(二)、氨基的反应(1)与亚硝酸的反应 R-CH(OH)-COOH + NR-CH(NH,)-COOH + HNO2该反应是定量完成的,所以通过测量氮气的体积就可以计算出氨基的含量,这个方法叫做范斯莱克氨基测定法。11
11 (1)与亚硝酸的反应 (二)、 氨基的反应 R-CH(NH2 )-COOH + HNO2 R-CH(OH)-COOH + N2 该反应是定量完成的,所以通过测量氮气的 体积就可以计算出氨基的含量,这个方法叫做范 斯莱克氨基测定法
(2)与甲醛反应氨基酸分子中的氨基可以和甲醛反应生成N-亚甲基氨基酸RCHCOOH + HCHO → RCHCOOH + H2ONH2N=CH2在N-亚甲基氨基酸中,氨基的碱性降低,不干扰酸碱滴定,故氨基酸与甲醛反应后可以用标准碱溶液来滴定羧基以测定氨基酸的含量。12
12 (2)与甲醛反应 氨基酸分子中的氨基可以和甲醛反应, 生成N-亚甲基氨基酸。 在N-亚甲基氨基酸中,氨基的碱性降低,不干 扰酸碱滴定,故氨基酸与甲醛反应后可以用标准碱 溶液来滴定羧基以测定氨基酸的含量。 RCHCOOH + HCHO RCHCOOH + H2 O NH2 N=CH2
(3)与2.4-二硝基氟苯反应(DNFB)RROH-O2NNH-CHCOOHNH2CHCOOH92NO2NO2(黄色)N-(2,4-二硝基苯基)氨基酸a:比色测定。b:标记多肽N-端氨基酸的试剂13
13 a: 比色测定。 b: 标记多肽N-端氨基酸的试剂 (3)与2,4-二硝基氟苯反应(DNFB) F + NH2 NO2 O2N CHCOOH R OH - NH NO2 O2N CHCOOH R N-(2,4-二硝基苯基)氨基酸(黄色)