第十二章核酸和蛋白质的合成代谢 l958年，Francis Criek提出的中心法则： DNA+mRNA+蛋白质 0%000% 慰 第一节DNA的复制、损伤、修复与重组 一.DNA的复制 1.DNA复制的方式：半保留复制 Meselson and Stahl的实验证据：含lsN介质→l4N介质培养 多 2.DNA复制的特征
第十二章 核酸和蛋白质的合成代谢 1958 年，Francis Crick 提出的中心法则： DNA → mRNA → 蛋白质 第一节 DNA 的复制、损伤、修复与重组 一． DNA 的复制 1． DNA 复制的方式 ：半保留复制 Meselson and Stahl 的实验证据： 含15N介质→14N介质培养 2． DNA 复制的特征： 1
3.DNA聚合酶 (I)催化的反应：(dNMP)n+dNTP+(dNMP)a1+PP: 从5”+3”延长 (2)种类：DNA聚合酶I,Ⅱ，I (③)特点：高度精确，可进行自我校正（除去错配的核苷酸） (4)功能：1型A.5’+3?聚合酶活性；B.具有3'→ 5'外切酶活性和5'→3'外切酶活性 Templa D0少亚 [罗] -e+] 少0D 、3
3. DNA 聚合酶 : (1) 催化的反应：（dNMP）n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 从 5’ → 3’ 延长 （2）种类： DNA 聚合酶 I , II , III (3) 特点：高度精确，可进行自我校正（除去错配的核苷酸） （4）功能：I 型 A. 5’→3’ 聚合酶活性； B.具有 3’→ 5’外切酶活性和 5’→3’外切酶活性 2
Ⅱ型：高度专一于DNA修复功能 IⅢ型：主要负责DNA的复制 4.DNA的复制： 000000d 000P00 DNA连接酶的作用机制： 5.大肠杆菌的DNA复制阶段：起始、延长、终止 。○⊙O 88 3
II 型：高度专一于 DNA 修复功能 III 型：主要负责 DNA 的复制 4. DNA 的复制： DNA 连接酶的作用机制： 5．大肠杆菌的 DNA 复制阶段：起始 、延长 、终止 3
二.DNA的损伤、突变与修复 1.DNA损伤的形式：1)复制时的错配2)碱基的丢失、3) 由于删除或插入引起DNA链的突起4)紫外线诱导的嘧 啶二聚体的形成5)链的断裂（磷酸二酯键断裂）6)脱 氧核糖环断裂、DNA链的共价交联等。如图： 紫外损伤： 氧自由基的损伤 2.DNA的突变（mutation) (1).突变类型： (2).常见诱变剂有以下几种 1)碱基类似物：引起转换突变 2)碱基修饰剂：如亚硝酸能脱去碱基上的氨基，使腺嘌 呤脱氨成次黄嘌呤与胞嘧啶配对。烷化剂是极强的化学 诱变剂如：乙基甲烷磺酸、乙基乙烷磺酸、亚硝基胍等 3)嵌入染料：一些扁平稠环分子(EB等)插入DNA分 子将碱基之间的距离撑大一倍，正好占据一个碱基对的
二．DNA 的损伤、突变与修复 1． DNA 损伤的形式：1）复制时的错配 2）碱基的丢失、 3） 由于删除或插入引起 DNA 链的突起 4）紫外线诱导的嘧 啶二聚体的形成 5）链的断裂（磷酸二酯键断裂） 6）脱 氧核糖环断裂、DNA 链的共价交联等。如图： 紫外损伤： 氧自由基的损伤 2．DNA 的突变（ mutation） （1）．突变类型： （2）. 常见诱变剂有以下几种 1）碱基类似物：引起转换突变 2）碱基修饰剂：如 亚硝酸能脱去碱基上的氨基，使腺嘌 呤脱氨成次黄嘌呤与胞嘧啶配对。烷化剂是极强的化学 诱变剂如：乙基甲烷磺酸、乙基乙烷磺酸、亚硝基胍等。 3）嵌入染料：一些扁平稠环分子（EB 等）插入 DNA 分 子将碱基之间的距离撑大一倍，正好占据一个碱基对的 4
位置，引起两条链的错位。 4)紫外线和电离辐射 *0 3.DNA修复的主要方式 (1)错配修复（体系含12个以上个蛋白组分）：也称甲基指 导的错配修复，以模板链甲基作为标签识别修复部位。 ” (2).碱基切割修复：此类修复需DNA糖基化酶，该酶能识 别胞嘧啶和腺嘌呤脱氨基造成的损伤，并除去受影响的碱基。一 旦无碱基位点(AP位点)形成，必须由另一组酶来修复（如图）
位置，引起两条链的错位。 4）紫外线和电离辐射 3. DNA 修复的主要方式 （1） 错配修复（体系含 12 个以上个蛋白组分）：也称甲基指 导的错配修复，以模板链甲基作为标签识别修复部位。 （2）．碱基切割修复：此类修复需 DNA 糖基化酶，该酶能识 别胞嘧啶和腺嘌呤脱氨基造成的损伤，并除去受影响的碱基。一 旦无碱基位点（AP 位点）形成，必须由另一组酶来修复（如图）。 5