DNA分子变性( dnA denaturation) ●DS,DNA S DNA (加温,极端pH,尿素,酰胺) 变性过程的表现 次SS.DNA粘度降低 SS.DNA沉降速度加快 次SS.DNA分子的A260mmUV值上升 Hyperchromicity
DNA分子变性( DNA denaturation ) ● D.S. DNA S.S. DNA ( 加温, 极端pH, 尿素, 酰胺 ) 变性过程的表现 ☆ S.S. DNA粘度降低 ☆ S.S. DNA 沉降速度加快 ☆ S.S. DNA分子的A 260 nm UV 值上升 ( Hyperchromicity )
核酸的理化性质 三核酸的变性 2.熔解温度 热变性中光吸收达到最大吸收(完全变性)一半 (双螺旋结构失去一半)时的温度称为DNA的熔点 或熔解温度(Tm)
热变性中光吸收达到最大吸收(完全变性)一半 (双螺旋结构失去一半)时的温度称为DNA的熔点 或熔解温度(Tm)。 2. 熔解温度 核酸的理化性质 三 核酸的变性
核酸的理化性质 热变性曲线(熔解曲线) 0.70 065 在DNA发生热变 性的过程中 OEo A260随温度的变 化曲线。 065 50
热变性曲线 (熔解曲线) 图5-26 Tm的示意图 在DNA发生热变 性的过程中, A260随温度的变 化曲线。 核酸的理化性质
Concentration 50 ug/mL OD dNTPs 37 260 1.60 SS DNA 260 1.37 1.185 DS DNA A 260 1.0 Tm=OD增加值的中点温度(一般为8595℃)
1.185 1.0 1.37 OD ℃ Concentration 50 g/mL D.S DNA A260 = 1 S.S DNA A260 = 1.37 dNTPs A260 = 1.60 Tm = OD增加值的中点温度(一般为85-95℃)
核酸的理化性质 三核酸的变性 Tm值与DNA的均一性、G-G含量、介质离子强度、 pH等因素有关
Tm值与DNA的均一性、G-C含量、介质离子强度、 pH等因素有关。 核酸的理化性质 三 核酸的变性