实验二 酵母菌大小的测定和细胞计数 一、实验目的 1、学会测微尺和血球计数板的使用方法。 2、建立对微生物大小的概念。 二、实验材料 1、显微镜、物镜测微尺、目镜测微尺、血球计数 板、载玻片等。 2、麦芽汁培养基、酵母菌。 3、吸管、吸水纸等
实验二 酵母菌大小的测定和细胞计数 一、实验目的 1、学会测微尺和血球计数板的使用方法。 2、建立对微生物大小的概念。 二、实验材料 1、显微镜、物镜测微尺、目镜测微尺、血球计数 板、载玻片等。 2、麦芽汁培养基、酵母菌。 3、吸管、吸水纸等
三、实验原理 (一)酵母菌大小的测定原理 所有微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微 尺来测量，先用绝对长度的物镜测微尺来校正不表 示绝对长度的目镜测微尺，计算后者每格所代表的 实际长度，然后放上待测的标本，用目镜测微尺测 定标本上微生物细胞占目镜测微尺的格数，就可计 算该微生物的大小。酵母菌的直径约8-10μm
三、实验原理 (一)酵母菌大小的测定原理 所有微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微 尺来测量，先用绝对长度的物镜测微尺来校正不表 示绝对长度的目镜测微尺，计算后者每格所代表的 实际长度，然后放上待测的标本，用目镜测微尺测 定标本上微生物细胞占目镜测微尺的格数，就可计 算该微生物的大小。酵母菌的直径约8-10μm
(二)酵母细胞计数原理 微生物常用的计数方法有两种，即直接计数法 和间接计数法。前者利用血球计数板在显微镜下直 接计数，能立即得到数值，但死活细胞都计数在内。 后者是在乎板上长成菌落后再计数，反应较真实， 但费时太长。本实验是利用血球计数板进行直接计 数。计数前需对样品做适当稀释，按照规定方法及 计算公式运算后，即可得出实际数值
(二)酵母细胞计数原理 微生物常用的计数方法有两种，即直接计数法 和间接计数法。前者利用血球计数板在显微镜下直 接计数，能立即得到数值，但死活细胞都计数在内。 后者是在乎板上长成菌落后再计数，反应较真实， 但费时太长。本实验是利用血球计数板进行直接计 数。计数前需对样品做适当稀释，按照规定方法及 计算公式运算后，即可得出实际数值
四、操作方法 (一)酵母菌大小测定的操作方法 1.测微尺的构造和使用方法 (1)目镜测微尺的构造 目镜测微尺是一块圆形玻片， 其中央刻有精确的刻度，通常是将5mm划分为50格， 实际每格等于100μm。刻度的大小是随使用的接目 镜和接物镜的放大倍数而改变，用前必须用物镜测微 尺来标定，如图。 (2)物镜测微尺的构造 物镜测微尺为一块特制的载 玻片，其中央有一小圆圈。圆圈内刻有分度，将长 1mm的直线等分为100小格，每小格等于10μm，如 图
四、操作方法 (一)酵母菌大小测定的操作方法 1.测微尺的构造和使用方法 (1)目镜测微尺的构造 目镜测微尺是一块圆形玻片， 其中央刻有精确的刻度，通常是将5mm划分为50格， 实际每格等于100μm。刻度的大小是随使用的接目 镜和接物镜的放大倍数而改变，用前必须用物镜测微 尺来标定，如图。 (2)物镜测微尺的构造 物镜测微尺为一块特制的载 玻片，其中央有一小圆圈。圆圈内刻有分度，将长 1mm的直线等分为100小格，每小格等于10μm，如 图
2.目镜测微尺的标定 (1)取下接目镜，旋下目镜上的目透镜，将目镜测微 尺放人接目镜的中隔板上，使有刻度的一面朝下， 再旋上目透镜，并装入镜筒内。 (2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，使有刻度 的一面朝上，同观察标本一样，使具有刻度的小圆 圈位于视野中央。 (3)先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微尺 的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与物镜 测微尺的刻度相平行，并使两尺的左边第一条线相 重合，再向右寻找两尺的另外一条重合线。如图 (4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测 微尺的格数
2.目镜测微尺的标定 (1)取下接目镜，旋下目镜上的目透镜，将目镜测微 尺放人接目镜的中隔板上，使有刻度的一面朝下， 再旋上目透镜，并装入镜筒内。 (2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，使有刻度 的一面朝上，同观察标本一样，使具有刻度的小圆 圈位于视野中央。 (3)先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微尺 的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与物镜 测微尺的刻度相平行，并使两尺的左边第一条线相 重合，再向右寻找两尺的另外一条重合线。如图 (4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测 微尺的格数