实验一 微生物染色 实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
实验一 微生物染色 实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
一、实验目的 学习微生物的染色原理、染色的基本操作技术,从而掌 握微生物的一般染色法和革兰氏染色法
一、实验目的 学习微生物的染色原理、染色的基本操作技术,从而掌 握微生物的一般染色法和革兰氏染色法
二、染色原理 由于微生物细胞含有大量水分,对光线的吸收和反射与水 溶液的差别不大,机体是无色透明的,与周围背景没有明显的 反差,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色, 使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观 察到其形态和结构。 微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电解质及其他化合物 组成。所以,微生物细胞表现出两性电解质的性质。两性电解 质兼有碱性基和酸性基,在酸性溶液中离解出碱性基呈碱性带 正电。在碱性溶液中离解出酸性基呈酸性带负电。 经测定,细菌等电点pH在2-5之间,故在中性、碱性或偏 酸性溶液中,细菌的等电点均低于上述溶液的pH值,所以细 菌带负电荷,容易与带正电荷的碱性染料结合,故用碱性染料 染色的较多。微生物体内各结构与染料结合力不同,故可用各 种染料分别染微生物的各结构以便观察
二、染色原理 由于微生物细胞含有大量水分,对光线的吸收和反射与水 溶液的差别不大,机体是无色透明的,与周围背景没有明显的 反差,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色, 使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观 察到其形态和结构。 微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电解质及其他化合物 组成。所以,微生物细胞表现出两性电解质的性质。两性电解 质兼有碱性基和酸性基,在酸性溶液中离解出碱性基呈碱性带 正电。在碱性溶液中离解出酸性基呈酸性带负电。 经测定,细菌等电点pH在2-5之间,故在中性、碱性或偏 酸性溶液中,细菌的等电点均低于上述溶液的pH值,所以细 菌带负电荷,容易与带正电荷的碱性染料结合,故用碱性染料 染色的较多。微生物体内各结构与染料结合力不同,故可用各 种染料分别染微生物的各结构以便观察
三、染色方法 (一)简单染色法 简单染色法又叫作普通染色法,只用一种染料使细菌染上 颜色,如果仅为了在显微镜下看清细菌的形态,用简单染色即 可
三、染色方法 (一)简单染色法 简单染色法又叫作普通染色法,只用一种染料使细菌染上 颜色,如果仅为了在显微镜下看清细菌的形态,用简单染色即 可
(二)复染色法 用两种或多种染料染细菌,目的是为了鉴别不同性质的细 菌,所以又叫鉴别染色法。主要的复染色法有革兰氏染色法和 抗酸性染色法。 革兰氏染色法:不仅能观察到细菌的形态,而且还可将所 有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细 菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴 性细菌,用G-表示。细菌对革兰氏染色的不同反应,是由于它 们细胞壁的成分和结构不同而造成的
(二)复染色法 用两种或多种染料染细菌,目的是为了鉴别不同性质的细 菌,所以又叫鉴别染色法。主要的复染色法有革兰氏染色法和 抗酸性染色法。 革兰氏染色法:不仅能观察到细菌的形态,而且还可将所 有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细 菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴 性细菌,用G-表示。细菌对革兰氏染色的不同反应,是由于它 们细胞壁的成分和结构不同而造成的