人类生命元素的基本数目:30亿!.GCTTCTTCCTCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCATCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCTTCTTCCTCATTTTCTCTCCACCATGCCGCCACCACGCCACCATGCTTCTTCCTCATCTCGCTTTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCGCTTCTTCCTCTCT
人类生命元素的基本数目: .GCTTCTTCCTCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCA TCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCTTCTTCCTCATTTTCTCT CCACCATGCCGCCACCACGCCACCATGCTTCTTCCTCATCTC GCTTTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCGCTTCTTCCtTCTCT. 30亿!
DNA测序分析DNA序列分析(DNA Sequencing)是指通过一定的方法确定DNA上的核苷酸排列顺序,是基因工程中的重要技术之一DNA序列分析技术极大地促进了基因的分离与鉴定,基因的表达调控及基因的结构与功能的研究
8 DNA序列分析(DNA Sequencing)是指通过一定 的方法确定DNA上的核苷酸排列顺序,是基因工程 中的重要技术之一。 DNA序列分析技术极大地促进了基因的分离与鉴 定,基因的表达调控及基因的结构与功能的研究。 DNA测序分析
第一代测序技术(Sanger测序)Single-stranded DNAto be sequenced3Add:DNApolymeraseIdATPdGTPdCTPdTTPpluslimitingamountsoffluorescentlylabeledddATPddGTPdACTPddTTPLargerfragments3'5GACTSotheElecbrophoresisUGseguenceAUTusinglasertooftheLactivate theternplateAfluorescentstrand isATdideoxyUnucleotidesandaUGdetectortoAUdistinguishtheLcolorsTAA37Smaller5'fragments
第一代测序技术(Sanger测序)
Sanger 双脱氧链终止法1968年独创性地设计了引物一延伸Dr. Ray Wu测序策略,并于1971年成功地测定了2-噬菌体两个黏性未端之间的全部序列。口Sanger在他的引物一延伸的基础上,发展出了快速测定DNA序列的未端终止法口Mullis采纳他的方法,完善了聚合酶链式反应PCR扩增DNA的方法Smith根据他的方法,发明了碱基定点突变技术10
10 Sanger 双脱氧链终止法 Dr. Ray Wu 1968年独创性地设计了引物-延伸 测序策略,并于1971年成功地测定了-噬菌体两个 黏性末端之间的全部序列。 Sanger在他的引物-延伸的基础上,发展出了快 速测定DNA序列的末端终止法 Mullis采纳他的方法,完善了聚合酶链式反应PCR 扩增DNA的方法 Smith根据他的方法,发明了碱基定点突变技术
Sanger双脱氧链终止法,1977年由Sanger建立。原理:利用2',3'-双脱氧三磷酸核苷酸(2',3'-ddNTP)来终止DNA复制反应2',3'-ddNTP与dNTP的不同之处在于它们在脱氧核糖的3'位置缺少一个羟基。它们可在DNA聚合酶作用下通过其5磷酸基掺入到真正延伸的DNA链中。由于缺少3羟基,不能与后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此,DNA链的合成被终止。11
11 Sanger 双脱氧链终止法 , 1977年由Sanger建立。 原理:利用2’,3’-双脱氧三磷酸核苷酸(2’,3’-ddNTP)来终 止DNA复制反应。 2’,3’-ddNTP与dNTP的不同之处在于它们在脱氧核 糖的3’位置缺少一个羟基。它们可在DNA聚合酶作 用下通过其5'磷酸基掺入到真正延伸的DNA链中。 由于缺少3'羟基,不能与后续的dNTP形成磷酸二酯 键,因此,DNA链的合成被终止