, >15kb >18hr
毛细管法 (Capillary blotting method ) 纸巾 3MM NCF 凝胶 重物 玻板 滤纸 缓冲液 6×SSC 支撑物 玻板 Southern印迹:1977年southern发明 时间: < 1kb < 1hr, >15kb >18hr