Chapter10酶的作用机制和酶的调节 、酶的活性部位 amino acid side chain 秘为 unfolded protein NH FOLDING c=N900o3 H (二)研究酶性部位(活性中心)的方法 1、侧链塞团化学修饰 2、动力学参数测定法 CHz aC 3、x射线晶体结构分析法
Chapter10 酶的作用机制和酶的调节 一、酶的活性部位 (一)酶活性部位的特点 在酶蛋白中只有少数特异的氨基酸残基参与底物结合及催化作用, 这些特异的氨基酸残基比较集中的区域,即与酶活力直接相关的区域 称为酶的活性部位或活性中心(通常将酶的结合部位和催化部位总称 为酶的活性部位或活性中心)。 (二)研究酶活性部位(活性中心)的方法 1、侧链基团化学修饰 2、动力学参数测定法 3、X射线晶体结构分析法
Chapter10酶的作用机制和酶的调节 二、酶活力的测定 ■1)酶活力:又称为酶活性,一般把酶催化一定化学反 应的能力称为酶活力,通常以在一定条件下酶所催化 的化学反应速度来表示。 因此酶活力可用单位时间内单位体积中底物的减少量 或产物的增加量表示,单位为mol/min等 2)酶活力单位:一般用活力单位UUni表示,许多酶 活力单位都是以最佳条件或某一固定条件下每分钟催化 生成一微摩尔产物所需要的酶量为一个酶活力单位
Chapter10 酶的作用机制和酶的调节 二、酶活力的测定 ◼ 1)酶活力:又称为酶活性,一般把酶催化一定化学反 应的能力称为酶活力,通常以在一定条件下酶所催化 的化学反应速度来表示。 ◼ 因此酶活力可用单位时间内单位体积中底物的减少量 或产物的增加量表示,单位为mol/min等 2)酶活力单位:一般用活力单位U(Unit)表示,许多酶 活力单位都是以最佳条件或某一固定条件下每分钟催化 生成一微摩尔产物所需要的酶量为一个酶活力单位
Chapter10酶的作用机制和酶的调节 二、酶活力的测定 3)酶的比活力:是指每毫克酶蛋白所含有的酶活力单位 数,它是酶制剂纯度的一个指标。 4)酶的收率:指纯化过程中酶活性的收率。 5)纯化倍数:指提纯后与提纯前酶比活力的比值
Chapter10 酶的作用机制和酶的调节 二、酶活力的测定 3)酶的比活力:是指每毫克酶蛋白所含有的酶活力单位 数,它是酶制剂纯度的一个指标。 4)酶的收率:指纯化过程中酶活性的收率。 5)纯化倍数:指提纯后与提纯前酶比活力的比值
Chapter10酶的作用机制和酶的调节 三、酶活性的调节控制和调节酶(413页) 调节酶:可以在多酶体系中对代谢反应起调节作用,它们本身的活 性受到严格的调节控制。主要指别构酶和共价调节酶。 (一)酶别构调控 别构酶:含有活性中心和别构中心,酶蛋白有多个亚基,有四级结构。 当转一性的代谢物非共价地结合到别构中心时,它的催化活性就发生 改变。 (二)可逆共价修饰调控 共价调节酶:其催化性质因受到一个小基团的共价修饰而发生显著的 变化,有活性与无活性相互转变。如糖原磷酸化酶因它的一个专一性丝氨 酸残基得失磷酸基团而发生活性变化
Chapter10 酶的作用机制和酶的调节 三、酶活性的调节控制和调节酶(413页) (一)酶别构调控 别构酶:含有活性中心和别构中心,酶蛋白有多个亚基,有四级结构。 当转一性的代谢物非共价地结合到别构中心时,它的催化活性就发生 改变。 调节酶:可以在多酶体系中对代谢反应起调节作用,它们本身的活 性受到严格的调节控制。主要指别构酶和共价调节酶。 (二)可逆共价修饰调控 共价调节酶:其催化性质因受到一个小基团的共价修饰而发生显著的 变化,有活性与无活性相互转变。如糖原磷酸化酶因它的一个专一性丝氨 酸残基得失磷酸基团而发生活性变化
Chapter10酶的作用机制和酶的调节 三、酶活性的调节控制和调节酶(413页) (三)酶原的激活 有些酶在生物体内首先合成的是酶的无活性前体形式,称为酶原,这些 酶原在一定的条件下,去掉一个或几个特殊的肽键,从而使酶的构象发生 定的变化,成为有活性的酶,这个过程叫酶原的激活。 ymotrypsinogen Tryp inactive) 245 Val-(ASP)4-LyB-ll trypsin SVal-(ASP)I-Lys 丌- Chymotrypsin Trypsin 241B 245 Arg lle chymotrypsin Serl4-ArgIb Agni a-Chy 2°13一
(三)酶原的激活 有些酶在生物体内首先合成的是酶的无活性前体形式,称为酶原,这些 酶原在一定的条件下,去掉一个或几个特殊的肽键,从而使酶的构象发生 一定的变化,成为有活性的酶,这个过程叫酶原的激活。 Chapter10 酶的作用机制和酶的调节 三、酶活性的调节控制和调节酶(413页)