Chapter13核酸的物理化学性质 Chapter14核酸的研究方法 Mned NH 2 N DNA(2 m diem) chosimanstbwn
Chapter13 核酸的物理化学性质 N N N H N NH2 Chapter14 核酸的研究方法
Chapter13核酸的物理化学性质 、核酸的水解 (一)核酸的酸水解或碱水解 核酸分子中的磷酸二酯键可在酸或碱性条件下水解切断。 DNA和RNA对酸或碱的耐受程度有很大差别。 例如,在0.1mo/NaOH溶液中,RNA几乎可以完全水解 生成2'或3'磷酸核苷;DNA在同样条件下则不受影响。这种水 解性能上的差别,与RNA核糖基上2-OH的邻基参与作用有很 大的关系。在RNA水解时,2′-OH首先进攻磷酸基,在断开磷 酯键的同时形成环状磷酸二酯,再在碱的作用形成水解产物。 DNA一般对碱稳定,RNA对碱不稳定
Chapter13 核酸的物理化学性质 一、核酸的水解 （一）核酸的酸水解或碱水解 ⚫核酸分子中的磷酸二酯键可在酸或碱性条件下水解切断。 ⚫DNA和RNA对酸或碱的耐受程度有很大差别。 例如，在0.1 mol/L NaOH溶液中，RNA几乎可以完全水解， 生成2′或3′磷酸核苷；DNA在同样条件下则不受影响。这种水 解性能上的差别，与RNA核糖基上2′-OH的邻基参与作用有很 大的关系。在RNA水解时，2′-OH首先进攻磷酸基，在断开磷 酯键的同时形成环状磷酸二酯，再在碱的作用形成水解产物。 DNA一般对碱稳定，RNA对碱不稳定
Chapter13核酸的物理化学性质 、核酸的水解 (二)核酸的酶水解 生物体内存在多种核酸水解酶。这些酶可以催化水解多聚核 苷酸链中的磷酸二酯鍵。 以DNA为底物的DNA水解酶( DNases)和以RNA为底物 的RNA水解酶( RNases)。 根据作用方式又分作两类:核酸外切酶和核酸内切酶。 核酸外切酶的作用方式是从多聚核苷酸链的一端(3‘端或5 端)开始,逐个水解切除核苷酸;核酸內切酶的作用方式刚 好和外切酶相反,它从多聚核苷酸链中向开始,在某个位点 切断磷酸二酯键。 在分子生物学研究中最有应用价值的是限制性核酸内切酶。 这种酶可以特异性的水解核酸中某些特定碱基顺序部位
（二）核酸的酶水解 一、核酸的水解 ⚫生物体内存在多种核酸水解酶。这些酶可以催化水解多聚核 苷酸链中的磷酸二酯键。 ⚫以DNA为底物的DNA水解酶（DNases）和以RNA为底物 的RNA水解酶（RNases）。 ⚫根据作用方式又分作两类：核酸外切酶和核酸内切酶。 ⚫核酸外切酶的作用方式是从多聚核苷酸链的一端（3′端或5′ 端）开始，逐个水解切除核苷酸；核酸内切酶的作用方式刚 好和外切酶相反，它从多聚核苷酸链中间开始，在某个位点 切断磷酸二酯键。 ⚫在分子生物学研究中最有应用价值的是限制性核酸内切酶。 这种酶可以特异性的水解核酸中某些特定碱基顺序部位。 Chapter13 核酸的物理化学性质
Chapter13核酸的物理化学性质 、核酸的水解 (二)核酸的酶水解 脱氧核糖核酸酹类 1、牛胰脱氧核糖核酸酶ω Nasel):从5′磷酸末端切下寡聚核苷酸。 2、牛脾脱氧核糖核酸酶⑩№ asell):从5′磷酸末端切下寡聚核苷 酸。 3、限制性内切酶:存在于细菌体内,用于专一性地降解外源的DNA 限制性内切酶已成为基因工程最重要的工具酶。如 ECORl (请看教材503504页)
Chapter13 核酸的物理化学性质 一、核酸的水解 （二）核酸的酶水解 脱氧核糖核酸酶类 1、牛胰脱氧核糖核酸酶(DNaseI)：从5′磷酸末端切下寡聚核苷酸。 2、牛脾脱氧核糖核酸酶(DNaseII) ：从5′磷酸末端切下寡聚核苷 酸。 3、限制性内切酶：存在于细菌体内，用于专一性地降解外源的DNA， 限制性内切酶已成为基因工程最重要的工具酶。如 EcoRI （请看教材503—504页）
Chapter13核酸的物理化学性质 、核酸的分子量、溶解性、粘度和酸 1、分子量在数百至数百万之间;微溶于水,不溶于 有机溶剂;变性时粘度降低; 2、核酸的碱基、核苷和核苷酸均能发生解离。在 定的条件下可形成兼性离子,为两性电解质,具有等 电点
二、核酸的分子量、溶解性、粘度和酸 碱性质 Chapter13 核酸的物理化学性质 1、 分子量在数百至数百万之间；微溶于水，不溶于 有机溶剂；变性时粘度降低； 2、核酸的碱基、核苷和核苷酸均能发生解离。在一 定的条件下可形成兼性离子，为两性电解质，具有等 电点