基因重组 ·转化 ·转导 ·接合 ·原生质体融合
基因重组 • 转化 • 转导 • 接合 • 原生质体融合
接合 E.coli S17-1 pCJY08 682kb -Spe EcoRI R.eutropha PHB-4
E. coli S17-1 R. eutropha PHB-4 接 合 K m r mo b rep P lac HindIII phaC2P s SpeI EcoRI pCJY08 6.82kb
原生质体融合 ·概念：通过人为方法，使遗传性状不同的两细胞的 原生质体发生融合，并进而发生遗传重组以产生同 时带有双亲性状的遗传性稳定的融合子的过程，称 为原生质体融合。 ·适用范围：各种生物细胞都能进行原生质体融合， 包括各种原核生物、真核微生物以及高等动植物和 人体的不同细胞
原生质体融合 •概念：通过人为方法，使遗传性状不同的两细胞的 原生质体发生融合，并进而发生遗传重组以产生同 时带有双亲性状的遗传性稳定的融合子的过程，称 为原生质体融合。 •适用范围：各种生物细胞都能进行原生质体融合， 包括各种原核生物、真核微生物以及高等动植物和 人体的不同细胞
原生质体融合 ·选择亲株→→制备原生质体一→原生质体融合→ 原生质体再生→→ 筛选优良性状的融合重组子 去壁 (高渗下) [AB-] [A'B- PEC或电脉冲 稀释，涂但 离心，促融 使细呢赔再生 8 去壁 (高添下) (高渗下) [A-B'] [A-B' 各种脸合子 亲株细图 原生质体 各种融合子影印接种检山[入'B】 饰选优良性状 长成菌落 【-] 融合子 的险合子 图836 原牛质体融合操作示意图
原生质体融合 •选择亲株→ →制备原生质体→→原生质体融合 → → 原生质体 再生 → → 筛选优良性状的融合重组子
原生质体融合 ·利用营养缺陷型作为遗传标记选择融合 子 ·利用抗药性作为遗传标记选择融合子 ·单亲灭活 ·荧光染色
原生质体融合 •利用营养缺陷型作为遗传标记选择融合 子 •利用抗药性作为遗传标记选择融合子 •单亲灭活 •荧光染色 •