或苯一氯仿（1：1）重结晶，得大黄酚和大黄素 6-甲醚混合物。 注：大黄酚和大黄素 6-甲醚二者相互分离比较困难，在本实验薄层条件下为同一斑点， 可用层析用磷酸氢钙进行柱层析，以石油醚洗脱，下层黄色带洗脱后，以甲醇重结晶可得大 黄酚，上层黄色带洗脱后以甲醇重结晶可得大黄素 6-甲醚。 （3）中性成分——甾醇类化合物分离：氢氧化钠萃取过的乙醚液，用水洗至中性，以 无水硫酸钠脱水，回收乙醚得残留物，以甲醇热溶二次（10ml,5ml）过滤合并甲醇液，浓缩， 放置结晶，滤取沉淀并用少量石油醚洗涤，再用甲醇重结晶，得 β-谷甾醇，mp136～137℃， 取少许结晶，做醋酐——浓硫酸反应，观察现象。 （三）鉴定 化学检识：分别取大黄素、大黄酚等少许，用乙醚溶解，做如下反应： A：碱液试验：取试液 1ml，加 20%NaOH 数滴，观察颜色。 B．醋酸镁反应：取试样 1ml，加醋酸镁试剂数滴，观察现袋。 2．薄层鉴定： 吸附剂：硅胶—CMC 展开剂：C6H6—EtoAc(3:2 或 97：9)。 显色剂：（1）氨蒸气熏。（2）5%KOH 喷雾
或苯一氯仿（1：1）重结晶，得大黄酚和大黄素 6-甲醚混合物。 注：大黄酚和大黄素 6-甲醚二者相互分离比较困难，在本实验薄层条件下为同一斑点， 可用层析用磷酸氢钙进行柱层析，以石油醚洗脱，下层黄色带洗脱后，以甲醇重结晶可得大 黄酚，上层黄色带洗脱后以甲醇重结晶可得大黄素 6-甲醚。 （3）中性成分——甾醇类化合物分离：氢氧化钠萃取过的乙醚液，用水洗至中性，以 无水硫酸钠脱水，回收乙醚得残留物，以甲醇热溶二次（10ml,5ml）过滤合并甲醇液，浓缩， 放置结晶，滤取沉淀并用少量石油醚洗涤，再用甲醇重结晶，得 β-谷甾醇，mp136～137℃， 取少许结晶，做醋酐——浓硫酸反应，观察现象。 （三）鉴定 化学检识：分别取大黄素、大黄酚等少许，用乙醚溶解，做如下反应： A：碱液试验：取试液 1ml，加 20%NaOH 数滴，观察颜色。 B．醋酸镁反应：取试样 1ml，加醋酸镁试剂数滴，观察现袋。 2．薄层鉴定： 吸附剂：硅胶—CMC 展开剂：C6H6—EtoAc(3:2 或 97：9)。 显色剂：（1）氨蒸气熏。（2）5%KOH 喷雾
实验五 芦丁的提取、分离与鉴定 槐花米系豆科槐属植物槐树（Sophora japonica L）的花蕾，自古用作止血药物。治疗吐 血，痔疮便血、子宫出血、鼻血等症，所含主要成分为芸香苷，又称芦丁（Rutin，维生素 P）， 其含量高达 12～16%，有调节毛细血管渗透性之作用，临床用作毛细血管止血药，如复方 芦丁，也作为高血压的辅助治疗药物。 一、目的要求： 1．掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法。 2．掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层检查等手段在苷类结构鉴 定上的作用。 3．通过 UV、IR、HNMR 和 MS 图谱解析，了解光谱方法黄酮类化合物结构鉴定中的 作用。 二、已知重要成分性质： 1． 芦丁（芸香苷，rutin） 淡黄色针晶，水中结晶者含 3 分结晶水，C27H30O16·3H2O 100mmHg 和 110℃加热 12 小 时后，变为无水物，无水物于 25℃变棕，115～7℃软化，214～5℃发泡分解，1g 芦丁溶于 约 300ml 冷水，200ml 沸水，7ml 沸甲醇，溶吡啶，甲酰胺和碱液，微溶于乙醇、丙酮、乙 酸乙酯，不溶于氯仿，二硫化碳、乙醚、苯和石油醚。 2． 槲皮素（Guereetin） 为芦丁的苷元， C15H10O7，MW302.23； 含二分子结晶水为黄 色针晶，（稀乙醇）， 5～7℃失水，314℃ 解，1g 溶于 290ml 无水乙醇、23ml 沸乙醇，溶于冰醋一般在碱水中溶解显黄色，几不溶于 水。 3． 皂苷（Saponin） 粗品为白色粉末，mp 210℃～20℃（dec）。易溶于吡啶。能溶于 200 倍的甲醇，酸水解 得下列两种苷元及糖。糖为 葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄 醛酸内酯。 HO O OH O OR OH OH R= glu rha 芦丁 R= OH 槲皮素 HO OH HO CH2OH
实验五 芦丁的提取、分离与鉴定 槐花米系豆科槐属植物槐树（Sophora japonica L）的花蕾，自古用作止血药物。治疗吐 血，痔疮便血、子宫出血、鼻血等症，所含主要成分为芸香苷，又称芦丁（Rutin，维生素 P）， 其含量高达 12～16%，有调节毛细血管渗透性之作用，临床用作毛细血管止血药，如复方 芦丁，也作为高血压的辅助治疗药物。 一、目的要求： 1．掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法。 2．掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层检查等手段在苷类结构鉴 定上的作用。 3．通过 UV、IR、HNMR 和 MS 图谱解析，了解光谱方法黄酮类化合物结构鉴定中的 作用。 二、已知重要成分性质： 1． 芦丁（芸香苷，rutin） 淡黄色针晶，水中结晶者含 3 分结晶水，C27H30O16·3H2O 100mmHg 和 110℃加热 12 小 时后，变为无水物，无水物于 25℃变棕，115～7℃软化，214～5℃发泡分解，1g 芦丁溶于 约 300ml 冷水，200ml 沸水，7ml 沸甲醇，溶吡啶，甲酰胺和碱液，微溶于乙醇、丙酮、乙 酸乙酯，不溶于氯仿，二硫化碳、乙醚、苯和石油醚。 2． 槲皮素（Guereetin） 为芦丁的苷元， C15H10O7，MW302.23； 含二分子结晶水为黄 色针晶，（稀乙醇）， 5～7℃失水，314℃ 解，1g 溶于 290ml 无水乙醇、23ml 沸乙醇，溶于冰醋一般在碱水中溶解显黄色，几不溶于 水。 3． 皂苷（Saponin） 粗品为白色粉末，mp 210℃～20℃（dec）。易溶于吡啶。能溶于 200 倍的甲醇，酸水解 得下列两种苷元及糖。糖为 葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄 醛酸内酯。 HO O OH O OR OH OH R= glu rha 芦丁 R= OH 槲皮素 HO OH HO CH2OH