原理:将1mm2×0.1mm的薄层空间划分为400小格, 从中均匀分布地选取80或100小格,计数其中的细胞 数目,换算成单位体积中的细胞数。 适用范围:个体较大细胞或颗粒,如血球、酵母菌 等。不适用于细菌等个体较小的细胞,因为(1)细 菌细胞太小,不易沉降;(2)在油镜下看不清网格 线,超出油镜工作距离。 特点:快速,准确,对酵母菌可同时测定出芽率, 或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞。 1.血球计数板法
原理:将1mm2×0.1mm的薄层空间划分为400小格, 从中均匀分布地选取80或100小格,计数其中的细胞 数目,换算成单位体积中的细胞数。 适用范围:个体较大细胞或颗粒,如血球、酵母菌 等。不适用于细菌等个体较小的细胞,因为(1)细 菌细胞太小,不易沉降;(2)在油镜下看不清网格 线,超出油镜工作距离。 特点:快速,准确,对酵母菌可同时测定出芽率, 或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞。 1.血球计数板法
2.涂片染色法 应用:可同时计数不同微生物的菌数,适 于土壤、牛奶中细菌计数。 方法:用镜台测微尺计算出视野面积;取 0.1ml菌液涂于1cm2面积上,计数后代 入公式: 每ml原菌液含菌数 =视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100 ×稀释 倍数
2.涂片染色法 应用:可同时计数不同微生物的菌数,适 于土壤、牛奶中细菌计数。 方法:用镜台测微尺计算出视野面积;取 0.1ml菌液涂于1cm2面积上,计数后代 入公式: 每ml原菌液含菌数 =视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100 ×稀释 倍数
最常用的活菌计数法: 将适当稀释的菌液倾注平板或涂布在平板表面,经保 温培养后,以平板上出现的菌落数乘以稀释度就可以计算 出原菌液的含菌量。 直径9cm的培养皿平板上出现菌落数一般以50-500为宜。 按照国家标准规定的样品菌落总数测定的计数原则,以平 板菌落数在30-300之间为报告依据。 3.间接法(平板菌落计数法) 1ml 1ml 1ml 1ml 9ml 9ml 9ml 9ml 1ml 1ml 1ml ×2 ×2 ×2
最常用的活菌计数法: 将适当稀释的菌液倾注平板或涂布在平板表面,经保 温培养后,以平板上出现的菌落数乘以稀释度就可以计算 出原菌液的含菌量。 直径9cm的培养皿平板上出现菌落数一般以50-500为宜。 按照国家标准规定的样品菌落总数测定的计数原则,以平 板菌落数在30-300之间为报告依据。 3.间接法(平板菌落计数法) 1ml 1ml 1ml 1ml 9ml 9ml 9ml 9ml 1ml 1ml 1ml ×2 ×2 ×2
(a)The pour pate method (b)The spread plate method 100r01mt 0.1 ml ccntainng solid medium e Add melte nutrient aga Spread inoculum over surtace Swin to mix Cclonies Brow in and only on surface on sclidifiec ot mecium medium
3.平板菌落计数法 ★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速(15~20min完 成操作),严格无菌操作; ★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释度,样品混匀 处理,倾注平板时的培养基温度; ★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能在营养琼脂上生 长的微生物; ★误差:多次稀释造成的误差是主要来源,其次还有由于 样品内菌体分布不均匀、以及不当操作. ★A standard plate count (viable count) reflects the number of viable microbes and assumes that each bacterium grows into a single colony; plate counts are reported as number of colony-forming units (CFU) per ml (CFU/ml) or per g (CFU/g) of sample
3.平板菌落计数法 ★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速(15~20min完 成操作),严格无菌操作; ★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释度,样品混匀 处理,倾注平板时的培养基温度; ★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能在营养琼脂上生 长的微生物; ★误差:多次稀释造成的误差是主要来源,其次还有由于 样品内菌体分布不均匀、以及不当操作. ★A standard plate count (viable count) reflects the number of viable microbes and assumes that each bacterium grows into a single colony; plate counts are reported as number of colony-forming units (CFU) per ml (CFU/ml) or per g (CFU/g) of sample