（2）盐析、中和：滤液用 40%NaOH 液调节至 pH9 同时加入 7%精制食盐，即有黄色 不溶物析出，80℃保温，使沉淀凝聚，静置，倾出上层清液，用菊形滤纸过滤，得巴马汀游 离碱粗品，烘干。 （3）精制：将粗巴马汀，加 80%乙醇 100ml，加热回流使溶，约十分钟，乘热抽滤， 残渣再加少量乙醇同法处理一次，抽滤最后用滴管取乙醇淋洗布氏漏斗上不溶物，合并滤液 并向滤液中滴加 6N 盐酸至 PH2 放置，即有金黄色针状结晶析出，抽滤，再用乙醇重结晶一 次，方法，将氯化巴马汀粗晶置三角烧瓶内，用滴管加入 95%乙醇使结晶恰溶解（在水浴 上加热），抽滤得澄清液，加塞放置析晶。若滤液在抽滤时已析出结晶，可将它在水溶上加 热结晶全溶再加瓶塞放置，这样析出的晶形好。若滤液体积太大，可溶缩至瓶壁边沿略显固 体时加塞析晶。母液适当浓缩，又可析出一部分氯化巴马汀。 （4）还原：取氯化巴马汀精制品 1g。置 50~100ml 园底烧瓶中加蒸馏水 10ml，浓硫酸 0.5ml，锌粉 0.7g（工业生产应分批加入锌粉），直火加热保持沸腾，反应 4~5 小时（反应过 程加溶液颜色逐渐变淡直至无色），反应完毕，趁热倾出上层清液，再用蒸馏水少许（1~2ml） 稍加热洗涤反应瓶及锌渣 1~2 次，合并溶液放冷即有延胡索乙素酸性硫酸盐析出。抽滤，取 结晶置 25ml 锥形瓶中，用 70%乙醇 10ml 加热溶解。趁热抽滤，再用少量乙醇（1~2ml）洗 涤容器，向热溶液（约 60℃）中滴加氨水至 PH9，立即析出鳞片状结晶，抽滤，用蒸馏水 洗（此处所得结晶加水能否溶解？加氯仿能否溶解？）干燥得延胡素乙素游离碱。烘干。 （5）成盐：称取延胡索乙素游离碱 0.5 克。置于 25 毫升锥形瓶（或小烧瓶）中加 90% 乙醇 4 毫升，在水浴上加热使溶解，用粗毛细管滴加 5%硫酸乙醇液至刚果红试纸呈淡蓝色 （PH 约 5）放冷析晶。将微黄柱状结晶，抽滤干 50℃以下干燥，即延胡索乙素中性硫酸盐。 可用水重结晶一次，干燥后测熔点。溶点 ℃，得率 。 以醋酸水小样提取，一般得率 1~2%，用乙醇回流浸取得率 3~4%，取黄藤粗粉 100g， 用 95%乙醇回流浸取三、四次合并乙醇至约 120ml，即可按（3）精制项下操作，加盐酸得 氯化巴马汀。 3．提取工艺说明 （1）黄藤中含有多糖类物质溶于水，往往影响水浸液盐析及中和后的过滤，故宜在静 置后先倾泻去大部分澄清液再用布袋过滤收集沉淀，原料药材亦不宜粉碎太细。 （2）氯化巴马汀为金色针状结晶，并有强烈的黄色萤光。四氯巴马汀为先无色片状结 晶，不具萤光。因此，反应液的颜色可作为还原终点的判断。还原开始时，反应液为橙黄色， 随着还原反应的进行，反应液的色逐渐退去，至淡米色或无色即可作为反应的终点。 （3）四氢巴马汀较易氧化成巴马汀，所以制备过程中应尽快连续操作。 （4）四氢巴马汀的盐酸盐及酸性硫酸盐在水中的溶解度较小，故一般制成水溶性较大 的中性硫酸盐，供配制注射剂使用。 方法二
（2）盐析、中和：滤液用 40%NaOH 液调节至 pH9 同时加入 7%精制食盐，即有黄色 不溶物析出，80℃保温，使沉淀凝聚，静置，倾出上层清液，用菊形滤纸过滤，得巴马汀游 离碱粗品，烘干。 （3）精制：将粗巴马汀，加 80%乙醇 100ml，加热回流使溶，约十分钟，乘热抽滤， 残渣再加少量乙醇同法处理一次，抽滤最后用滴管取乙醇淋洗布氏漏斗上不溶物，合并滤液 并向滤液中滴加 6N 盐酸至 PH2 放置，即有金黄色针状结晶析出，抽滤，再用乙醇重结晶一 次，方法，将氯化巴马汀粗晶置三角烧瓶内，用滴管加入 95%乙醇使结晶恰溶解（在水浴 上加热），抽滤得澄清液，加塞放置析晶。若滤液在抽滤时已析出结晶，可将它在水溶上加 热结晶全溶再加瓶塞放置，这样析出的晶形好。若滤液体积太大，可溶缩至瓶壁边沿略显固 体时加塞析晶。母液适当浓缩，又可析出一部分氯化巴马汀。 （4）还原：取氯化巴马汀精制品 1g。置 50~100ml 园底烧瓶中加蒸馏水 10ml，浓硫酸 0.5ml，锌粉 0.7g（工业生产应分批加入锌粉），直火加热保持沸腾，反应 4~5 小时（反应过 程加溶液颜色逐渐变淡直至无色），反应完毕，趁热倾出上层清液，再用蒸馏水少许（1~2ml） 稍加热洗涤反应瓶及锌渣 1~2 次，合并溶液放冷即有延胡索乙素酸性硫酸盐析出。抽滤，取 结晶置 25ml 锥形瓶中，用 70%乙醇 10ml 加热溶解。趁热抽滤，再用少量乙醇（1~2ml）洗 涤容器，向热溶液（约 60℃）中滴加氨水至 PH9，立即析出鳞片状结晶，抽滤，用蒸馏水 洗（此处所得结晶加水能否溶解？加氯仿能否溶解？）干燥得延胡素乙素游离碱。烘干。 （5）成盐：称取延胡索乙素游离碱 0.5 克。置于 25 毫升锥形瓶（或小烧瓶）中加 90% 乙醇 4 毫升，在水浴上加热使溶解，用粗毛细管滴加 5%硫酸乙醇液至刚果红试纸呈淡蓝色 （PH 约 5）放冷析晶。将微黄柱状结晶，抽滤干 50℃以下干燥，即延胡索乙素中性硫酸盐。 可用水重结晶一次，干燥后测熔点。溶点 ℃，得率 。 以醋酸水小样提取，一般得率 1~2%，用乙醇回流浸取得率 3~4%，取黄藤粗粉 100g， 用 95%乙醇回流浸取三、四次合并乙醇至约 120ml，即可按（3）精制项下操作，加盐酸得 氯化巴马汀。 3．提取工艺说明 （1）黄藤中含有多糖类物质溶于水，往往影响水浸液盐析及中和后的过滤，故宜在静 置后先倾泻去大部分澄清液再用布袋过滤收集沉淀，原料药材亦不宜粉碎太细。 （2）氯化巴马汀为金色针状结晶，并有强烈的黄色萤光。四氯巴马汀为先无色片状结 晶，不具萤光。因此，反应液的颜色可作为还原终点的判断。还原开始时，反应液为橙黄色， 随着还原反应的进行，反应液的色逐渐退去，至淡米色或无色即可作为反应的终点。 （3）四氢巴马汀较易氧化成巴马汀，所以制备过程中应尽快连续操作。 （4）四氢巴马汀的盐酸盐及酸性硫酸盐在水中的溶解度较小，故一般制成水溶性较大 的中性硫酸盐，供配制注射剂使用。 方法二
1． 流程 2．工艺 （1）提取：黄藤粗粉 20g，用 95%EtOH 回流提取 2 次，每次 1 小时，乙醇用量为 100ml， 合并二次醇提取液，浓缩至 3~4ml，用吸管转移到 5ml 小锥形瓶中，放置，析晶，抽滤得巴 马汀粗晶。 （2）分离：将巴马汀粗晶用 10ml 水溶解后，抽滤。不溶物主要为黄藤内酯。滤液滴 加 HCl 至 PH2，再加 10%NaCl 进行盐析放置，析出黄色不溶物，抽滤得氯化巴马汀粗晶。 （3）精制：用 70%EtOH 热溶氯化巴马汀粗晶，过滤，滤液析晶，抽滤，得精制氯化 巴马汀。干燥称重 克，测溶点 ℃。 （4）氢化：精制氯化巴马汀用 50%甲醇溶液，加入因体 KBH2 约 0.2g，直到甲醇液迅 速由黄变白或微黄色。滴加 HCl 至 PH2 并加热使多余的 KBH4 分解，再趁热滴加 NH4OH 使 反应液呈碱性，立即析出鳞片状四氢巴马汀粗晶，抽滤得结晶，红外线灯下干燥，再用 EtOH-H2O 重结晶，得精制四氢巴马汀。干燥称重 克，薄层层析检查纯度。熔 点 ℃。 3．巴马汀原位还原反应 在硅胶 CMC- Na 薄层板的起始线上点自制的巴马汀乙醇液，及对照品巴马汀乙醇液及 四氢巴马汀乙醇液。然后再在自制的巴马汀的原点加点 2%KBH4 甲醇液 2~3 次，吹干，氨 缸中饱和后，以 CHCl2OH(3:1)展开，改良碘化铋钾试液显色。巴马汀 Rf 值 0.4 左右，四氢 巴马汀 Rf 值约 0.9，进行原位反应的巴马汀如氢化彻底，应和对照品氢巴马汀的 Rf 值一致， 如反应不彻底则出现二个斑点，其 Rf 值分别与对照品巴马汀及四氢巴马汀一致。 四、黄藤中生成碱的检识： 黄藤粗粉 （提取） 95%EtOH回流 乙醇液 浓缩，析晶 巴马汀粗晶 分离 H2O溶 不溶物（主含黄藤内酯） 黄藤内酯粗晶 丙酮结晶 （成盐，盐析） 水液 氯化巴马汀 （重结晶） （重结晶） 精制氯化巴马汀 加HCl至PH2加NaCl放置，抽滤 70%EtOH热溶放置析晶，抽滤 （氢化） 延胡索乙素粗晶 延胡索乙素精品 EtOH - 溶于50%MeOH加固体KBH4 H2O
1． 流程 2．工艺 （1）提取：黄藤粗粉 20g，用 95%EtOH 回流提取 2 次，每次 1 小时，乙醇用量为 100ml， 合并二次醇提取液，浓缩至 3~4ml，用吸管转移到 5ml 小锥形瓶中，放置，析晶，抽滤得巴 马汀粗晶。 （2）分离：将巴马汀粗晶用 10ml 水溶解后，抽滤。不溶物主要为黄藤内酯。滤液滴 加 HCl 至 PH2，再加 10%NaCl 进行盐析放置，析出黄色不溶物，抽滤得氯化巴马汀粗晶。 （3）精制：用 70%EtOH 热溶氯化巴马汀粗晶，过滤，滤液析晶，抽滤，得精制氯化 巴马汀。干燥称重 克，测溶点 ℃。 （4）氢化：精制氯化巴马汀用 50%甲醇溶液，加入因体 KBH2 约 0.2g，直到甲醇液迅 速由黄变白或微黄色。滴加 HCl 至 PH2 并加热使多余的 KBH4 分解，再趁热滴加 NH4OH 使 反应液呈碱性，立即析出鳞片状四氢巴马汀粗晶，抽滤得结晶，红外线灯下干燥，再用 EtOH-H2O 重结晶，得精制四氢巴马汀。干燥称重 克，薄层层析检查纯度。熔 点 ℃。 3．巴马汀原位还原反应 在硅胶 CMC- Na 薄层板的起始线上点自制的巴马汀乙醇液，及对照品巴马汀乙醇液及 四氢巴马汀乙醇液。然后再在自制的巴马汀的原点加点 2%KBH4 甲醇液 2~3 次，吹干，氨 缸中饱和后，以 CHCl2OH(3:1)展开，改良碘化铋钾试液显色。巴马汀 Rf 值 0.4 左右，四氢 巴马汀 Rf 值约 0.9，进行原位反应的巴马汀如氢化彻底，应和对照品氢巴马汀的 Rf 值一致， 如反应不彻底则出现二个斑点，其 Rf 值分别与对照品巴马汀及四氢巴马汀一致。 四、黄藤中生成碱的检识： 黄藤粗粉 （提取） 95%EtOH回流 乙醇液 浓缩，析晶 巴马汀粗晶 分离 H2O溶 不溶物（主含黄藤内酯） 黄藤内酯粗晶 丙酮结晶 （成盐，盐析） 水液 氯化巴马汀 （重结晶） （重结晶） 精制氯化巴马汀 加HCl至PH2加NaCl放置，抽滤 70%EtOH热溶放置析晶，抽滤 （氢化） 延胡索乙素粗晶 延胡索乙素精品 EtOH - 溶于50%MeOH加固体KBH4 H2O
1．生物碱沉淀反应 取黄藤的 15 醋酸浸出液每份 1ml，置小试管中，分别滴加下列各试剂 2~3 滴，观察并 记录有无沉淀产生及颜色变化。 （1）碘化铋钾试剂 （2）硅钨酸试剂 （3）苦味酸试剂（样品液需调至中性） （4）鞣酸试剂 2．薄层层析 硅胶-CMC- Na 薄层 样品 巴马汀，小檗碱，药根碱，延胡索乙素，制备巴马汀后的母液，盐析后的水母 液展开剂氯仿-甲醇（3：1），展开前薄层板先在氨缸中饱和 5 分钟。 显色 先在紫外灯下观察萤光下观察萤光，然后再喷以改良碘经铋钾试液显色如果用 中性或碱性氧化铝薄层，展开剂可用氯仿。 记录：薄层层析图谱。说明各母液中还有什么化合物。 五、主要提取成分的理化性质： 1．氯化巴马汀： Mp 209~20℃（分解） UV λMeOH max nm:224,265-273,337-347,430 λ MeOH min nm：249，302，377 IR VKBr maxcm-1 :2940,1600,1510,1450,1362,1329,1270,1230,1215,1190,1135,1105,1062, 1017, 905, 902,882,869,807 NMR (CF3COOH)3 : 3.97(3H,S,OCH3); 4.03(3H,S,OCH3); 4.09(3H,S,OCH3)； 4.23(3H,S,OCH3); 3.26(2H,t,C5-H); 4.39(2H,t,C6-H); 6.96(1H,S,Ar-H)； 7.54(1H,S,Ar-H); 7.94(2H,S,Ar-H); 8.44(1H,S,C13-H); 9.51(1H,S,C3-H) 2．消旋四氢巴马汀： mp 149℃ UV λMeOH max（10ge）:232(3.835) IR VKBr maxcm-1 2935，2915，2320，2780，2715，1605，1505，1487，1448，1420， 1335，1352，1300，1266，1248，1220，1204，1135，1100，1075， 1020，950，352，890，700 NMR(CDCl3) 2 : 3.32(12H,S,4×OCH3)；3.54,4.22(2H,ABq,J=16Hz C3-H)；6.58(1H,S,Ar-H), 6.70(1H,S,Ar-H)；6.75,6.94(2H,ABq,J=8Hz,Ar-H) 3．巴马汀： MS m/e 353（M+1），337，332，307
1．生物碱沉淀反应 取黄藤的 15 醋酸浸出液每份 1ml，置小试管中，分别滴加下列各试剂 2~3 滴，观察并 记录有无沉淀产生及颜色变化。 （1）碘化铋钾试剂 （2）硅钨酸试剂 （3）苦味酸试剂（样品液需调至中性） （4）鞣酸试剂 2．薄层层析 硅胶-CMC- Na 薄层 样品 巴马汀，小檗碱，药根碱，延胡索乙素，制备巴马汀后的母液，盐析后的水母 液展开剂氯仿-甲醇（3：1），展开前薄层板先在氨缸中饱和 5 分钟。 显色 先在紫外灯下观察萤光下观察萤光，然后再喷以改良碘经铋钾试液显色如果用 中性或碱性氧化铝薄层，展开剂可用氯仿。 记录：薄层层析图谱。说明各母液中还有什么化合物。 五、主要提取成分的理化性质： 1．氯化巴马汀： Mp 209~20℃（分解） UV λMeOH max nm:224,265-273,337-347,430 λ MeOH min nm：249，302，377 IR VKBr maxcm-1 :2940,1600,1510,1450,1362,1329,1270,1230,1215,1190,1135,1105,1062, 1017, 905, 902,882,869,807 NMR (CF3COOH)3 : 3.97(3H,S,OCH3); 4.03(3H,S,OCH3); 4.09(3H,S,OCH3)； 4.23(3H,S,OCH3); 3.26(2H,t,C5-H); 4.39(2H,t,C6-H); 6.96(1H,S,Ar-H)； 7.54(1H,S,Ar-H); 7.94(2H,S,Ar-H); 8.44(1H,S,C13-H); 9.51(1H,S,C3-H) 2．消旋四氢巴马汀： mp 149℃ UV λMeOH max（10ge）:232(3.835) IR VKBr maxcm-1 2935，2915，2320，2780，2715，1605，1505，1487，1448，1420， 1335，1352，1300，1266，1248，1220，1204，1135，1100，1075， 1020，950，352，890，700 NMR(CDCl3) 2 : 3.32(12H,S,4×OCH3)；3.54,4.22(2H,ABq,J=16Hz C3-H)；6.58(1H,S,Ar-H), 6.70(1H,S,Ar-H)；6.75,6.94(2H,ABq,J=8Hz,Ar-H) 3．巴马汀： MS m/e 353（M+1），337，332，307
实验四 虎杖中游离羟基蒽醌成分的提取和分离 虎杖为蓼科植物虎杖（Polygonumcus pidatum siedet Zucc）的根及根茎。别名阴阳莲， 花斑竹。味苦、性微寒。能清热解毒、祛风利湿、利尿通淋、祛痰、止咳、通经等。主要用 于湿热黄疸、风湿痹痛、淋浊带下、经闭、烫伤。 虎杖中含有较多的羟基蒽醌类成分及二苯乙烯类成分。其中主要有大黄素、大黄、大 黄素-6-甲醚、大黄素 3-D-葡萄糖苷及β-谷甾醇、鞣质等。虎杖得主要药理作用有抗菌、抗 病毒及镇咳平喘、常用来治疗急性炎症、烧烫伤、肝炎、气管炎等。 一、虎杖中主要成分的结构与性质 1．大黄素（Emodin）：橙黄色长针晶（丙酮中结晶为橙色， 甲醇中结晶为黄色），mp256-257℃。几不溶于水，对于下列溶 剂的溶介度分别为：四氯化碳 0.01%，氯仿 0.0718%，二硫化碳 0.009%，乙醚 0.14%，苯 0.0415。易溶于乙醇，可溶于氨水，碳 酸钠和氢氧化钠水溶液。 2．大黄酚（Chrysophanol）:金黄色六角型片状结晶（丙酮中 结晶）或针状结晶（乙醇中结晶）。mp 196℃，能升华。易溶于乙 醚、氯仿、苯、冰乙酸、乙醇, 稍溶于甲醇，难溶于石油醚，不溶 于水、碳酸氢钠和碳酸钠水溶液。可溶氢氧化钠水溶液及热碳 酸钠水溶液。 3．大黄素 6-甲醚，（Emodinmonomethl ether）:金黄色针 晶，mp207℃，能升华。可溶于氢氧化钠水溶液，溶解度与大 黄酚相似。 4．大黄素 6-甲醚 6-D-葡萄糖苷（Anthraglycosibe A）：黄色针 晶（稀甲醇中结晶）mp230-232℃。 5．大黄素 3-D-葡萄糖苷（Anthraglycoside B）:浅黄色针晶（稀 乙醇中结晶含 1 分子水 mp190-191℃。 6 ． 白 藜 芦 醇 （ Resveratrol ）： 无 色 针 状 结 晶 ， mp256-257℃，216℃升华，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、 丙酮等。 OH HO OH CH3 O O OH OH CH3 O O OH OH CH3O CH O O 3 O CH3O O OH O CH3 glu O HO CH glu O O OH 3 CH CH OH OH HO
实验四 虎杖中游离羟基蒽醌成分的提取和分离 虎杖为蓼科植物虎杖（Polygonumcus pidatum siedet Zucc）的根及根茎。别名阴阳莲， 花斑竹。味苦、性微寒。能清热解毒、祛风利湿、利尿通淋、祛痰、止咳、通经等。主要用 于湿热黄疸、风湿痹痛、淋浊带下、经闭、烫伤。 虎杖中含有较多的羟基蒽醌类成分及二苯乙烯类成分。其中主要有大黄素、大黄、大 黄素-6-甲醚、大黄素 3-D-葡萄糖苷及β-谷甾醇、鞣质等。虎杖得主要药理作用有抗菌、抗 病毒及镇咳平喘、常用来治疗急性炎症、烧烫伤、肝炎、气管炎等。 一、虎杖中主要成分的结构与性质 1．大黄素（Emodin）：橙黄色长针晶（丙酮中结晶为橙色， 甲醇中结晶为黄色），mp256-257℃。几不溶于水，对于下列溶 剂的溶介度分别为：四氯化碳 0.01%，氯仿 0.0718%，二硫化碳 0.009%，乙醚 0.14%，苯 0.0415。易溶于乙醇，可溶于氨水，碳 酸钠和氢氧化钠水溶液。 2．大黄酚（Chrysophanol）:金黄色六角型片状结晶（丙酮中 结晶）或针状结晶（乙醇中结晶）。mp 196℃，能升华。易溶于乙 醚、氯仿、苯、冰乙酸、乙醇, 稍溶于甲醇，难溶于石油醚，不溶 于水、碳酸氢钠和碳酸钠水溶液。可溶氢氧化钠水溶液及热碳 酸钠水溶液。 3．大黄素 6-甲醚，（Emodinmonomethl ether）:金黄色针 晶，mp207℃，能升华。可溶于氢氧化钠水溶液，溶解度与大 黄酚相似。 4．大黄素 6-甲醚 6-D-葡萄糖苷（Anthraglycosibe A）：黄色针 晶（稀甲醇中结晶）mp230-232℃。 5．大黄素 3-D-葡萄糖苷（Anthraglycoside B）:浅黄色针晶（稀 乙醇中结晶含 1 分子水 mp190-191℃。 6 ． 白 藜 芦 醇 （ Resveratrol ）： 无 色 针 状 结 晶 ， mp256-257℃，216℃升华，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、 丙酮等。 OH HO OH CH3 O O OH OH CH3 O O OH OH CH3O CH O O 3 O CH3O O OH O CH3 glu O HO CH glu O O OH 3 CH CH OH OH HO
7．白藜芦醇葡萄糖苷（polydotinpeceid）：无色颗 粒状结晶，双熔点分别为 130-140℃225～226℃，易溶 于甲醇、乙醇、丙酮、热水，可溶于乙酸乙酯、可溶 于碳酸钠和氢氧化钠水溶液中，稍溶于冷水，难溶于 乙醚。 8．β-谷甾醇 9．鞣质：属缩合鞣质，可溶于醇及水，不溶于苯、乙醚、氯仿等。 另外。虎杖叶、茎中含少量羟基蒽醌类化合物、有机酸、槲皮苷、异槲皮苷、虎杖黄酮 苷、扁蓄苷、金丝桃苷及芸苷、Vtio 等。 二、实验原理： 羟基醌类化合物及二苯乙烯类成分，均可溶于乙醇中，故可用乙醇将它们取出来。羟基 蒽醌类易溶于乙醚等弱极性溶剂，白藜芦醇苷在乙醚中溶解度很小，利用它们对乙醚的溶解 性差异使羟基蒽醌类与白藜芦醇苷分离，再利用各羟基蒽醌类结构上的不同所表现酸性不 同，用 PH 梯度萃取法分离它们。 三、实验方法： （一）提取 乙醇总提取物的制备：取虎杖粗粉 200g，于 1000ml 圆底烧瓶中回流，第一次加 500ml 乙醇回流一小时，第二次加 300ml 乙醇回流 30 分钟，第三次加 250ml 乙醇回流 30 分钟， 合并三次乙醇提取液，放置，如有沉淀可过滤一次，滤液减压回收乙醇至干，得膏状物。 （二）分离 1．亲脂性成分与亲水性成分的分离： 将上述膏状物加水 10ml，乙醚 100ml 充分振摇后放置，将乙醚液倾于 500ml 三角瓶 中（水层不可倒出），再于烧瓶中加 50ml 乙醚振摇，放置，倾出乙醚液，同法操作六次， 合并乙醚液即为亲脂性成分——总游离蒽醌，乙醚提取过的剩余物中含水溶性成分。 2．游离蒽醌分离： （1）强酸性成分的分高：将上述含总游离蒽醌的乙醚液置 100ml 分液漏斗中，加 5%碳 酸氢钠水溶液 40ml 萃取（测 5%碳酸氢钠 PH 值），放置使充分分层，若提取过程中乙醚挥 发可补充，分出碱水溶液同法提取二次，合并碱水提取液，在搅拌下缓缓滴加 6N 盐酸调至 pH2 注意观察颜色变化，稍放置即可析出沉淀，抽滤，用水洗涤沉淀中性，将沉淀置表面器 上干燥，得强酸性成分。 （2）中等酸性成分——大黄素的分离：碳酸氢钠萃取过的乙醚液用 5%碳酸钠溶液（测 5%碳酸钠水溶液的 pH 值）萃取 5～9 次，每次 40ml，直至萃取液较浅为止。合并碳酸钠提 取液，小心加盐酸调 pH3，放置，抽滤，水洗沉淀至中性，抽干，干燥称重。以甲醇一氯仿 CH CH OH O HO glu
7．白藜芦醇葡萄糖苷（polydotinpeceid）：无色颗 粒状结晶，双熔点分别为 130-140℃225～226℃，易溶 于甲醇、乙醇、丙酮、热水，可溶于乙酸乙酯、可溶 于碳酸钠和氢氧化钠水溶液中，稍溶于冷水，难溶于 乙醚。 8．β-谷甾醇 9．鞣质：属缩合鞣质，可溶于醇及水，不溶于苯、乙醚、氯仿等。 另外。虎杖叶、茎中含少量羟基蒽醌类化合物、有机酸、槲皮苷、异槲皮苷、虎杖黄酮 苷、扁蓄苷、金丝桃苷及芸苷、Vtio 等。 二、实验原理： 羟基醌类化合物及二苯乙烯类成分，均可溶于乙醇中，故可用乙醇将它们取出来。羟基 蒽醌类易溶于乙醚等弱极性溶剂，白藜芦醇苷在乙醚中溶解度很小，利用它们对乙醚的溶解 性差异使羟基蒽醌类与白藜芦醇苷分离，再利用各羟基蒽醌类结构上的不同所表现酸性不 同，用 PH 梯度萃取法分离它们。 三、实验方法： （一）提取 乙醇总提取物的制备：取虎杖粗粉 200g，于 1000ml 圆底烧瓶中回流，第一次加 500ml 乙醇回流一小时，第二次加 300ml 乙醇回流 30 分钟，第三次加 250ml 乙醇回流 30 分钟， 合并三次乙醇提取液，放置，如有沉淀可过滤一次，滤液减压回收乙醇至干，得膏状物。 （二）分离 1．亲脂性成分与亲水性成分的分离： 将上述膏状物加水 10ml，乙醚 100ml 充分振摇后放置，将乙醚液倾于 500ml 三角瓶 中（水层不可倒出），再于烧瓶中加 50ml 乙醚振摇，放置，倾出乙醚液，同法操作六次， 合并乙醚液即为亲脂性成分——总游离蒽醌，乙醚提取过的剩余物中含水溶性成分。 2．游离蒽醌分离： （1）强酸性成分的分高：将上述含总游离蒽醌的乙醚液置 100ml 分液漏斗中，加 5%碳 酸氢钠水溶液 40ml 萃取（测 5%碳酸氢钠 PH 值），放置使充分分层，若提取过程中乙醚挥 发可补充，分出碱水溶液同法提取二次，合并碱水提取液，在搅拌下缓缓滴加 6N 盐酸调至 pH2 注意观察颜色变化，稍放置即可析出沉淀，抽滤，用水洗涤沉淀中性，将沉淀置表面器 上干燥，得强酸性成分。 （2）中等酸性成分——大黄素的分离：碳酸氢钠萃取过的乙醚液用 5%碳酸钠溶液（测 5%碳酸钠水溶液的 pH 值）萃取 5～9 次，每次 40ml，直至萃取液较浅为止。合并碳酸钠提 取液，小心加盐酸调 pH3，放置，抽滤，水洗沉淀至中性，抽干，干燥称重。以甲醇一氯仿 CH CH OH O HO glu