四 食品微生物检验染色法 微生物中细菌、致病菌是很小的生物体，必须通 过染色的方法，在显微镜下才能看得清楚，并且还可 以通过染色的方法鉴别革兰氏染色特性，以及是否长 有鞭毛、周毛、荚膜和芽孢等
四 食品微生物检验染色法 微生物中细菌、致病菌是很小的生物体，必须通 过染色的方法，在显微镜下才能看得清楚，并且还可 以通过染色的方法鉴别革兰氏染色特性，以及是否长 有鞭毛、周毛、荚膜和芽孢等
1、美蓝染色法 （一）吕氏碱性美蓝染色液 美蓝 0.3g 95%乙醇 30ml 0.01%氢氧化钾溶液 100ml 将美蓝溶解于乙醇中，然后于氢氧化钾溶液混合 （二）染色法 将涂片在火焰上固定，待冷却后滴加染液，染 1min~3min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 菌体呈蓝色
1、美蓝染色法 （一）吕氏碱性美蓝染色液 美蓝 0.3g 95%乙醇 30ml 0.01%氢氧化钾溶液 100ml 将美蓝溶解于乙醇中，然后于氢氧化钾溶液混合 （二）染色法 将涂片在火焰上固定，待冷却后滴加染液，染 1min~3min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 菌体呈蓝色
2、革兰氏染色法 （一）染色液 a、洁净紫染色液 结晶紫 1g 95%乙醇 20ml 1%草酸铵水溶液 80ml 将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 b、革兰氏碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分 振摇，待完全溶解后，在加蒸馏水至300ml
2、革兰氏染色法 （一）染色液 a、洁净紫染色液 结晶紫 1g 95%乙醇 20ml 1%草酸铵水溶液 80ml 将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 b、革兰氏碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分 振摇，待完全溶解后，在加蒸馏水至300ml
c、沙黄复染法 沙黄 0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml 将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。 （二）染色法 a、将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染 1min，水洗。 b、滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗
c、沙黄复染法 沙黄 0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml 将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。 （二）染色法 a、将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染 1min，水洗。 b、滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗
c、滴加95%乙醇脱色，约30s；或将乙醇滴满整个涂 片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s。 d、水洗，滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜 检。 （三）结果 革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 注：亦可用1：10稀释石炭酸复红染色液作复染液， 复染时间仅需10s
c、滴加95%乙醇脱色，约30s；或将乙醇滴满整个涂 片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s。 d、水洗，滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜 检。 （三）结果 革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 注：亦可用1：10稀释石炭酸复红染色液作复染液， 复染时间仅需10s