C.酶水解 (2)氨基酸的分离鉴定 A.纸层析 B.薄层层析：硅胶、氧化铝、纤维素粉等 C.离子交换柱层析：离子交换树脂、原理、方法 c.o 6
C. 酶水解 （2） 氨基酸的分离鉴定 A. 纸层析 B．薄层层析：硅胶、氧化铝、纤维素粉等 C. 离子交换柱层析: 离子交换树脂、原理、方法 6
第二节蛋白质的结构 蛋白质的结构层次：一级结构、二级结构、超二级结构、结构域、 三级结构、四级结构 1. 蛋白质的一级结构 定义：一级结构是指蛋白质多肽链中的氨基酸排列顺序，包括肽 链数目和二硫键位置 蛋白质一级结构是高级结构的分子基础，它包含了决定蛋 白质分子所有结构层次构象的全部信息。 (1) 肽键和肽链 肽键：一个氨基酸的α羧基与另一个氨基酸的α氨基之间脱去 一分子水形成的共价键称为肽键。又称酰胺键。 N-d-0 IN-CH- H.O Amino acid 1 Amino acid 2 Dipeptide 肽链：多个氨基酸以肽键相连成链称肽链或多肽（二肽、三肽 多肽)
第二节 蛋白质的结构 蛋白质的结构层次：一级结构、二级结构、超二级结构、结构域、 三级结构、四级结构 1． 蛋白质的一级结构 定义：一级结构是指蛋白质多肽链中的氨基酸排列顺序，包括肽 链数目和二硫键位置。 蛋白质一级结构是高级结构的分子基础，它包含了决定蛋 白质分子所有结构层次构象的全部信息。 （1） 肽键和肽链 肽键：一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基之间脱去 一分子水形成的共价键称为肽键。又称酰胺键。 肽链：多个氨基酸以肽键相连成链称肽链或多肽（二肽、三肽. 多肽） 7
主链：-NCC-NCC-NCC_NCC-N 侧连：R 命名：氨基酸残基，N末端，C末端表达： (2).二硫键： -SS (3)蛋白质的一级结构测定-一-片段重叠法 A.原理： B.测定步骤 a.提纯蛋白质样品 b. 测定蛋白质的分子量和氨基酸组成 c.氨基酸末端分析(N-末端和C一末端) d.拆开二硫键： e.专一水解肽链成大小不等的一系列片段（化学法和酶法） f.分离纯化各肽段并采用Edman降解法测序 g用重叠法推断肽链全部氨基酸序列 h.二硫键的定位：（对角线电泳）
主链：-N—C—C—N—C—C—N—C—C—N—C—C—N- 侧连：R 命名：氨基酸残基， N-末端 ，C-末端 表达： (2). 二硫键: -S—S— (3) 蛋白质的一级结构测定-片段重叠法 A. 原理： B. 测定步骤 a． 提纯蛋白质样品 b． 测定蛋白质的分子量和氨基酸组成 c． 氨基酸末端分析（N-末端和 C—末端 ） d. 拆开二硫键 ： e. 专一水解肽链成大小不等的一系列片段（化学法和酶法） f．分离纯化各肽段并采用 Edman 降解法测序 g. 用重叠法推断肽链全部氨基酸序列 h. 二硫键的定位：（对角线电泳） 8
2.蛋白质的二级结构 蛋白质二级结构的概念：通过肽链上的羰基氧和亚氨基氢之间形 成的氢键，使肽链主链骨架上的局部区域形成有规则的空间排布。 这种主链上的、有规则的空间排布称为蛋白质的二级结构。包括： α一螺旋、B-折叠、B-转角和无规卷曲。 (1) 酰胺平面和蛋白质的构象 A.酰胺平面（肽平面、肽单位）： - e C-N0.147nm,C=N0.128nm,肽键0.132m 0R
2．蛋白质的二级结构 蛋白质二级结构的概念：通过肽链上的羰基氧和亚氨基氢之间形 成的氢键，使肽链主链骨架上的局部区域形成有规则的空间排布。 这种主链上的、有规则的空间排布称为蛋白质的二级结构。包括： α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲。 （1） 酰胺平面和蛋白质的构象 A. 酰胺平面（肽平面 、肽单位）： C—N 0.147 nm , C=N 0.128 nm , 肽键 0.132 nm 9