SYBRGreenI法作用机理示意图热变性Primer退火PrimerPo延伸18
退 火 Primer F F F F SYBR Green I 法作用机理示意图 Pol. F Primer Pol. 延 伸 F F F F F F 热变性 Primer F F F F 18
TaqMan法作用机理TaqMan探针为一寡核苷酸，5'端标记一个报告基团（Reporter）3'端标记一个淬灭基团（Quencher）QR19
TaqMan法作用机理 TaqMan探针为一寡核苷酸， 5’ 端标记一个报告基团（Reporter）， 3’ 端标记一个淬灭基团（Quencher）。 R Q 19
TaqMan Probe法原理示意图Primer热变性PrimerPol退火延伸PrimerPol2020
R Q Primer R Q Primer R Q Primer Pol. Pol. 热变性 退 火 延 伸 TaqMan Probe法原理示意图 20 20
TaqMan Probe法原理示意图TaqMan探上游引P+535下游引物351.每产生一条DNA链，就切断一条探针2.每切断一条探针，就产生一个单位信号3.信号强度与结合探针的DNA分子数成正比
上游引 物 R Q 3’ 下游引 物 R Q 3’ 5’ TaqMan探 针 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 1.每产生一条DNA链，就切断一条探针 2.每切断一条探针，就产生一个单位信号 3.信号强度与结合探针的DNA分子数成正比 TaqMan Probe法原理示意图
SYBR Green丨法与Probe法比较·SYBRGreenI法Probe法特异性高简便易行价格便宜多重PCR检出要求反应的特异性Probe设计要求高不能进行多重PCRProbe合成费用高22
One-Step RT-PCR 特异性高 多重PCR检出 Probe设计要求高 Probe法 Probe合成费用高 SYBR Green I 法与Probe法比较 SYBR Green I 法 简便易行 价格便宜 要求反应的特异性 不能进行多重PCR 22